添加面筋蛋白对猪肉热诱导凝胶品质及水分迁移特性的影响

以猪肉为原料,添加面筋蛋白,通过测定凝胶的蒸煮损失、保水性、质构、化学作用力、流变特性、微观结构以及水分迁移等指标,研究面筋蛋白对猪肉糜凝胶特性及水分分布迁移的影响。结果表明:随面筋蛋白添加量的增加,蒸煮损失持续下降(P<0.05),T2弛豫时间始终向短时间方向移动,不易流动水的比例显著增加,面筋蛋白提高了凝胶的保水性,但添加量超过6%,保水性上升不明显(P>0.05);添加面筋蛋白,凝胶硬度与咀嚼性上升明显,弹性趋势先上升后下降,在添加量为6%时最大,回复性持续增加,在添加量为6%时,为0.329,与添加量8%、10%相比,差异不显著(P>0.05);氢键和疏水相互作用是面筋蛋白肉糜凝胶形成的主要作用力;G′随面筋蛋白添加量增加而升高。面筋蛋白可以提高猪肉糜凝胶的形成能力,添加6%的面筋蛋白,猪肉糜凝胶致密均匀、光滑细腻,品质最佳。

介绍一种改进的、简便的凝胶迁移滞留试验法

目的 :改进凝胶迁移滞留试验 (EMSA)方法 ,运用该法检测新蛋白。方法 :抽提与定量核蛋白、DNA探针标记与纯化 ,探针与蛋白质的结合、电泳及放射自显影。结果 :采用本法简便、节约、灵敏度高、图像清晰、有可比性及重复性 ,成功运用于NF-κB及POT蛋白的检测。结论 :此法在本实验组运用过 ,可靠 ,值得应用与推广。

不同缓冲液对凝胶迁移试验的影响

凝胶迁移(EMSA)实验在理论上较简单,但在实际操作中需要对试验测定系统进行优化,缓冲液的选择是需要优化的因素之一。通过用T7RNA聚合酶与T7启动子DNA的结合反应来选择合适的缓冲液,结果表明,不同的缓冲液会影响凝胶迁移试验的结果,5×Buffer1结合缓冲液的效果较好;TBE电泳缓冲液比TAE、TGE的电泳效果好,同时在3种不同浓度的TBE缓冲液中,0.2×的TBE效果最好。

凝胶迁移阻滞法分析人类端粒酶的DNA结合特性

目的采用凝胶迁移阻滞法分析研究人类端粒酶DNA结合特性。方法以地高辛标记的人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物进行结合反应,以未参与结合反应的单纯标记寡核苷酸作为参照。实验所设的3组样品中,第一组和第二组标记寡核苷酸加端粒酶,第一组显示一条阻滞性条带,第二组显示两条条带,前方的一条与第一组条带平行,为单纯探针条带,后方的一条迁移率被阻滞,应为探针与纯化的蛋白复合体相结合的结果;第三组为标记寡核苷酸加端粒酶阴性洗涤液,只显示单一探针条带。结果只有人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物结合反应管显示特异的凝胶迁移阻滞性电泳条带。结论人端粒酶具有和端粒DNA片段结合的特性。

溶胶-凝胶法制备的Co_(0.5)Ni_(0.5)Fe_2O_4铁氧体纳米颗粒的离子迁移

用聚乙烯醇(PVA)溶胶-凝胶法制备了Co0.5Ni0.5Fe2O4铁氧体纳米颗粒,并对其进行了粉末X射线衍射(XRD)分析和高温穆斯堡尔测量。Co0.5Ni0.5Fe2O4铁氧体纳米颗粒样品的晶格常数比块体样品的大,这可能是由于纳米样品中表面离子的比例增大而引起的晶格膨胀所致。高温穆斯堡尔谱表明,四面体位(A位)和八面体位(B位)的德拜温度分别为θA=181±24K,θB=137±10K。在500K附近,开始产生明显的离子迁移,Fe3+离子从A位迁往B位。

非同位素标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活实验研究

目的:探讨地高辛标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活的优势。方法:用地高辛标记NF-κB基序DNA探针,检测标记效率,探针与核蛋白的结合反应产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜,高温干燥后,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体杂交,加入CSPD检测化学发光强度。结果:按照上述方法标记DNA探针,标记效率较高。样品核蛋白与地高辛标记的NF-κB基序DNA探针共同孵育,两者相互结合,进行凝胶迁移分析,出现高密度的迁移带。在反应体系中额外加入过量未标记的NF-κB基序DNA探针或抗NF-κB/P65或NF-κB/P50抗体后,抑制了两者的结合,迁移带消失,而加入过量未标记的Oct2A基序DNA探针,不能抑制两者结合,迁移带密度无明显降低,证实了核蛋白NF-κB与DNA探针结合的特异性。结论:本方法无放射性污染,无需特殊设备,操作简便、稳定性好、敏感性强,图像清晰、背景低。

碱激发胶凝材料硬化体内Na^(+)分布规律模拟

本工作通过试验探究了标准养护条件下的碱激发胶凝材料硬化体内Na^(+)在一维方向上的分布规律。同时,基于Fick扩散方程,采用COMSOL Multiphysics有限元模拟软件,通过有限元条件下硬化体内的Na^(+)扩散系数、湿度水头和孔隙率等边界条件的设定,建立了碱激发胶凝材料硬化体有限元模型,模拟了碱激发胶凝材料硬化体一维方向上Na^(+)的分布规律。试验结果表明,在标准养护条件下,0~3 d碱激发胶凝材料硬化体内Na^(+)的迁移量呈“∨”型分布,Na^(+)以两端析出为主,3~28 d碱激发胶凝材料硬化体内的Na^(+)迁移量呈“∧”型分布,Na^(+)以内部迁移为主。基于Fick扩散定律的COMSOL Multiphysics仿真模拟,在扩散系数D F,C=1×10^(-8)m^(2)/s、湿度水头∅=0.85、孔隙率p=20%的条件下建立溶质传递方程与溶剂运输方程,拟合得到的碱激发胶凝材料硬化体内Na^(+)一维分布规律与试验结果相近。本工作实现了基于试验的碱激发胶凝材料硬化体内Na^(+)一维分布的数学模拟。

自体富血小板血浆凝胶析出液对骨髓间充质干细胞迁移影响的体外研究

目的:观察富血小板血浆凝胶(PRG)析出液对骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移的影响。方法:全骨髓贴壁法体外培养犬BMSCs,二次离心法分离提取富血小板血浆并制备其凝胶析出液;将第3代BMSCs接种于Transwell小室,分别用含PRG析出液体积分数为0%(对照组)、1%、5%、10%、20%、50%的DMEM进行培养,观察5%PRG析出液作用不同时间(12、24、36 h)对BMSCs迁移活性的影响。结果:当培养液中含PRG析出液的浓度为1%、5%、10%、20%时,能明显促进BMSCs的迁移(P﹤0.05),而当PRG析出液浓度为50%时,则抑制BMSCs的迁移(P﹤0.05);5%PRG析出液促迁移作用最强,此后随PRG析出液浓度升高,促迁移作用越来越低,各浓度组间两两相比差异均有统计学意义(P<0.05);5%PRG析出液组作用于BMSCs 12、24、36 h均能明显促进BMSCs迁移(P<0.05),12 h组低于24 h和36 h组(P﹤0.05),24 h组与36 h组相比P﹥0.05。结论:含1%、5%、10%、20%PRG析出液的培养基均可明显促进BMSCs的迁移,在一定浓度范围内呈时间依赖性。

微波真空冷冻干燥功率对鸡蛋清水分迁移及凝胶微观结构的影响

探究微波真空冷冻干燥功率对鸡蛋清中水分迁移、热力学特性及凝胶微观结构的影响。采用低场核磁共振技术、差示扫描量热分析(differential scanning calorimetry,DSC)和扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)测定不同微波功率干燥条件下鸡蛋清中的水分迁移规律、蛋白的热力学特性和凝胶微观结构。结果表明,状态最为活跃的自由水在干燥过程中最先被除去,在90~180 min内脱除的速率最快;提高微波功率能够加快水分迁移的速度,有利于干燥的进行。DSC结果表明,微波功率为400 W和500 W时,蛋清粉峰值温度较高,从而引起蛋白质结构由有序变为无序。SEM结果表明,增大微波功率,鸡蛋清凝胶结构的孔道和孔径也随之增加,结构也变得较为疏松。该研究为微波真空冷冻干燥鸡蛋清粉工艺优化提供参考。

中酯化度果胶离子络合复合物凝胶对葡萄糖迁移的影响

通过控制中酯化度果胶多糖溶液pH、多价离子浓度以及对凝胶-溶胶温度曲线的测定,研究其凝胶敏感特性和可逆性能。利用中酯化度果胶多糖的凝胶特性,以体外模拟实验研究不同凝聚态多糖体系中葡萄糖的生成和迁移行为。结果表明:中酯化度果胶多糖具有酸敏感、多价离子敏感等凝胶特性,且其凝胶具有温度可逆性。在降低葡萄糖迁移速率和降低淀粉生成葡萄糖速率两方面,中酯化度果胶钙凝胶体系效果较其他体系明显,并且使生成葡萄糖呈均化释放。

影响凝胶迁移率实验因素的教学改进

凝胶迁移实验(EMSA-Electrophoretic Mobility Shift Assay)是一种研究蛋白质与核酸相互作用的常用实验技术。在凝胶迁移率实验的教学工作中,由于受实验材料的影响,尤其是EMSA探针浓度的变化,对实验结果的影响很大。为进一步提高实验教学效果,将探针浓度对实验结果的影响进行了比较。通过设置一系列浓度梯度实验,发现采用浓度为5nmol的探针实验效果最好,改进后的实验效果更加明显。

血小板凝胶制备方法的体外实验研究

目的优化血小板凝胶（platelet gel,PG）的制备方法。方法采用CCK-8试剂盒检测不同浓度外源性凝血酶、不同浓度血小板、血小板与激活剂不同比例制备的PG对ECV304细胞增殖的影响;通过细胞迁移试验检测不同浓度外源性凝血酶对ECV304细胞迁移的影响;采用ELISA试剂盒检测不同浓度外源性凝血酶和不同浓度血小板对VEGF释放量的影响。结果 PG促进ECV304细胞增殖和迁移;加入外源性凝血酶PG形成时间为40~60s,而不加外源性凝血酶PG形成时间600~1 200 s,但是不同浓度（0、100、1 000 U/ml）的凝血酶对ECV304细胞增殖和迁移影响甚微;PG促ECV304细胞增殖作用随血小板浓度的增加而增强,血小板浓度处于（1 500~2 500）×109/L时趋于稳定;富血小板血浆（PRP）与激活剂的比例为10∶1时促细胞增殖效果略优于5∶1;PG上清中VEGF含量随着PRP中血小板含量的增加而增加,不同浓度（0、100、1 000U/ml）凝血酶制备的PG上清中VEGF含量的差异,无统计学意义（P〉0.05）。结论常规采集PRP的血小板浓度（1 000×109/L左右）已能保证细胞增殖效果、满足用于临床的PG需求;PG是否添加激活剂凝血酶应根据临床实际情况选择。

溶胶-凝胶法制备ZnO纳米薄膜的工艺和应用

ZnO是一种重要的功能材料和新型的Ⅱ-Ⅵ族宽禁带半导体材料。采用溶胶-凝胶(Sol-gel)工艺在Si(100)、Si(111)和c面蓝宝石衬底上成功制备出高质量的ZnO纳米薄膜,并用XRD、SEM、AFM等方法研究了薄膜的特性。首次以制备的ZnO纳米薄膜为缓冲层,在n型Si(100)衬底上采用低压化学气相沉积(LPCVD)工艺外延生长了SiC薄膜,得到了低载流子浓度、高电子迁移率和高空穴迁移率的两种SiC薄膜样品,分析了该薄膜的性能。

混凝土中氯离子迁移的影响因素研究

从混凝土暴露时间、胶凝材料吸附作用、环境温度、应力和裂缝状态等方面考察了它们对混凝土中氯离子迁移的影响.结果表明,混凝土的氯离子表观扩散系数随暴露时间的推移而衰减,且掺有掺合料的混凝土其衰减程度要大于纯水泥混凝土;矿物掺合料对氯离子的吸附结合能力要比水泥强,胶凝材料对氯离子的吸附结合能力与环境中的氯离子浓度有关;环境温度越高,混凝土中氯离子的迁移速率越大.混凝土所处的应力状态将在多方面影响氯离子在混凝土中的迁移,混凝土中裂缝的存在将促进氯离子在混凝土中的迁移.

PMMA-[BMIM]PF_6-非质子溶剂复合型凝胶电解质的制备和性能

采用烯类单体MMA在离子液体[BMIM]PF6和PC、DMC等形成的混合溶液中聚合,合成一系列PMMA-[BMIM]PF6-非质子溶剂复合型凝胶电解质,并对其性能进行了研究。结果表明,当m([BMIM]PF6)∶m(PC)=45∶55时,凝胶电解质PMMA-PC-[BMIM]PF6的室温电导率值为3.44×10-3S/cm,当m([BMIM]PF6)∶m(DMC-PC)=35∶65时,PMMA-LiPF6-(PC-DMC)-[BMIM]PF6的室温电导率值为10.05×10-3S/cm,并随温度升高而增加,变化规律符合VTF方程。凝胶电解质热分解温度都在250℃以上,在80℃时热失重小于0.97%。锂离子的迁移数约为0.3。电化学窗口高达5.1V。

玉米转录因子zmCBF1的凝胶阻滞分析

凝胶阻滞试验是分析核酸与蛋白质相互作用的有效方法,在转录因子的功能分析中得到了广泛应用。以玉米转录因子zmCBF1与顺式元件CRT的结合为例,建立了用于转录因子分析的GRA/EMSA实验体系,并对其在应用中可能出现的问题进行了分析。

含离子液体的凝胶聚合物电解质的导电行为研究

以聚偏氟乙烯-六氟丙烯(PVDF-HFP)为聚合物基体,制备了含离子液体1-甲基-3-乙基咪唑六氟磷酸盐(EMIPF 6)和1-甲基-3-乙基咪唑二(三氟甲基磺酰)亚胺盐(EMITFSI)的凝胶聚合物电解质,测试了电解质的电导率和阳离子迁移数,并基于自由体积理论的观点对电解质的导电行为进行了研究。结果表明,EMIPF 6-PVDF-HFP与EMITFSI-PVDF-HFP两种离子液体凝胶聚合物电解质,聚合物的分子链段运动对导电离子的迁移影响微小;logσ与1/T呈线性关系,上述两种电解质的导电行为服从阿伦尼乌斯方程,电解质的电导率主要靠自由离子的迁移;离子液体EMIPF 6、EMITFSI的加入促进了Li+的自由移动,显著提高了电解质的锂离子电导率。

凝胶油-棕榈仁油混合油在夹心巧克力中的应用性能评价

油脂迁移显著降低夹心巧克力的品质,含有凝胶油的夹心油可以减少油脂迁移率,延长产品货架期。选择单甘酯凝胶油(单甘酯与大豆油质量比为6∶94)与棕榈仁油按照不同配比混合制作夹心油,使用气相色谱仪、核磁共振仪、流变仪、质构仪及偏振光显微镜对其脂肪酸组成、固体脂肪含量、流变质构特性、油脂迁移率及微观形态进行评价。结果表明:凝胶油-棕榈仁油(凝胶油与棕榈仁油质量比为80∶20)混合油体系效果表现最为合适,其具有高亚油酸含量的不饱和脂肪酸组成,并具有较低的油脂迁移率、相对稳定的结构和所需的质构特性,在夹心巧克力产品中具有良好的应用前景。

变性淀粉对肌原纤维蛋白凝胶特性的影响

分别将0%、4%、6%、8%、10%和12%的玉米原淀粉、玉米乙酰化二淀粉磷酸酯、木薯乙酰化双淀粉己二酸酯淀粉(acetylated distarch adipate,ADA)、木薯醋酸酯变性淀粉(starch acetate,SA)添加到肌原纤维蛋白溶液中,制备淀粉-蛋白复合物并测定流变特性、凝胶强度、保水性和水分子弛豫时间等指标。结果表明:添加淀粉可显著提高肌原纤维蛋白的储能模量G′,G′在42℃左右开始增加,此时肌原纤维蛋白开始变性形成凝胶,添加变性淀粉可显著延迟肌原纤维蛋白的变性温度(43~46℃)。变性淀粉添加量为8%时淀粉-蛋白复合物凝胶强度均达到最大,而原淀粉对肌原纤维蛋白的凝胶强度影响不显著(P>0.05)。添加变性淀粉的复合凝胶保水性比原淀粉保水性高约13%(P<0.05),SA-蛋白复合物与ADA-蛋白复合物保水性最高。核磁共振分析表明T2弛豫时间随变性淀粉添加量增大而减小,T22向快弛豫方向移动,说明变性淀粉的添加降低了水分子的移动性。因此,ADA-蛋白复合物对肌原纤维蛋白的流变性、凝胶强度、保水性和水分迁移影响最显著,添加10%以内变性淀粉可显著提高肌原纤维蛋白的G′和保水性,同时增大凝胶强度,降低水分迁移速率。

葡萄糖酸钙和氯化钙制备的血小板凝胶上清对脐带间充质干细胞作用的比较

目的 观察葡萄糖酸钙和CaCl2制备的血小板凝胶上清(platelet-rich plasma releasate,PRP releasate)在脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stromal cells,ucMSCs)迁移和黏附方面的作用。方法 应用血细胞分离机收集PRP,10%葡萄糖酸钙或5% CaCl2注射液制备PRP releasate,命名为葡萄糖酸钙-PRP releasate和CaCl2-PRP releasate。以胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)培养的细胞作为对照组,采用Transwell板和Matrigel胶分别观察三组细胞的迁移和黏附能力;Western blot检测三组细胞信号分子Cdc42、RhoA和Rac1的表达。结果 与FBS培养组相比,两组PRP releasate对细胞迁移和黏附有明显促进作用,葡萄糖酸钙-PRP releasate促迁移最为明显。但两组PRP releasate对细胞黏附的影响无统计学意义。同时,与细胞迁移和黏附相关的Rho家族分子Cdc42、Rac1和RhoA表达上调,葡萄糖酸钙-PRP releasate组最显著。结论 较于CaCl2,葡萄糖酸钙-PRP releasate可以更有效促进ucMSCs的迁移。为两者联合应用实现组织修复提供治疗策略。