菜籽凝血酶抑制肽的酶法制备研究

以菜籽蛋白为原料,比较多种蛋白酶(碱性蛋白酶2709、Alcalase 2.4L、Protex 6L、Protex 7L和Neturase 1.5MG)对菜籽蛋白水解特性的影响,以及不同水解产物的凝血酶抑制活性,确定Alcalace 2.4L为制备菜籽抗凝血肽的最佳用酶,并获得其最优制备工艺条件为:底物浓度3.0g/100 mL、温度60℃、pH 8.5、加酶量7 000 U/g、酶解时间2.0 h,在此条件下菜籽蛋白的水解度为18.1%,酶解液的凝血酶抑制率达到98.8%.

非肽类凝血酶抑制剂的比较分子力场分析

在血栓症和止血疗法中凝血酶起重要的生物调节作用,凝血酶抑制剂由于其溶血栓作用成为药物设计的热点.对非肽类芳基磺酸酯系列凝血酶抑制剂进行了三维定量构效关系研究,用Autodock方法和比较分子力场分析相结合构建了该类分子的定量构效关系模型,得到三维等值线图.模型的传统相关系数r^2=0.956,交叉验证系数q^2=0.681,F_(4.16)=85.985,标准偏差S=0.158.该模型为凝血酶抑制剂的进一步结构改造提供了有益的启示.

达比加群酯的合成

3-硝基-4-氯苯甲酸(2)经甲胺化得3-硝基-4-甲氨基苯甲酸(3),2-氨基吡啶与丙烯酸乙酯经迈克尔加成得3-[(吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯(5),化合物3与5经缩合、催化氢化得3-{[(3-氨基-4-甲胺基)苯甲酰基](吡啶-2-基)氨基}丙酸乙酯(7),化合物7再与N-(4-氰基苯基)甘氨酸(8)酰化、环合和Pinner反应,最后与氯甲酸正己酯反应得到达比加群酯(1),总收率约40%(以3-硝基-4-氯苯甲酸计),结构经IR、1H NMR和MS测试技术确证。