关于自制兔脑凝血质代替进口兔脑凝血质的探索

在凝血实验中,中国医科大学附设卫校检验教研组带领学生自制兔脑凝血质,然后根据WHO的参比方法,在设定国际标准化比值相同的情况下,用已知国际敏感度指数(ISI)的兔脑凝血质对自制未知(ISI)的兔脑血质进行标定,并且对两种凝血质的敏感度、精确度、稳定性进行比较.结果表明:自制兔脑凝血质ISI为2.45,进口兔脑凝血质ISI为2.48,ISI自制小于ISI进口,自制兔脑凝血质比进口兔脑凝血质敏感度、精确度、稳定性良好.

凝血质的标定及凝血酶原时间标准化的临床应用

本文根据ＷＨＯ孝比方法［１，２］用已知国际敏感度指数（ＩＳＩ）的凝血质对两种未知ＩＳＩ的凝血质进行了标定，并以标准形式报告ＰＴ结呆。用不同凝血质对不同病因引起的出凝血障碍的病人血标本的进行ＰＴ测定，计算其国际标准化比值（ＩＮＲ）。结果表明：虽用不同ＩＳＩ凝血质测同一标本的ＰＴ，所得ＰＴ比值ＰＴＲ（即病人标本的ＰＴ值除以参比血桨的ＰＴ值）差异较大，但所得ＩＲ值却非常接近。证实了以ＩＮＲ形式报告ＰＴ的优越性，对ＰＴ的标准化及质量控制具有一定的参考价值。

酒糟为基质提取凝血质的白地霉培养条件的优化

[目的]优化从提取凝血质的白地霉培养的酒糟副产物利用的最佳培养基。[方法]先通过正交试验及单因素试验确定凝血质的最大提取量,探讨利用酒糟为基质培养白地霉的最佳培养基配比,即确定蛋白饲料水、DDGS水、废糖及酵母泥的最佳配比。[结果]4种营养成分的最佳配比为:蛋白饲料水20 m L、DDGS水120 m L、废糖1 g、酵母泥1.6 g。在以上条件下培养获得白地霉的干菌量为1.402 g,获得粗品的凝血质含量为2.3%。[结论]通过该试验的研究降低了培养白地霉的培养成本,提高了燃料乙醇发酵副产物及废糖的利用率,增加了废弃物的附加值,并开发了凝血质提取和获得的途径。

外周血单个核细胞前凝血质活性测定及应用

外周血单个核细胞前凝血质活性（ＰＣＡ）是监测排异反应的敏感指标。通过淋巴细胞分离液将外周血的单个核细胞分离出，经液氮冻融及超声处理成匀浆，和乏血小板血浆，ＣａＣｌ＿２溶液按比例混合后，检测凝固时间（ｓ）。用ｓｉｍｐｌａｓｔｉｎ作标准制备标准曲线、将凝固时间换成Ｕ／Ｌ，提高了结果的可比性。研究了各种影响因素，发现血小板的存在可明显缩短凝固时间，红细胞也有影响，但比血小板小得多，同时研究了去除血小板及红细胞的方法。用于猪同种异体节段性小肠移植中监测排异反应，结果满意。

白地霉提取凝血质对衰老模型大鼠血栓形成的诊断

目的以白地霉为原料,发酵提取凝血质,诊断衰老模型大鼠血栓形成。方法白地霉菌丝体用醇沉醚吸法提取凝血质并纯化,溶解于生理盐水中。D-半乳糖每日0.125 g/kg皮下注射40 d构建大鼠衰老模型。分为青壮组,年老组及老年5%浓度FeCl3溶液诱导血栓组。分别用断尾取血方法取血一大滴滴到载玻片上,迅速滴加5μl、0.1 g/ml浓度凝血质溶液,倾斜载玻片计时。用针尖每5 s划一次血液,当出现丝状物,计时停止,对比各组凝血时间。结果青壮组小鼠平均体外凝血时间为39 s;老年组平均体外凝血时间为34 s,其中凝血时间最短的4只平均体外凝血时间为30 s,3 d后动脉有血栓产生;年老血栓诱导组平均体外凝血时间为25 s,1 d后,动脉血栓死亡。结论通过白地霉提取的凝血质,经体外凝血实验可诊断衰老模型大鼠血栓形成。

啤酒活性干酵母凝血质提取研究

[目的]研究并优化啤酒活性干酵母凝血质的提取工艺。[方法]生长曲线法确定其培养时间,采用L_9(3~4)正交试验设计,应用低温和葡聚糖凝胶(SephadexG-75)对凝血质进行纯化。[结果]啤酒活性干酵母最佳培养时间为9 d,凝血质提取优化工艺参数为乙醇浓度85%、提取温度35℃、第1次丙酮体积(丙酮∶粗提液)为0.7、恒温磁力搅拌器转数为600 r/min,凝血质提取量可以达到1 000 mL活化液0.660 g,纯化率为13%。[结论]从啤酒活性干酵母可提取凝血质,方法简单易实现,降低凝血质动物来源的生成成本,具有极大的应用价值。

自制凝血质控品的效果观察及应用

目的通过对本室自制凝血实验质控品各项参数观察及对比,寻求较好的制备方法,确认其可靠性。方法收集当日做完凝血实验的剩余新鲜血浆,先为其定值,并分装冷冻于-20℃条件下;观察不加防腐剂和加防腐剂的效果;观察冷冻自制凝血质控品解冻方式、解冻时间对结果的影响;观察自制凝血质控品的稳定性;并与原厂质控品效果对比。结果本次试验发现,加防腐剂组结果差异较大;自制冷冻凝血质控品稳定时间在4个月以内与其新鲜血浆的定值相比,偏差在10%以内。结论不加防腐剂自制凝血质控品,可以在-20℃冷冻条件保存4个月。解冻和检测方式越快越好,室温解冻时间不能超过5min。自制凝血质控品的精密度与原厂质控品相近,自制凝血质控品完全可以应用于凝血实验工作中。

自制凝血质控物稳定性及复融方式探讨

目的探讨自制凝血质控物稳定性及不同复融方式对检测结果的影响。方法 110例门诊健康体检者混合血浆充分混匀,测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),连续20次,求其均值、标准差、变异系数作为混合血浆定值。其余血浆快速分装,于-80℃冰箱冰冻保存备用。取完全冰冻混合血浆40支,20支为一组,一组用流水冲洗复融,另一组37℃水浴复融,分别测定PT、APTT、TT;以后每天实验前37℃水浴复融一支自制凝血质控物,尽快测定PT、APTT、TT,连续10个月,观察自制凝血质控物稳定性及测定结果的精密度。结果流水冲洗复融与37℃水浴复融测定PT、APTT、TT结果差异无统计学意义(P>0.05)。每个月测定值与定值相比,PT、TT在9个月后差异有统计学意义(P<0.05),PT每个月CV<3.5%。APTT在8个月后差异有统计学意义(P<0.05),每个月CV<5%。结论自制正常凝血质控物保存-80℃冰箱,可以稳定8个月。无论用37℃水浴还是流水冲洗复融,只要遵循快速融化原则,及时检测,结果差异无统计学意义。

自制凝血质控品的研究与评价

目的动态观察自制的凝血质控品在室内质控中的结果并做出评价。方法收集凝血像正常的患者的混和血浆,取出3ml,其余分装,-20℃冰冻保存,按方法学评价的内容进行准确度、精密度及稳定性观察。结果自制凝血质控品批内精密度CV%,PT为2.18%,FIB为2.32%,APTT为3.04%,TT为2.65%,日间精密度进口质控品各项凝血指标的CV%范围为2.76%～3.84%,自制质控品各凝血指标的CV%范围为3.91%～4.14%,均符合凝血质控要求。结论自制正常范围凝血质控品有良好精密度、稳定性、准确性,可代替进口正常范围质控品用于室内质控。

外周血单个核细胞前凝血质活性测定及应用

外周血单个核细胞前凝血质活性（ＰＣＡ）是监测排异反应的敏感指标。通过淋巴细胞分离液将外周血的单个核细胞分离出，经液氮冻融及超声处理成匀浆，和乏血小板血浆，ＣａＣｌ２溶液按比例混合后，检测凝固时间（ｓ）。用ｓｉｍｐｌａｓｔｉｎ作标准制备标准曲线、将凝固时间换成Ｕ／Ｌ，提高了结果的可比性。研究了各种影响因素，发现血小板的存在可明显缩短凝固时间，红细胞也有影响，但比血小板小得多，同时研究了去除血小板及红细胞的方法。用于猪同种异体节段性小肠移植中监测排异反应，结果满意。

外周血单个核细胞前凝血质活性测定及应用

近年发现，外周血单个核细胞前凝血质活性（ＰＣＡ）是监测排异反应的敏感指标。测定方法虽很简单，但其影响因素很多。我们研究了各种影响因素，并用Ｓｉｍｐｌａｓｔｉｎ作标准制备标准曲线，将凝固时间转换成ｍＵ／ｍｌ，提高了结果的准确性。用于猪同种异体节段性小肠移植中监测排异反应。

凝血五项质控血浆低温冷冻后复融方式对其稳定性的影响

目的探讨凝血五项质控血浆低温冷冻后复融方式对其稳定性的影响,为实验室成本控制寻找新的理论依据。方法采用美国IL公司ACLTOP700全自动血凝分析仪及其配套同批号试剂和质控品进行该项研究:常规做完质控后,立即将剩余质控品分装到2个EP管中并冻存于-40℃,24 h后通过室温放置30 min和37℃水浴快速两种方式复融,并随当日质控物一起进行检测,连续收集20组数据分析两种复融方式对凝血系列质控品质控参数稳定性的影响。结果室温复融组复融后测定的APTT,PT中值和高值,FIB中值,D-Dimer高值复融前后差异均无统计学意义(P>0.05);而FIB高值平均升高0.23 g/L(t=4.0269,P<0.05);TT中值平均缩短0.46 s(t=-3.813 8,P<0.05),TT高值平均缩短0.41s(t=-3.972 8,P<0.05);D-Dimer低值平均增加14.75 ng/ml FEU(t=2.281 6,P<0.05)。37℃水浴快速复融组复融后测定的APTT,PT,FIB,TT,D-Dimer两个水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论商用凝血质控品短期冻融后只要遵循快速复融原则并及时检测,是可议作为二次质控物来应用,其他实验室可作为参考。

白地霉提取凝血质的初步研究

凝血质,又称凝血因子III,凝血酶原激酶(tissue factor,TF)为黄色或淡黄色软脂状块状物或粉末;酵母细胞中含有大量的凝血质,凝血质通过凝血酶的作用使人体或动物血浆内可溶性的纤维蛋白原变成不可溶的纤维蛋白,从而达到凝血[1]。

凝血混合质控血浆的制备、评价和应用

目的探讨凝血混合质控血浆的制备、瓶间差和稳定性及其在室内质量控制(IQC)中的应用。方法制备凝血混合质控血浆,-20℃冰箱保存,选用体检组混合血浆进行瓶间差的测定,同时用Thrombolyzer Compact-X血凝分析仪上对体检组和患者组混合血浆进行稳定性检测以及常规室内质量控制的开展。结果混合血浆的分装引起的瓶间差很小。体检组混合血浆在-20℃冰箱保存120d内PT-s、APTT、Fib稳定性良好,患者组混合血浆的PT-s、APTT测定值有增加的趋势,Fib降低。患者组混合血浆在90d后三个检测项的偏倚(Bias%)虽然可以接受,但变异系数较大,不再适合作为室内质控物使用。结论凝血混合血浆在一定时间内能够满足临床实验室在单值水平上室内质量控制的使用要求。

临床应用凝血酶原时间INR值制

经近几年推广,各医疗单位逐步采用凝血酶原时间INR值制(PTINR)。在临床应用实践中,使用不同公司生产的凝血活酶试剂,获得的检验结果略有差异;此外,进口试剂包装量相对较大。

血凝酶效价测定新方法的方法学研究

目的:本研究提供了一种新的血凝酶效价测定的方法。方法:采用凝血质控血浆为底物,以凝血分析仪进行测定,利用血凝酶可以直接水解血浆中纤维蛋白原为纤维蛋白使血浆凝固,并且在一定血凝酶浓度范围内,血浆的凝固时间与血凝酶效价成反比的原理,测得血凝酶效价。结果:本方法对血凝酶的精密度的相对标准偏差为2. 3%,准确度的相对标准偏差在4. 1%～4. 8%之间,定量线性范围为0. 4～2. 5 U·mL^(-1),并具有良好的专属性和耐用性,通过市售3个规格9批次注射用矛头蝮蛇血凝酶效价测定,能够较好的控制产品的效价。结论:本研究避免了检验人对凝固终点判定标准的不同和人-枸缘酸血浆存在的差异,所导致产品之间效价存在的差异,实现血凝酶高效、准确的测定。

成人呼吸窘迫综合征诊断标准——凝固因子多种变量分析使用

凝血障碍是 ARDS 发病机理中起主导作用的一种体液因素。分析单一因子非凝固蛋白似乎是一种好的标志,然而我们选择了多种变量分析。在该项目中,选用7例 ARDS 病人与23例危重病患者作比较。这些 ARDS病因是:病毒性肺炎、肺炎球菌性急性水肿、溺水、海洛因过量腹膜炎、心脏骤停。对照组病因是:严重败血症(ss5例)、急性细菌性肺炎(ADP6例)、慢性阻塞性肺部疾病合并急性呼吸衰竭(aopD6例)、慢性阻塞性肺部疾病合并急性呼吸衰竭(aopD6例)中毒昏迷使用机械通气(TC6例)。在所有病人急性期测定项目:蛋白 C 抗原、蛋白 C 功能活性、前凝血质第8因子、第8因子相关抗原蛋白、第5因子、纤维蛋白原、纤维蛋白降解产物、血小板、ALAT、γ—GT。