不同放置时间对融化后新鲜冰冻血浆中凝血因子的影响

目的探讨不同放置时间对融化后新鲜冰冻血浆中凝血因子的影响。方法选择本院血站经ACD-B抗凝全血分离制备而成的新鲜冰冻血浆30份,37℃水浴融化,于融化后0、6、12、24h测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白(FIB)、凝血酶时间(TT)、凝血因子FⅦ、FⅧ、FⅨ活性水平。结果新鲜冷冻血浆融化后,PT、APTT、FIB、TT在24h内不同时间点测定结果 ,差异无统计学意义(P>0.05)。凝血因子FⅦ及FⅧ随时间的改变而有明显的降低,随着时间的推移衰减,与抽血即刻比较差异有统计学意义(P<0.05)。而FⅨ仅在12h的时候有一过性的下降,24h后又恢复。结论新鲜冰冻血浆在融化后应该立即输注,以保证凝血因子生物学活性,进一步保证治疗的效果。

超小剂量FⅧ诱导血友病A伴FⅧ抑制物患者免疫耐受8例临床观察

目的探讨血友病A伴抑制物患者免疫耐受诱导(ITI)的方法,尝试寻找适合我国患者的治疗方案。方法对中型/重型血友病A患者用APTT标准曲线一期法测定凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性(FⅧ:C),用Bethesda法定量测定FⅧ抗体;抑制物滴度>0.6 BU/mL的患者停用FⅧ制剂,待FⅧ抑制物阴性(<0.6 BU/mL)后用超小剂量FⅧ(初始剂量1~2.5IU·kg^(-1)·d^(-1))联合地塞米松±利妥昔单抗进行ITI治疗。结果8例伴FⅧ抑制物患者,3例患者获得完全耐受,2例患者达到部分耐受,3例诱导失败患者转为传统剂量FⅧ(50 IU/kg,隔天1次)ITI治疗,获得完全耐受。结论使用超小剂量FⅧ进行ITI治疗的有效率可达62.5%,该治疗方案具有一定的社会及经济价值。

一个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系两种新的基因突变

目的探讨遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症的分子发病机制。方法用DNA直接测序法对1例FⅦ缺陷症家系成员FⅦ基因进行分析；将含突变序列克隆插入pMD19-TSimple TA载体中，对所得两条染色体相应序列分别测序，以确定不同突变在染色体上的分布。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和凝固法检测血浆中FⅦ：Ag和FⅦ：C。结果家系中有3种基因突变：第8号外显子第15386位核苷酸存在A→C（Arg353Pro）和第15386位核苷酸G→C（Gln353Pro）突变；第8号外显子第15274位核苷酸A→T（Lys316Stop）突变，家系成员中发现的这3种突变均为杂合子；发现先证者父亲存在3种杂合多态性：即启动子区2050～2059位CCTATACCT10bp的缺失／插入多态性、1号内含子IVSla＋9G→A及第15386位A→G（Arg353Gln），且均来自先证者祖父，3种多态性位于同一条染色体上。结论发现该家系存在1种FⅦ基因的错义突变（Gln353Pro）；1种无义突变（Lys316Stop），这两种突变均为国际上首次报道的新突变。