人凝血因子ⅦcDNA基因的克隆与鉴定

目的:克隆并鉴定人凝血因子ⅦcDNA基因。方法:采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,从人胎肝总RNA中扩增人凝血因子ⅦcDNA基因,将其克隆入pGEM-T载体,对阳性克隆进行序列测定和分析。结果:经RT-PCR扩增和克隆,获得了人凝血因子ⅦcDNA基因,经序列分析表明,所克隆的基因序列正确。结论:本试验成功克隆了人凝血因子ⅦcDNA基因,为重组人凝血因子Ⅶ的研究奠定了基础。

凝血因子Ⅶ水平及其基因多态性与PTE的相关研究

目的探讨FⅦ基因R353Q多态性及血浆FⅦa水平与PTE的相关性。方法收集肺血栓栓塞症(PTE)患者198例和对照组212例;采用PCR-PFLP检测FⅦ基因R353Q多态性,ELISA法测定血浆FⅦa水平。结果①FⅦ基因R353Q单核苷酸多态性(SNP)基因分布频率和等位基因携带频率在病例与对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。②血浆FⅦa水平PTE组与对照组比较,差异有显著性意义(P=0.000)。③通过非条件Logistic回归模型校正后,吸烟、纤维蛋白原和血浆FⅦa水平是PTE患者的独立危险因素。结论高血浆FⅦa水平是PTE患者的独立危险因素;FⅦ基因R353Q多态性可能不是PTE患者的独立危险因素。

血浆凝血因子Ⅶ基因高变区4多态性与冠心病相关性的Meta分析

目的系统评价不同种族（尤其亚洲人群）血浆凝血因子Ⅶ（FⅦ）基因高变区4（HvR4）多态性与冠心病的相关性。方法计算机检索中国生物医学文献数据库（CBM）、维普中文科技期刊全文数据库（VIP）、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库、PubMed、Embase、CochraneLibrary等，检索时间从建库至2013年4月30日，收集所有凝血因子Ⅶ基因HVR4位点多态性与冠心病相关的病例对照研究。根据纳入排除标准选择符合的文献，评价纳入研究的质量并提取资料，采用RevMan5．1软件与Stata11．0软件进行Meta分析。结果共纳入14篇文献15项研究，包括冠心病3167例，对照3168例。FⅦ基因HVR4位点基因多态性与冠心病的相关性Meta分析结果显示，H7等位基因与H6＋H5等位基因对比（OR=O．86，95％CI：0．77～0．96，P=0．005）、基因型H7H7与H6H6＋H7H6对比（OR=0．77，95％CI：0．67—0．89，P=0．0005），发现携带H7等位基因与H7H7基因型人群发生冠心病的风险低，差异有统计学意义；H6等位基因与H7＋H5等位基因对比（OR=1．17，95％CI：1．09。1．26，P〈0．0001），携带H6等位基因人群发生冠心病的风险增加，差异有统计学意义；而携带H5等位基因与H7＋H6等位基因人群发生冠心病风险的差异无统计学意义（OR=1．20，95％CI：0．76。1．90，P----0．43）。结论Meta分析结果显示，不同种族人群中FⅦ基因HVR4位点H7等位基因与H7H7基因型很可能为冠心病的保护性因素，亚洲人群较欧洲人群相比，H7等位基因及H7H7基因型与冠心病低风险相关性更强。H6等位基因可能为冠心病的危险因素，而H5等位基因与冠心病易感性关联不大。

基因重组凝血因子Ⅶa在心脏直视术后严重渗出血患者中的应用

目的观察基因重组凝血因子Ⅶa(rFⅦa)在心脏直视术后严重渗出血患者中的应用效果。方法选择40例心内直视术后连续3h心包纵隔引流量>2mL/(kg.h)的患者,在应用传统止血方法临床效果不明显后,改用rFⅦa(20～40μg/kg)单次静脉注射,观察心包纵隔引流量的变化、监测凝血指标,并记录各种不良反应和(或)并发症。结果40例患者应用rFⅦa后有35例引流量显著减少,与应用前相比引流量由3.54mL/(kg.h)[2.31～10.3mL/(kg.h)]降至0.85mL/(kg.h)[0.45～2.53mL/(kg.h)](P<0.05),5例引流量仍较多,予二次开胸探查发现其中3例为活动性出血;活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)在应用rFⅦa后明显缩短(P<0.05);未见明显不良反应及血栓形成等相关并发症。结论rFⅦa对心内直视术后出现严重渗出血患者具有良好的止血效果,未发现明显不良反应及相关并发症。

基因重组凝血因子Ⅶa治疗心内直视手术后弥漫性渗血10例

10例心内直视手术后发生弥漫性渗血的患者应用基因重组凝血因子Ⅶa20～60μg/kg静脉注射，结果9例心包纵隔引流量明显减少，1例心包纵隔引流量减少不明显。显示基因重组凝血因子Ⅶa能有效控制心内直视手术后弥漫性渗血。

凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性与高血压合并脑梗死的相关性

探讨血浆活化凝血因子Ⅶ及其基因MspI多态性与中国汉族人高血压合并脑梗死的关系。采用侯选基因及病例—对照的方法 ,以聚合酶链反应及限制性内切酶片段长度多态性分析技术 ,对高血压组、高血压合并脑梗死组及正常对照组进行凝血因子Ⅶ基因MspI多态性分析并确定基因型 ,同时采用重组可溶性组织因子法测定血浆活化凝血因子Ⅶ水平。结果发现 ,与高血压组比较 ,脑梗死组血浆活化凝血因子Ⅶ水平显著增高 (2 .78± 0 .5 9比2 .5 3± 0 .6 2 μg L ,P <0 .0 5 ) ;高血压组与正常对照组比较差异无显著性 (2 .5 3± 0 .6 2比 2 .4 1± 0 .6 1μg L ,P >0 .0 5 ) ;Logistic回归分析显示 ,血浆活化凝血因子Ⅶ水平增高是高血压合并脑梗死的重要危险因素 (OR =1.134,P <0 .0 5 ) ;凝血因子Ⅶ基因型频率分布符合Hardy Weinberg平衡定律 ,基因型及等位基因频率分布在各组间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ;各组血浆活化凝血因子Ⅶ水平均与凝血因子Ⅶ基因多态性显著相关 ,M1 M1 纯合子血浆活化凝血因子Ⅶ水平显著高于M2 等位基因携带者 (P <0 .0 5 )。以上提示 ,血浆活化凝血因子Ⅶ水平增高是高血压合并脑梗死的重要危险因素 ,并受其基因MspI多态性的影响。

湖南汉族人群FⅦ基因M1/M2多态性与冠心病血瘀证的遗传流行病学研究

目的利用单体型相对风险分析(HHRR)和连锁不平衡检验(TDT)方法在冠心病血瘀证家系中探讨凝血因子Ⅶ(FⅦ)基因多态性是否为冠心病血瘀证的遗传易患因素。方法2003年10月～2006年11月收集先证者一级亲属中至少有1例冠心病患者的家系40个和健康人家系10个,属CH D血瘀证家系组25个家系81例,其中核心家系18个共60例。PCR-RFLP方法鉴定FⅦ基因M1/M2多态性基因座基因型。在对FⅦ基因多态与冠心病血瘀证基因存在关联的基础上进行HHRR和分析。结果CHD家系FⅦ基因的基因型、等位基因均未见偏离H ardy-Weinberg平衡。在HHRR中,FⅦ的M1基因可能与冠心病血瘀证相关联;对13个满足要求的核心家系进行TDT检验,杂合子父母传递给患病子代的M 1等位基因频率未显著偏离50%。结论在冠心病血瘀证家系中发现FⅦ基因M1/M2多态性与冠心病血瘀证存在关联,但与疾病基因座不存在连锁,说明该基因座可能不是湖南汉族人群冠心病血瘀证的遗传易患基因,而是冠心病血瘀证的发病危险因素之一。

遗传性凝血因子Ⅶ缺乏症一家系基因突变分析

本文报道一遗传性凝血因子Ⅶ缺乏症家系及基因分析结果.先证者检测到凝血因子Ⅶ基因发生c.1198 G>C(p.Val400Leu)和IVS6-1 G>A复合杂合突变.前者在中国汉族人群当中尚未见报道.其中c.1198 G>C(p.Val400Leu)突变来自患儿母亲;IVS6-1 G>A来自患儿父亲.IVS6-1 G>A突变为已知致病突变,c.1198 G>C(p.Val400Leu)在100名正常对照人群中未检出该突变.根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)遗传变异分类标准与指南,c.1198 G>C突变为可能致病突变.先证者凝血因子Ⅶ基因c.1198 G>C(p.Val400Leu)和IVS6-1 G>A复合杂合突变可能是患儿表现为临床出血症状的遗传学致病因素.

真实世界中不同止血方案治疗血友病A伴抑制物患者轻中度出血的成本与效果

目的比较真实世界中不同止血方案治疗血友病A伴抑制物患者轻中度出血的成本与效果。方法选取7家医院的26例血友病A伴抑制物患者进行线上问卷调查,收集患者过去一年内的用药治疗情况,并对不同止血方案治疗情况的成本和效果进行统计分析。结果 26例患者平均年龄为(20.4±13.2)岁,严重血友病患者21例,高滴度抑制物患者25例;对患者共计111次轻中度出血治疗用药情况进行分析显示:先使用基因重组活化凝血因子Ⅶ(rFⅦa),再使用凝血酶原复合物(PCC)方案止血有效的比例最高,为76.9%,其次为仅使用rFⅦa方案(69.6%)、使用重组FⅧ或血源性FⅧ等其他药物方案(68.8%)、先使用PCC再使用rFⅦa方案(63.2%)、仅使用PCC方案止血有效的比例最低,为52.5%;先使用rFⅦa再使用PCC,12 h内重复出血次数最少,12 h内重复出血的比例最低,为1次(7.7%)。患者单次出血花费差异较大,仅使用PCC花费中位数最少为9911元,先使用PCC再使用rFⅦa治疗的花费最多为47280元。结论 "先使用rFⅦa再使用PCC"比"先使用PCC再使用rFⅦa"的成本更低,效果更好,建议出血后尽早使用r FⅦa。