半夏不同炮制品刺激性毒性变化及凝集素蛋白检测研究

为研究半夏不同炮制品炮制过程中刺激性毒性与凝集素蛋白含量变化的相关性,考察Western blot法作为凝集素蛋白检查方法的可行性。自制不同炮制程度的清半夏、法半夏和姜半夏,采用家兔眼结膜刺激模型考察不同炮制程度的半夏炮制品的刺激性毒性变化,采用Western blot法研究半夏不同炮制品中凝集素蛋白的含量变化,分析炮制过程中刺激性毒性变化与凝集素蛋白含量变化的相关性,收集多批次半夏不同炮制品饮片,检测其中的凝集素蛋白含量。结果显示,随着炮制时间的延长,3种半夏炮制品刺激性毒性逐渐降低,凝集素蛋白含量逐渐下降。清半夏浸泡4 d、法半夏浸泡2 d及姜半夏煮制0.5 h后刺激性毒性显著降低,凝集素蛋白含量显著下降。炮制过程中凝集素蛋白含量下降趋势与刺激性毒性变化趋势一致,表明凝集素蛋白含量变化能够反映刺激性毒性的变化。在清半夏、法半夏及姜半夏供试品免疫印迹图中,均未检出活性凝集素蛋白条带,表明以Western blot法检测凝集素蛋白可作为半夏炮制品中毒性凝集素蛋白检测方法。半夏按药典方法炮制合格后不应检测出凝集素蛋白。