两种抗凝管对部分凝血激活酶时间的影响

为分析探讨不同抗凝管对部分凝血激活酶时间(PTT)结果的影响,文章分别对两个厂家生产的抗凝管的管帽、管体和抗凝剂进行PTT试验。与空白或阴性对照组相比,2种抗凝管的管帽均对PTT无显著影响(P>0.05);抗凝管A的管体对PTT无显著影响(P>0.05),但抗凝管B的管体的PTT显著低于空白和阴性对照组(P<0.05);与空白对照组相比,2种抗凝管中的抗凝剂均对PTT无显著影响(P>0.05),但与阴性对照组相比,其PTT显著升高(P<0.05)。由此可知,影响抗凝管PTT结果的主要因素是抗凝管的管体部分。

蛋白酶激活受体介导的凝血激活在脓毒症中的作用

脓毒症时由于内毒素及炎性递质的作用,机体处于高凝状态,凝血激活过程中产生的许多蛋白酶,如凝血酶、组织因子复合物等又可通过其特异的受体--蛋白酶激活受体(Protease-activated receptors,PARs)促进炎性反应过程。目前已有许多针对脓毒症时的凝血紊乱进行干预的临床前及临床试验,其中许多与PARs有关的试验都得出了肯定的结论。本文就有关PARs介导的凝血激活在脓毒症中的作用研究做一综述。

磁珠法与比浊法血凝仪用于医疗器械凝血激活酶时间试验和凝血的比较研究

目的分析探讨磁珠法与比浊法血凝仪用于医疗器械凝血激活酶时间试验和凝血的意义。方法选取我院收治的100例贫血患者作为研究对象,分别对该组患者使用比浊法和磁珠法检测其医疗器械部分凝血激活酶时间(PTT)、凝血酶原时间(PT)。结果 PPT实验中血凝仪变异系数差异不具有统计学意义(P>0.05);PT实验结果两组数据差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论在对医疗器械PPT和PT实验检测时使用磁珠法和比浊法均可以获得准确的评价结果,值得推广使用。

对氧磷酶-2通过内皮组织因子调节失血休克患者凝血激活的机制研究

目的探究对氧磷酶-2(PON2)通过内皮组织因子调节失血休克患者凝血激活的机制。方法大鼠腹腔注射戊巴比妥钠麻醉后,采用等血容量失血方式形成休克-复苏组模型,受试动物分为生理盐水复苏组和对氧磷酶-两组复苏组。各大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)和凝血酶原时间(PT-INR)值在组内和组间进行比较;对血清中TNF-α、IL-1β和HMGB1因子含量进行检测,并对各因子基因蛋白含量进行测定,最后通过组织切片HE染色观察对比组织切片中的炎症细胞浸润数量。结果对照组治疗前后凝血五项中,FIB、PT、APTT和TT四者有显著性差异;对照组与治疗组治疗后凝血5项差值比较,FIB、PT、APTT和TT有显著性差异(P<0.05);氧磷酶-两组复苏组与对照组治疗前后凝血5项,差值比较有统计学意义(P<0.05)。不同休克复苏液对血清中TNF-α、IL-1β和HMGB1含量有显著影响(P<0.05),对氧磷酶-2对血清中TNF-α、IL-1β两种炎症因子有抑制作用;对氧磷酶-2处理后的小鼠血液组织中IL-12B TNF-α蛋白表达减少;HMGB1却较对照组高,蛋白表达提高;通过肝脏组织HE染色后病理显微照片观察发现,对氧磷酶-两组肝纽织肝索结构基本清晰。结论对氧磷酶-2通过内皮组织因子调节失血休克患者凝血激活,从而降低凝血功能紊乱,加快痊愈。

心脏机械瓣置换后不同强度抗凝对病人凝血激活的影响

目的 探讨不同强度抗凝时 ,心脏机械瓣置换术后病人的凝血激活状态。方法 将 16 2例心脏机械瓣置换术后病人 ,根据抗凝强度 (INR)分成 4组 :A组 (<1 5 ) 2 5例 ;B组 (1 5～ <2 0 ) 4 4例 ;C组 (2 0～ <3 0 ) 6 1例 ;D组 (3 0～ <4 5 ) 32例。 2 0例正常成人为对照组。采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定各组血浆凝血酶原片段 1+2 (F1 + 2 )、D 二聚体浓度。结果 A、B、C、D和对照组F1 + 2 浓度分别为(2 4 8± 1 32 )、(1 2 3± 0 6 5 )、(0 81± 0 4 5 )、(0 73± 0 39)、(1 11± 0 35 )nmol L ;D 二聚体浓度分别为(0 4 5± 0 2 4 )、(0 30± 0 17)、(0 2 4± 0 10 )、(0 2 5± 0 11)、(0 2 1± 0 0 9)mg L。A组F1 + 2 和D -二聚体浓度均显著高于对照组 (P <0 0 1) ;B组F1 + 2 浓度与对照组无差异 (P >0 0 5 ) ,D 二聚体浓度显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ;C、D组F1 + 2 浓度均显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ,但C、D两组间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;C、D组D 二聚体浓度与对照组之间均差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 在INR 2 0～ 3 0的抗凝强度下 。

国产静脉注射人免疫球蛋白制品中凝血激活物水平分析

目的分析11家中国血液制品企业共计64批次上市后的静脉注射人免疫球蛋白（immunoglobulin for intravenous injection,IVIG）（p H 4）制品中凝血激活物水平,对国内IVIG制品在促凝血方面的安全性作出评估,为提高制品质量标准提供参考。方法利用非活化的部分凝血活酶时间法（non-activated partial thromboplastin time,NAPTT）、凝固法（一期法）及本实验室建立的改良凝血酶生成试验（modified thrombin generation test,M-TGT）,分别测定64批次国产和7批次进口IVIG样品的NAPTT、系列凝血因子活性、活化凝血因子Ⅺ（FⅪa）的含量及凝血酶生成含量达到最高值时所需时间（time to peak,TTP）,分析IVIG的凝血激活物水平。结果除国内厂家F所生产的2批IVIG中FⅪ活性为0.030～0.036 IU/ml外,其余国产62批次产品中FⅪ活性均低于试剂最低检测限未检出;所有产品中TTP均大于40 min,FⅪa含量均小于0.37 nmol/L,NAPTT均大于203 s。结论所调查的11家共计64批次的国产IVIG制品的凝血激活物水平均较低。今后在我国是否推行IVIG制品的凝血激活物检测尚需进一步研究。

部分凝血激活酶时间试验及全血凝固时间试验方法用于评价心血管系统外部接入器械凝血性能的研究

以GB/T16886.4-2003标准为基础,采用部分凝血激活酶时间(PTT)试验和全血凝固时间(CT)试验对5种以金属与高分子为主要材质的心血管系统外部接入器械的凝血性能进行了研究。结果提示PTT试验能够较好地反映材料对凝血系统的激活,可以应用于医疗器械凝血性能评价。在GB/T16886.4-2003标准中PTT试验被作为外部接入器械凝血性能评价的推荐方法之一。CT试验受凝血过程的各个相关因素影响较多,试验还受到动物个体差异的影响,在操作上不容易标准化。与PTT试验相比,按照GB/T14233.2-2005标准附录中试管法(Lee-White法)进行的CT试验数据变异度更大。因为其较多的影响因素,怎样确定合适的阴性对照来进行CT试验的器械材料凝血评价也需进行进一步的研究。

生色底物连续速率法测定圆斑蝰蛇凝血因子X激活剂的活性

目的：采用生色底物连续速率法测定凝血因子X激活剂的酶学活性。方法：将凝血因子X激活剂与凝血因子X及生色底物同时加入反应体系,以1 min为间隔时间,连续监测凝血因子Xa的生色底物Suc-Ile-Gly（γP ip）G ly-Arg-pNA在405 nm波长下的吸收值变化。通过吸收值对时间平方作图所得直线的斜率,对凝血因子X激活剂的浓度进行线性回归从而测得供试品的活性。结果：该方法的线性范围为0.45-1.20 u·mL^-1,凝血因子X激活剂制剂与溶液的板间精密度（n=4）分别为6.2%及6.8%,板内精密度（n=3）分别为1.5%和1.8%。结论：本方法进行凝血因子X激活剂的活性测定,快速、准确、重现性良好。

圆斑蝰蛇泰国亚种(Vipera russe lli siamensis)蛇毒凝血因子激活剂的纯化及部分特性研究

目的 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒中分离纯化凝血 因子 (F )激活剂并研究其部分特性。 方法 采用离子交换柱层析和凝胶过滤等方法进行分离纯化 ,以血液凝固时间及发色底物 (S- 2 2 2 2 )进行活性鉴定和温度、p H值、蛋白酶抑制剂对活性的影响 ,SDS- PAGE进行分子量、等电点及纯度测定 ,苯酚 -硫酸法及间苯二酚 -盐酸法测定糖含量。 结果 所得促凝组分 1 能特异性地活化牛 F ,从而水解 S- 2 2 2 2酰胺键。SDS- PAGE呈现单一蛋白带 ,分子量为 6 1.1± 1.5 k D(还原 ) ,6 0 .4± 1.9k D(非还原 )。等电点为 p H=8.0 0± 0 .0 6。含中性己糖 12 .4 %±0 .5 % ,唾液酸 0 .12 %± 0 .0 2 %。在 5 0℃以下稳定 ,最适 p H为 7.0～ 8.2。可被金属蛋白酶抑制剂 EDTA- Na2 完全抑制 ,二硫苏糖醇 (DTT)及 L -半胱氨酸部分抑制 ,不受胰蛋白酶抑制剂抑肽酶抑制。 结论 从圆斑蝰蛇泰国亚种蛇毒分离纯化的 F 激活剂是一种碱性糖蛋白 ,属于 Ca2 + 依赖性的金属蛋白酶。

激活凝血时间用于严重创伤病人术中检测的可行性研究

目的探讨激活凝血时间(ACT)用于严重创伤病人术中凝血功能监测的可行性。方法对实施急诊手术的严重创伤病人(ISS>16分)38例进行前瞻性研究。于麻醉后手术前、手术开始后30min和手术结束时分别测定(ACT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)并测定病人手术前体温和动脉血pH值。结果严重创伤病人术前ACT值低于正常,但差异无统计学意义(P>0.05),手术中和手术结束时的ACT值则明显高于正常(P<0.05),并且与PT、APTT及TT均显著正相关。凝血病创伤病人的ACT值高于非凝血病创伤病人,差异有统计学意义(P<0.001),单次ACT升高达160s以上时,发生凝血病的敏感性为87%,特异性为93%。结论ACT是总体凝血状况的敏感、快速和经济的检测指标,能为严重创伤手术病人凝血功能紊乱提供可靠诊断依据。

广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活物在实验鼠体内的促凝血作用研究

目的研究国产圆斑蝰蛇(Vipera russellii)毒中凝血因子X激活物(RVV-X)在实验动物体内的促凝血作用。方法对从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化出的具有止血作用的RVV-X单一有效成分进行了实验鼠促凝血作用的研究。主要测定的指标包括出血时间(BT)、全血凝固时间(CT)、血浆复钙时间(RT)、激活部分凝血激酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、优球蛋白溶解时间(ELT)以及血小板数量(PLT)。结果该药物的促凝血作用很强,注射很小的剂量(0.000313u/kg)的RVV-X就可以显著地缩短小鼠出血时间,对大鼠也表现出明显的促凝血作用。结论从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化出的RVV-X在极低的剂量下就可以发挥其凝血、止血作用,安全范围很大。本试验为其将来开发研制成为一种全新的止血药提供了一些基础资料。

蝰蛇(缅甸亚种)毒凝血因子Ⅹ激活物FⅤe-1的分离纯化与理化活性的研究(英文)

【目的】从蝰蛇(缅甸亚种)毒分离纯化一种凝血活性因子Ⅹ激活物FⅤe-1,并研究其理化性质、序列测定以及凝血活性。【方法】应用阳离子交换层析、分子凝胶过滤层析分离纯化蛇毒,采用MALDI质谱测定法测定分子质量,等电聚焦电泳测定等电点,Edman降解法测定蛋白N末端氨基酸序列,发色底物法和SDS-PAGE等方法测定FⅤe-1的酶学特征和凝血活性。【结果】从蝰蛇(缅甸亚种)毒分离得到的FⅤe-1为单体蛋白,相对分子质量为13 808,等电点4.6,0.5 mg FⅤe-1的凝血活性与1.5625 u的凝血酶或与54.93 ng RVVⅩ的凝血活性相当;可激活FⅩ,但对凝血酶和纤维蛋白原无作用;酶活性的适宜pH为6.5～7.5,适宜温度为25～60℃;为钙依赖性,凝血活性可被EDTA和DTT抑制;FⅤe-1的N端序列为NH2-N-L-Y-Q-F-G-E-M-I-N;具有呈剂量依赖性的促血浆凝固作用。【结论】从蝰蛇(缅甸亚种)毒纯化出一种FⅤe-1是一个凝血因子Ⅹ的激活物,可激活凝血因子Ⅹ,但对凝血酶和纤维蛋白原的作用微弱。

激活凝血时间监测体外循环肝素化水平——四种试管检测法比较

对105例体外循环心脏手术病人,以白陶土、硅藻土、硅藻土G三种不同的激活凝血时间(ACT)试管与进口试管(CA510),通过Hemochron半自动仪监测肝素化水平,并进行比较。四种试管的基础值和中和后均无差异,且有非常显著相关。但在肝素化后和转流中硅藻土试管ACT值大大延长,似不能起充分激活代作用;白陶土试管亦有不同程度的延长;而硅藻土G与进口试管最为接近且有非常显著相关。如采用硅藻土G替进口试管,宜将ACT值提高至>600作为肝素化的下限,以避免抗凝不足所带来的危害。

经皮冠脉介入治疗术中应用比伐卢定的全血激活凝固时间监测及护理

目的了解全血激活凝同时间（ACT）监测下比伐卢定对比肝素钠的抗凝效果和半衰期长短，以及相关操作中的护理流程。方法52例行经皮冠脉介入治疗（PCI）的患者随机均分为2组：比伐卢定实验组[PCI术前静脉注射0．75mg／kg，然后立即静脉滴注1．75mg／（kg·h）至术毕]和对照组（术前静脉注射肝素钠130U／kg）。分别于PCI术前，用药后5min，停药后30min、1h、和2h，以及拔管前5min（距离用药约5～6h）监测并记录6次ACT值。结果用药后5min患者实验组ACT显著长于对照组（P〈0．01）；PCI术前和停药后30min，2组患者ACT没有显著性差异（均P〉0．051；停药后1h、2h和拔管前5min实验组ACT显著短于对照组（均P〈0．05）。结论比伐卢定对比肝素钠抗凝效果起效快，效果好，半衰期短；严格按照规范用药、加强用药期间的观察护理，做好ACT监测及护理，可保证药物使用的有效性和安全性。

非接触球囊导管标测系统应用中激活凝血时间的监测及意义

目的 介绍非接触球囊导管标测系统 (EnSite 3 0 0 0系统 )指导心律失常标测与射频消融过程中激活凝血时间 (ACT)监测及国人有效延长时间控制的初步经验。方法 对 16例患者 (男 11例、女 5例 ) ,年龄 13～ 67( 40 5± 16 0 )岁。共运用该系统标测和指导消融 2 0次手术 ,患者基础ACT为 ( 12 2 3± 16 3 )s,在置入EnSite 3 0 0 0球囊导管前首次肝素剂量为 ( 44 0 0 0± 10 46 3 )IU ,使ACT延长至 ( 196± 3 1 4)s。根据ACT的结果予以追加肝素 ,首次追加剂量为 ( 142 5± 63 4)IU。手术时间为 ( 3 8± 1 7)h ,术中ACT时间为 ( 2 12 6± 2 6 8)s。结果 停用肝素后 1h拔管 ,无 1例出现血栓栓塞和出血临床表现 ,球囊表面未发现血栓附着。结论 运用EnSite 3 0 0 0系统指导心律失常的标测和消融时 ,国人ACT维持在 ( 2 12 6± 2 6 8)

凝血酶原复合物中影响激活凝血因子测定因素的探讨

含肝素的凝血酶原复合物 (PCC)用适量的硫酸鱼精蛋白中和后 ,作 1∶1 0和 1∶1 0 0稀释测定激活凝血因子。肝素影响激活凝血因子测定 ,不同活性单位的PCC对某些厂家生产的PCC激活凝血因子测定无影响 ,但对有的厂家生产的PCC激活凝血因子测定有影响。对国内 5家血制品生产单位生产的 1 5批PCC进行激活凝血因子测定 ,凝血酶活性通过者激活凝血因子也能通过。

双磁路磁珠法与散射比浊法血凝仪用于医疗器械PT与PTT试验评价中的比较研究

以GB/T16886.4-2003标准为基础,利用双磁路磁珠法与散射比浊法半自动血凝仪对5种以金属与高分子为主要材质的血液接触医疗器械的部分凝血激活酶时间(PTT)试验和凝血酶原时间(PT)试验进行了研究。结果提示两种测量方法的血凝仪的组内变异系数(CV)均在同一数量级。在PTT试验中,两种血凝仪得到了相似的结果。在进行平均凝固时间基数较小的PT试验时,两种不同原理的血凝仪得到的结果具有较高的符合率。根据研究的结果,选择双磁路磁珠法或散射比浊法血凝仪来进行医疗器械凝血相关评价均为可行,检验机构可根据自身条件灵活选择,但须注意对基值较小的试验,如PT试验的结果解释和分析。

广西圆斑蝰蛇毒凝血因子X激活剂的分离纯化及其止血作用的研究

目的从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化凝血因子X激活剂(factor X activator of Russell’sviper venom,RVV-X)并研究其止血作用。方法应用阴离子交换色谱和凝胶过滤从广西圆斑蝰蛇毒中分离纯化RVV-X,以复钙化时间进行活性鉴定,以SDS-PAGE测定纯度和分子量。观察RVV-X对家兔肝脏创伤出血模型出血时间及出血量,家兔和肝素化小鼠凝血时间的影响。结果广西圆斑蝰粗毒经阴离子交换色谱获得六个蛋白峰,将RVV-X所在第V峰用凝胶过滤获得的组分A为RVV-X纯品,其凝血活性具有钙依赖性。SDS-PAGE非还原性条件下呈单一蛋白条带,分子量约为97.8kDa,还原性条件下呈二蛋白条带,为一条重链(约76.3kDa)和一条轻链(约21.5kDa)。RVV-X可显著减少家兔肝脏切口的失血量,缩短切口出血时间;能显著缩短家兔及肝素化小鼠凝血时间。结论用层析方法从广西圆斑蝰蛇毒中分离得到的凝血因子X激活剂具有较强的止血活性。