获得性凝血因子XⅢ缺乏症一例

获得性凝血因子XⅢ缺乏症是一种较罕见的出血性疾病。1例于我院行正颌手术的患者,因术中出血不止而终止手术,最终结合实验室检查诊断为获得性凝血因子XⅢ缺乏症。本文对该患者的临床资料进行分析并复习相关文献,加强对获得性凝血因子XⅢ缺乏症的认识。

凝血因子X的活化及活化的凝血因子X的抑制

凝血因子X(FX)在凝血过程中起重要的作用 .利用鲁氏蝰蛇毒素 (RVV)中的FX活化酶 (RVV X) ,研究了Ca2 + 存在时的FX的活化 .RVV X活化FX有两条路径 :(1 )FX→FXβ→FXaβ;(2 )FX→FXaα→FXaβ.研究表明这两条路径在活化初期呈竞争状态 ,但是随着反应的进行 ,逐渐以第 (2 )种路径为主 ,FXβ 中间体的存在 ,可能有利于FX上的活化肽的脱去 .通过检测酶活性的方法 ,研究了表没食子基儿茶素没食子酸酯 (EGCG)对活化的凝血因子X(FXa)的作用 ,发现EGCG对FXa 有显著的抑制作用 ,其抑制作用随EGCG浓度变化而呈正相关性 ,表明EGCG是一种潜在的抗血栓和抗肿瘤新药 .

结肠癌围术期输血后血清凝血因子X、XⅢ水平与预后的相关性

目的探讨结肠癌围术期输血后血清凝血因子X(FX:C)、凝血因子XⅢ(FXⅢ:C)水平与预后的相关性分析。方法回顾性分析收治的146例行根治术治疗的结肠癌患者作为研究对象,将围术期输血量≥5U的患者作为观察1组(n=47),输血量<5U的患者作为观察2组(n=41),未输血患者作为对照组(n=58),观察各组患者血清凝血4项指标、FX:C、FXⅢ:C活性变化。并对患者进行随访,将其分为复发组和非复发组,分析不同预后结局FX:C、FXⅢ:C活性变化及与预后复发的关系。结果观察1组、观察2组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)时间高于对照组(P<0.05),观察1组高于观察2组(P<0.05),观察1组、观察2组患者血清纤维蛋白原(FIB)水平、FX:C、FXⅢ:C活性低于对照组(P<0.05),观察1组低于观察2组(P<0.05);复发组患者血清FX、FXⅢ活性明显低于未复发组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,高/中分化程度、淋巴结转移、输血、低FX:C、低FXⅢ:C是结肠癌预后复发的独立危险因素。结论结肠癌围术期输血后患者凝血功能异常,血清FX:C、FXⅢ:C活性降低,均是影响结肠癌术后复发的危险因素。

香鱼凝血因子X基因表达与鳗利斯顿氏菌感染的相关性

凝血途径的关键因子--凝血因子X(coagulation factor X,FX),是一种与免疫调控密切相关的维生素K依赖型丝氨酸蛋白酶。该研究克隆了香鱼(Plecoglossus altivelis)FX基因全长cDNA序列,它由1817个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,编码一个由453个氨基酸组成的相对分子质量为5.07×104的蛋白。香鱼FX与已知的哺乳动物FX的结构相似,N端24个残基为信号肽序列。序列比较表明,香鱼FX与斑马鱼FX的氨基酸同一性最高,为53%。在健康香鱼中,FX基因mRNA主要在肝组织中表达,脑和鳃中也有少量表达。实时荧光定量PCR分析揭示,鳗利斯顿氏菌感染后香鱼肝组织中FX基因mRNA表达显著上调,16h时达到5.43倍。通过原核表达系统表达了香鱼FX丝氨酸蛋白酶结构域,并制备了抗血清。Western blotting分析显示,鳗利斯顿氏菌感染后香鱼血清中FX含量显著增加,并随着时间延长上调倍数不断增大,在36h时达到3.68倍。据此,FX基因mRNA及蛋白的表达与鳗利斯顿氏菌感染香鱼的过程紧密相关,揭示它可能在鱼类抗细菌感染的免疫反应中起重要作用。

凝血因子XⅢ基因Val34Leu突变与脑出血神经功能的相关研究

目的 探讨凝血因子 XⅢ (FXⅢ )基因 Va134Leu突变与中国人群脑出血发病的相关关系。方法 利用等位基因特异性聚合酶链反应技术分析了 150例原发性脑出血病人和 150例非脑卒中对照组 FXⅢ基因的基因型位点频率。结果 在所研究的人群中发现了 4例 FXⅢ基因 Val34Leu突变的杂合子，全部位于脑出血组，没有发现突变型的纯合子。等位基因 Val34和 Leu34在所研究的中国人群中的频率分别是 99.3％和 0.7％。结论 FXⅢ基因 Val34Leu突变可能与中国人群的脑出血有潜在的关系。

凝血因子XⅢAPro564Leu基因多态性与脑出血关系的研究

目的探讨人凝血因子XⅢ A亚单位(FXⅢA)Pro564Leu基因多态性与原发性脑出血的关系。方法应用聚合酶链反应和限制性片断长度多态性技术,对80例原发性脑出血患者及80例健康对照者FXⅢA第12号外显子Pro564Leu基因多态性进行检测。结果脑出血组发现FXⅢLeu564/Leu564纯合子型8例,Pro564/Leu564杂合子型21例,对照组发现Leu564/Leu564纯合子型1例,Pro564/Leu杂合子型6例,脑出血组Leu564等位基因频率明显高于对照组(P<0.05)。结论FXⅢAPro564Leu基因多态性与脑出血有关,携带有Pro564Leu基因型者可能增加脑出血的危险性。FXⅢA Pro564Leu基因多态性在广西人群中的分布频率可能较黑色和白色人种低。

人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定

目的 用于提取高纯度凝血因子X(FX)和制备缺乏FX血浆 ,以及建立FX抗原的ELISA检测方法等 .方法 用较高纯度的FX免疫Balb/C小鼠 ,经过 2次基础免疫 ,1次加强免疫 ,3d后取其脾细胞与骨髓瘤SP2 /0 Ag14细胞在PEG作用下进行细胞融合 ,经间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株 ,通过免疫印迹试验、交叉反应试验、相加试验和二价金属离子依赖性试验等 ,对单克隆抗体进行鉴定 .结果 经 3～ 4次克隆化后获得了 10株能稳定分泌FX单克隆抗体 (FXMcAb)的杂交瘤细胞株 ,Ig亚类均为IgG1型 ,小鼠腹水效价均在 10 6以上 ,FXMcAb只与FX抗原起特异性反应 ,FXMcAb与FX抗原的结合不同程度地依赖于二价金属离子Zn2 + .结论 所筛选出的FXMcAb为高纯度FX的提取和缺乏FX血浆的制备以及FX抗原的ELISA检测方法的建立 ,提供了试剂准备 .

围体外循环手术期凝血因子X和凝血酶原时间检测的价值

对80例次围体外循环手术患者动态检测凝血因于X（FX）和凝血酶原时间（PT）。结果表明，两种检测结果在不同时间内呈规律性变化且有较好的相关性。FX活性在术前有明显增高，术中有明显减少，这一结果给临床提供了有价值的数据。同时弥补了单用PT在术中由于应用肝素抗凝而不能检测的缺点。

生色底物连续速率法测定圆斑蝰蛇凝血因子X激活剂的活性

目的：采用生色底物连续速率法测定凝血因子X激活剂的酶学活性。方法：将凝血因子X激活剂与凝血因子X及生色底物同时加入反应体系,以1 min为间隔时间,连续监测凝血因子Xa的生色底物Suc-Ile-Gly（γP ip）G ly-Arg-pNA在405 nm波长下的吸收值变化。通过吸收值对时间平方作图所得直线的斜率,对凝血因子X激活剂的浓度进行线性回归从而测得供试品的活性。结果：该方法的线性范围为0.45-1.20 u·mL^-1,凝血因子X激活剂制剂与溶液的板间精密度（n=4）分别为6.2%及6.8%,板内精密度（n=3）分别为1.5%和1.8%。结论：本方法进行凝血因子X激活剂的活性测定,快速、准确、重现性良好。

以出血为首发症状的原发性系统性淀粉样变并发凝血因子X缺乏2例报告并文献复习

目的:探讨原发性系统性淀粉样变性并发凝血因子X缺乏的临床特征、发病机制及治疗方法。方法:对2例出血素质的患者进行了病史采集、体格检查、物理检查、凝血因子检查和组织活检,并结合文献就其发病机制和治疗方法进行讨论。结果:发现2例患者都有自发性肌肉血肿,心脏、肝脏、肾脏增大,血沉快,尿蛋白阳性,凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)延长等特点。凝血因子检查X因子活性均明显降低,组织活检均证实为淀粉样变性。结论:目前认为原发性系统性淀粉样变性并发凝血因子X缺乏的机制是淀粉样纤维与X因子特异性结合沉积在组织中形成的。本病无特殊有效治疗,预后差。

错义突变Thr318Met导致的遗传性凝血因子X缺陷症

目的对一个凝血因子X(FX)缺陷症家系进行FX基因突变的检测。方法用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及FX促凝活性 (FX :C)测定进行表型诊断 ;用PCR法对先证者的FX基因8个外显子及其侧翼序列和5’端非翻译区 (5’UTR)序列进行扩增 ,PCR产物纯化后直接测序 ,检测其基因突变。家系成员DNA在先证者FX基因突变区域扩增后测序。结果先证者表型诊断为FX缺陷症 ;FX外显子区共发现3个与文献报道的FX基因序列不同的位点 ,其中位于第8外显子区的为纯合突变C1098T。家系分析表明先证者父、母、弟和妹均为C1098T杂合子。结论纯合错义突变C1098T引起的Thr318Met是导致本例遗传性FX缺陷症的原因。

凝血因子X的研究进展

凝血因子X(Factor X)是一种维生素K 依赖的丝氨酸蛋白酶原。其基因位于第13号染色体(13q^(34)),含8个外显子和7个内含子,8个外显子分别编码FX 的7个结构功能区。FX 活化为FXa 时,重链N 端Arg_(52)和Ile_(53)之间的肽键被切断,掉下一52氨基酸肽。FⅨa、FⅧa、Ca^(2-)和磷脂复合物,FⅦa、组织因子,Ca^(2+)复合物可激活FX。此外,Russell's 蛇毒(RVV),锯鳞蝰蛇毒(SSVV),肿瘤坏死因子等也可激活FX。FXa 的生理抑制剂主要是抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)和α_2-巨球蛋白(α-MG)。FX 活性的检测方法除常用的一期法外,新进展有发色底物法,荧光法、酶联凝固分析法及放免法。FX 活性缺乏或减少见于先天性和获得性缺乏症,FX 活性增高主要见于高凝状态和血栓栓塞性疾病。

深圳地区汉族人凝血因子XIIIVal34Leu基因多态性研究

目的 :研究深圳地区汉族人凝血因子 XIII Val3 4Leu基因多态性特点。方法 :应用 PCR技术结合 Hin6I酶切分析、琼脂糖凝胶电泳 ,研究深圳地区 10 8名汉族人凝血因子 XIII Val3 4Leu基因多态性特点。结果 :深圳地区汉族人等位基因 Val3 4与等位基因L eu3 4的频率分别为 99.0 7%和 0 .93 %。 Val/ Val纯合子、Val/ leu杂合子和 L eu/ L eu纯合子的频率分别为 98.15 % ,1.85 %和 0。结论 :深圳地区汉族人凝血因子 XIII L eu3 4等位基因频率比高加索人群低。

广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活物在实验鼠体内的促凝血作用研究

目的研究国产圆斑蝰蛇(Vipera russellii)毒中凝血因子X激活物(RVV-X)在实验动物体内的促凝血作用。方法对从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化出的具有止血作用的RVV-X单一有效成分进行了实验鼠促凝血作用的研究。主要测定的指标包括出血时间(BT)、全血凝固时间(CT)、血浆复钙时间(RT)、激活部分凝血激酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、优球蛋白溶解时间(ELT)以及血小板数量(PLT)。结果该药物的促凝血作用很强,注射很小的剂量(0.000313u/kg)的RVV-X就可以显著地缩短小鼠出血时间,对大鼠也表现出明显的促凝血作用。结论从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化出的RVV-X在极低的剂量下就可以发挥其凝血、止血作用,安全范围很大。本试验为其将来开发研制成为一种全新的止血药提供了一些基础资料。

一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA链基因5’-端短串联重复序列[AAAG]n多态性分析

目的:分析一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA基因5’-端非翻译区STR多态性,对该亚基的突变位点进行遗传分离分析。方法:应用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法技术分析一个经测序确诊的凝血因子XⅢ基因缺乏的家系的凝血因子XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn。结果:在该家系中检测出两种基因型,先证者及其弟XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn的基因型为L2/L2基因型,先证者的父亲、母亲及其妹的基因型为L1/L2,先证者的XⅢA链基因的突变位点分别与父源的L2和母源的L2位点连锁。结论:根据家系XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn与FXⅢA基因突变位点的连锁关系可确定突变的遗传分离特点。

脑梗死患者血浆凝血因子XⅢ、IL-17水平与病程相关性及预后的研究

脑梗死是多种原因引起的脑血管供血障碍,可导致局部脑组织因缺血缺氧而出现坏死或软化等病理性改变。血浆凝血因子XⅢ含量和活性的变化可引起脑梗死凝血功能障碍;IL-17是一种新近命名的Th17细胞来源的强有力的炎症细胞因子,与广泛存在的IL-17受体结合产生促炎症反应。本课题研究脑梗死患者凝血因子XⅢ和IL-17水平变化来评估它们与脑梗死病程及预后的关系。

钙（Ⅱ）对抗凝血因子Ⅱ与活化凝血因子X结合反应的影响

皖南尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ（ACFⅡ）不具有酶的活性，通过与活化凝血因子X（FXa）的合成1：1复合物来延长凝血时间。用高效液相色谱方法，发现ACFⅡ与FXa的结合反应依赖于Ca（Ⅱ）浓度，ACFⅡ与FXa的最大结合反应所需要的Ca(Ⅱ)浓度约为1×10^-3mol/L，平衡透析的结果表明，ACFⅡ分子中有两个不同亲和性的Ca（Ⅱ）结合位点，表观结合常数分别为（1．1±0．3）×10^5L/mol和（1．7±0．4）×10^4L/mol,ACFⅡ与2个Ca(Ⅱ）结合所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10^-3mol/L,Ca(Ⅱ)对ACFⅡ的荧光有增强效应，其最大荧光增强所需要的Ca(Ⅱ)浓度也约为1×10^-3mol/L。由此推测ACFⅡ结合上2个Ca(Ⅱ)可能是其与FXa结合的前提条件。

获得性凝血因子X缺乏症1例

1 病例报告 女，71yr。2003-06出现全程无痛性肉眼血尿，鲜红色，在上海市第一人民医院B超检查示右肾结石，予立止血等止血治疗血尿减轻。2003-08又出现双上肢及躯干部瘀斑，血尿，至上海市瑞金医院就诊，查PTH250．8pg·mL^-1(参考值7～53pg·mL^-1)，Ca^+2．96mmol·mL^-1，CT示左侧下极甲状旁腺腺瘤，拟手术治疗。