大黄虫丸对大鼠脑出血模型神经损伤积分值和脑组织凝血酶受体mRNA表达的影响

目的:观察大黄虫丸对大鼠脑出血模型神经损伤积分和脑组织凝血酶受体(TR)mRNA表达的影响。方法:以雄性Sprauge-Dawley大鼠为实验动物,共分4组,正常组、假手术组、模型组、中药组。模型组和中药组选择胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型,中药组予大鼠大黄虫丸的混悬液2.5mL灌胃,每天1次,正常组、假手术组、模型组予等量的生理盐水灌胃,每天1次,观察各组8、24、48、72h神经损伤积分情况,3天后将大鼠断头处死,快速取出血肿周围组织约100mg,以RT-PCR法测定脑组织中凝血酶受体(TR)mRNA表达。结果:大鼠神经功能缺损体征以造模8h最明显,神经行为三试验(姿势反射、前肢位置试验和杆上平衡试验)积分最高;随时间延长,体征减轻、积分减少。术后24、48、72h中药组神经行为积分均明显低于模型组(P<0.05),而假手术组无偏瘫等神经功能缺损表现,故未进行统计。正常组、假手术组脑组织TRmRNA仅有少量表达,模型组、中药组脑组织的TRmRNA表达明显上调,和正常组、假手术组有明显的的差异(P<0.05)。但中药大黄虫丸能明显的下调脑出血大鼠脑组织TRmRNA的表达和模型组相比P<0.05。结论:胶原酶加肝素联合注射法诱导脑出血大鼠模型血肿周围脑组织凝血酶受体(TR)mRNA表达增高,大黄虫丸对脑出血大鼠脑组织TRmRNA的表达增加有下调作用,并可明显的改善大鼠脑出血模型的神经行为功能的缺损。

大鼠血管球囊损伤促进血小板活化、凝血酶受体及血管紧张素Ⅱ1型受体的mRNA表达

目的该研究通过建立大鼠主动脉内皮球囊损伤模型,观察血小板活化、凝血酶受体及血管紧张素Ⅱ1型受体的变化。方法将大鼠随机分为对照组(n=24)和手术组(n=24),并于术后3、7、14和28d取主动脉,通过组织学检查、放射免疫法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测血管球囊损伤后内膜增生的过程、血小板表面GMP-140的数目、血管AT1受体和凝血酶受体mRNA表达的变化。结果①凝血酶受体mRNA在正常血管组织表达极弱,球囊损伤术后3d已显著增加,术后14d达峰值,术后28d开始下降。②AT1受体mRNA于术后3d明显增高,并持续至术后14d,术后28d恢复至对照水平。③GMP-140于术后3d明显升高,术后7d开始下降。④内皮损伤术后3d已有增殖的血管平滑肌细胞(VSMC)移行至内膜层,术后7d内膜开始增生,术后14dVSMC的增殖及内膜增生更为明显,术后28dVSMC的增殖明显减弱,细胞外基质增加,内膜继续增生。结论血小板活化、凝血酶受体和AT1受体mRNA表达增加参与了血管内皮损伤后内膜增生的过程。

滋阴活血解毒方对局灶性脑缺血大鼠凝血酶原mRNA和蛋白酶激活受体-1 mRNA含量的影响

目的观察滋阴活血解毒方对局灶性脑缺血模型大鼠脑组织凝血酶原mRNA和蛋白酶激活受体(PAR-1)mRNA表达的影响,探讨其脑保护机制。方法将24只大鼠随机分为假手术组、模型组、滋阴活血解毒方组、阿加曲班组,每组分1、3 d两个时间点。滋阴活血解毒方组灌服中药水煎剂,每日剂量32.4 g/kg;阿加曲班组为腹腔注射给药,第1、2日每日剂量为11.16 mg/kg,第3日剂量为3.72 mg/kg。假手术组和模型组均灌服等容量生理盐水,每日剂量为2 mL/100 g。均分2次给药。线栓法制备大脑中动脉闭塞模型。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑组织中凝血酶原mRNA及PAR-1mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组脑组织中凝血酶原mRNA、PAR-1 mRNA表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),滋阴活血解毒方组和阿加曲班组能明显下调凝血酶原mRNA、PAR-1 mRNA表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论滋阴活血解毒方能抑制脑组织中凝血酶原mRNA和PAR-1 mRNA的表达,减轻凝血酶的毒性反应,这可能是其发挥脑保护作用的机制之一。

组织因子凝血酶受体和血栓调节蛋白在重度脓毒症诱导ALI／ARDS大鼠肺组织细胞中的表达

目的探讨重度脓毒症诱导的ALI/ARDS大鼠肺组织细胞组织因子（TF）、凝血酶受体（TR）和血栓调节蛋白（TM）的表达。方法应用盲肠结扎穿孔（CLP）加生理盐水灌洗法制作重度脓毒症诱导的ALI／ARDS大鼠，以PaO2／FiO2≤300作为ALI/ARDS大鼠纳入标准，随机分为假手术组、ALI／ARDS组。制模成功后1、2、3h处死大鼠，取肺组织称质量制备组织匀浆，ELISA方法测定TF、TR和TM的表达。结果①TF表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（206363±8178）pg／mL、（148186±6383）pg／mL、（170889±7180）pg／mL，较假手术组[（55956±271）pg／mL、（53269±473）pg/mL、（54175±416）pg/mL]明显升高（P〈0．05）。②TR表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（1．657±0．063）ng／mL、（1．180±0．074）ng／mL、（1．497±0．087）ng／mL，较假手术组[（0．266±0．046）ng/mL、（0．273±0．048）ng／mL、（0．258±0．050）ng／mL]明显升高（P〈0．01）。③TM表达：ALI/ARDS组灌洗后1、2、3h分别为（16960±179）ng/mL、（10372±300）ng／mL、（12287±189）ng／mL，较假手术组[（567±21）ng／mL、（774±35）ng／mL、（695±43）ng/mL]明显升高（P〈0．05）。ALI／ARDS组组内各时点参数比较差异无统计学意义，但呈现灌洗后1h急性应激性升高、2h后下降、3h后再次上升的趋势。结论重度脓毒症诱导的ALI/ARDS大鼠肺组织在高表达TF和TR等促凝血因子的同时，也高表达具有辅助抗凝和增加纤溶功能的TM。

凝血酶对U_(937)细胞uPAR mRNA表达的影响

目的研究凝血酶通过凝血酶受体 (TR)对细胞uPARmRNA表达的影响。 方法在凝血酶、灭活凝血酶、和抗TR小肽多抗等作用下 ,以RT -PCR法测定培养U937细胞uPARmRNA的表达量。 结果凝血酶增强uPARmRNA表达呈现凝血酶剂量和作用时间的依赖性。其作用机制与凝血酶和细胞膜上TR间的结合、以及凝血酶的蛋白水解活性有关。高浓度凝血酶或中等浓度凝血酶在延长作用时间时 ,对U937细胞uPARmRNA表达有明显抑制效应。 结论凝血酶对U937细胞uPARmRNA表达的影响 ,除通过活化TR外可能还存在其它的途径 。

孤儿受体TR2 mRNA在恒河猴睾丸中表达的研究

以孤儿受体TR2cDNA 5′ 端的一段片段为模板体外转录的地高辛标记的cDNA及α 3 2 P dCTP标记的该片段cDNA为探针 ,用原位杂交和Northern杂交的方法研究孤儿受体TR2mRNA在恒河猴睾丸中的细胞定位和特异表达 .结果表明TR2mRNA在恒河猴睾丸中特异定位于生精细胞 ,主要在处于减数分裂期的分化程度较高的生精细胞 ,其表达在不同的曲细精管有明显的差异 ,在生精作用旺盛的曲细精管表达较强 .从年龄来看 ,成年恒河猴的表达显著强于幼年恒河猴 .这些结果首次表明 。