血清几丁质酶-3样蛋白1及实验室指标对维持性血液透析患者自体动静脉内瘘失功的预测价值

目的 探讨血清几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)及实验室指标水平对维持性血液透析(MHD)患者自体动静脉内瘘(AVF)失功的预测价值。方法 选取2019年1月至2021年6月湖南中医药高等专科学校附属第一医院收治的223例MDH患者为研究对象,其中出现AVF失功患者74例(观察组),未出现AVF失功且超声下内瘘通畅患者的149例(对照组);比较两组患者的血常规、生化指标及CHI3L1水平的差异;采用多因素Logistic回归分析AVF失功的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),分析血清CHI3L1及实验室指标对AVF失功的预测价值。结果 与对照组比较,观察组超滤量、甲状旁腺激素(PTH)、同型半胱氨酸(Hcy)、血磷、血尿酸(UA)、低密度脂蛋白(LDL)、纤维蛋白原(FG)、空腹血糖(FPG)及CHI3L1水平升高(P<0.05),清蛋白、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)降低(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果表明,高水平超滤量、PTH、UA、Hcy、FPG、LDL、FG及CHI3L1是影响MHD患者发生AVF失功的独立危险因素(P<0.05),高SBP及DBP则是独立保护因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,CHI3L1、Hcy、FPG、LDL预测MHD患者AVF失功效能的AUC均在0.7以上,预测效能较好。结论 高水平超滤量、PTH、UA、Hcy、FPG、LDL、FG及CHI3L1是影响MHD患者发生AVF失功的独立危险因素,高SBP、DBP则是独立保护因素,血清CHI3L1及部分实验室指标对MHD患者发生AVF失功具有一定的预测价值。

血清几丁质酶-3样蛋白1与血液透析患者预后关系的研究

目的探讨血清几丁质酶-3样蛋白1(chitinase 3-like protein 1,CHI3L1)与血液透析患者全因死亡和心脑血管疾病死亡之间的关系。方法本研究为前瞻性队列研究,病例来自2014年9月北京大学第三医院肾内科维持性血液透析患者。测定基线血CHI3L1水平,并根据中位数将患者分为高CHI3L1组和低CHI3L1组,随访9年。用Kaplan-Meier生存分析高CHI3L1组和低CHI3L1组患者生存率的差异,用限制性立方样条(restricted cubic spline,RCS)曲线描述CHI3L1与全因死亡率的剂量反应关系,用多因素COX比例风险模型分析患者全因死亡或心脑血管疾病死亡的独立危险因素。结果共纳入109例患者,随访时间为80.0(38.2,113.2)个月。Kaplan-Meier生存分析显示高CHI3L1组患者全因死亡率高于低CHI3L1组(χ^(2)=4.720,P=0.030),2组患者心脑血管疾病死亡率无明显差异(χ^(2)=1.954,P=0.162)。当CHI3L1≥199.8 ng/ml时,全因死亡率随着CHI3L1水平的增加有明显增加(HR=1.747,95%CI:1.035~2.947,P=0.037)。COX回归分析结果显示:年龄增加(HR=1.029,95%CI:1.001~1.056,P=0.040)、长透析龄(HR=2.251,95%CI:1.310~3.868,P=0.003)、收缩压高(HR=1.022,95%CI:1.008~1.036,P=0.002)、血肌酐低(HR=0.135,95%CI:0.064~0.283,P<0.001)均为血液透析患者全因死亡的独立危险因素,多种因素校正后高CHI3L1仍然是患者全因死亡的独立危险因素(HR=1.963,95%CI:1.010~3.813,P=0.047)。结论高CHI3L1组患者全因死亡率高于低CHI3L1组患者,血CHI3L1可能是血液透析患者全因死亡的独立预测指标。

血清壳多糖酶3样蛋白1和几丁质酶1在脓毒症新生儿中的表达变化及其临床价值研究

目的:探讨血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)和几丁质酶1(CHIT1)在脓毒症新生儿中的表达变化及临床价值。方法:选取新生儿脓毒症95例为脓毒症组,根据病情严重程度分为严重脓毒症组(65例)和脓毒症休克组(30例)。选取健康新生儿65例为对照组。检测血清CHI3L1和CHIT1水平以及白细胞计数、中性粒细胞计数、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)。分析血清CHI3L1、CHIT1水平与白细胞和中性粒细胞计数、TNF-α、IL-4、PCT、CRP的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CHI3L1、CHIT1水平对脓毒症患儿预后的预测价值。结果:脓毒症组血清CHI3L1、CHIT1水平高于对照组(均P<0.05)。脓毒症休克组患儿血清CHI3L1和CHIT1水平、中性粒细胞计数、TNF-α、IL-4、PCT、CRP高于严重脓毒症组(均P<0.05)。脓毒症患儿血清CHI3L1、CHIT1水平与中性粒细胞计数、TNF-α、IL-4、PCT及CRP呈正相关(均P<0.05)。95例脓毒症患儿中病死15例,存活80例,病死组血清CHI3L1、CHIT1水平高于存活组(均P<0.05)。血清CHI3L1、CHIT1水平对脓毒症患儿预后均有一定的预测价值,且两者联合预测价值更高(均P<0.05)。结论:脓毒症新生儿血清CHI3L1和CHIT1水平升高,与病情严重程度及不良预后有关,两者联合对脓毒症新生儿的预后具有较高的预测价值。

伊木萨克提取物调控NOD样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1通路对勃起功能障碍大鼠的干预效果

目的分析伊木萨克提取物调控核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(NLRP3/Caspase-1)通路对勃起功能障碍大鼠的干预效果。方法选取40只SPF级8周龄SD大鼠,随机选取10只作为对照组,另外30只建立勃起功能障碍模型,并将30只建模成功大鼠分为3组:用生理盐水灌胃大鼠为模型组,用西地那非灌胃大鼠为药物对照组,用伊木萨克提取物灌胃大鼠为伊木萨克提取物组,每组各10只。连续灌胃28 d后,采用HE染色法观察各组大鼠阴茎海绵体病理组织学特征;比较各组大鼠性功能指标;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠外周血氮氧化物(NOX)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)等内皮功能指标,和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)等氧化应激指标;采用实时定量PCR法检测各组大鼠阴茎海绵体组织NLRP3、Caspase-1 mRNA相对表达量;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组大鼠海绵体组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果各组大鼠海绵体形态学观察显示,对照组大鼠海绵体窦状隙中具有红细胞;模型组大鼠阴茎海绵体内血窦数量、小血管数量减少,内皮细胞密度下降;药物对照组、伊木萨克提取物组大鼠阴茎海绵体内小血管数量、血窦数量增加,且伊木萨克提取物组大鼠海绵体形态学特点的改善程度大于药物对照组。与对照组比较,其他3个建模组骑跨次数、插入次数、舔嗅次数、精子密度、精子存活率均显著下降,首次爬背时间显著增加(P<0.05);伊木萨克提取物组骑跨次数、插入次数、舔嗅次数、精子密度、精子存活率显著高于模型组和药物对照组,首次爬背时间显著少于模型组和药物对照组(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,其他3个建模组血清NOX、ET-1、LOX-1、MDA水平显著升高,NO、SOD、GSH水平显著降低(P<0.05);伊木萨克提取物组NOX、ET-1、LOX-1、MDA水平显著低于模型组和药物对照组,NO、SOD、GSH水平显著高于模型组和药物对照组(P<0.05)。实时定量PCR结果显示,与对照组比较,其他3个建模组NLRP3、Caspase-1相对表达量显著升高(P<0.05);伊木萨克提取物组NLRP3、Caspase-1相对表达量显著低于模型组和药物对照组(P<0.05);Western Blot检测结果显示,与对照组比较,其他3个建模组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著升高(P<0.05);伊木萨克提取物组NLRP3、Caspase-1蛋白表达量显著低于模型组和药物对照组(P<0.05)。结论伊木萨克提取物可改善大鼠性功能,提高大鼠精子密度及精子存活率,其作用机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1通路有关。

基于NOD样受体蛋白3/半胱天冬酶-1信号通路探究槲寄生滴眼液对干眼症模型小鼠的治疗效果

目的基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(Caspase-1)信号通路探究槲寄生滴眼液对干眼症模型小鼠的治疗效果。方法将干眼症模型小鼠(采用苯扎氯铵溶液滴眼造模)随机分为模型组(以生理盐水干预)、槲寄生滴眼液组(槲寄生滴眼液滴眼5μL,每天2次)、NLRP3/Caspase-1通路抑制剂(VX-765)组(腹腔注射50 mg/kg VX-765,每天1次)、槲寄生滴眼液+VX-765组(槲寄生滴眼液滴眼5μL,每天2次,腹腔注射50 mg/kg VX-765,每天1次),每组12只。另取12只健康小鼠作为对照组(以生理盐水干预)。各组均持续给药14 d。酚红棉线测定泪液分泌情况;苏木精-伊红染色观察结膜上皮和泪腺组织病理改变情况;酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平;荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别测定结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组结膜上皮细胞排列紊乱,杯状细胞数量减少,固有层可见淋巴细胞浸润等病理损伤,泪腺组织呈现腺泡空泡样改变,结构不清晰,大小不均一,各小叶及腺泡间细胞排列紊乱等病理变化,泪液分泌量(酚红棉线被浸湿的长度,下同)[(2.66±0.42)mm比(6.14±1.09)mm,P<0.05]显著减少,血清IL-18[(53.16±6.95)pg/mL比(15.04±2.14)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(57.28±7.11)pg/mL比(24.51±3.06)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮及泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(3.05±0.43)比(1.00±0.05),P<0.05;Caspase-1mRNA:(4.41±0.62)比(1.00±0.06),P<0.05;NLRP3蛋白:(1.33±0.21)比(0.17±0.03),P<0.05;Caspase-1蛋白:(1.51±0.26)比(0.20±0.04),P<0.05]表达显著升高。与模型组比较,槲寄生滴眼液组、VX-765组和槲寄生滴眼液+VX-765组结膜上皮和泪腺组织上述病理损伤减轻,泪液分泌量[(4.15±0.53)mm、(4.11±0.55)mm、(5.38±0.62)mm比(2.66±0.42)mm,P<0.05]显著增加,血清IL-18[(36.03±5.71)pg/mL、(35.92±5.66)pg/mL、(20.07±3.38)pg/mL比(53.16±6.95)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(40.85±5.04)pg/mL、(41.06±5.12)pg/mL、(28.08±4.57)pg/mL比(57.28±7.11)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(2.11±0.32)、(2.09±0.29)、(1.37±0.22)比(3.05±0.43),P<0.05;Caspase-1 mRNA:(2.93±0.38)、(2.89±0.36)、(1.58±0.25)比(4.41±0.62),P<0.05;NLRP3蛋白:(0.60±0.11)、(0.59±0.09)、(0.19±0.04)比(1.33±0.21),P<0.05;Caspase-1蛋白:(0.72±0.12)、(0.74±0.11)、(0.23±0.05)比(1.51±0.26),P<0.05]表达显著降低。与槲寄生滴眼液组和VX-765组比较,槲寄生滴眼液+VX-765组结膜上皮和泪腺组织上述病理损伤进一步减轻,泪液分泌量[(5.38±0.62)mm比(4.15±0.53)mm、(4.11±0.55)mm,P<0.05]显著增加,血清IL-18[(20.07±3.38)pg/mL比(36.03±5.71)pg/mL、(35.92±5.66)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(28.08±4.57)pg/mL比(40.85±5.04)pg/mL、(41.06±5.12)pg/mL,P<0.05]、结膜上皮和泪腺组织NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白[NLRP3 mRNA:(1.37±0.22)比(2.11±0.32)、(2.09±0.29),P<0.05;Caspase-1mRNA:(1.58±0.25)比(2.93±0.38)、(2.89±0.36),P<0.05;NLRP3蛋白:(0.19±0.04)比(0.60±0.11)、(0.59±0.09),P<0.05;Caspase-1蛋白:(0.23±0.05)比(0.72±0.12)、(0.74±0.11),P<0.05]表达显著降低。结论炎症,可能通过下调NLRP3/Caspase-1信号通路实现。

血清几丁质酶3样蛋白1、可溶性髓样细胞触发受体-1水平对急性缺血性脑卒中患者颅内动脉狭窄支架成形术后再狭窄的预测价值

目的 探讨血清几丁质酶3样蛋白1(chitinase 3 like 1,CHI3L1)、可溶性髓样细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expressed on myeloid cells 1,sTREM-1)水平对急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者颅内动脉狭窄支架成形术后支架内再狭窄(intrastent restenosis,ISR)的预测价值。方法 选取2019年1月至2022年6月北京市和平里医院收治的200例接受颅内动脉狭窄支架成形术的AIS患者为研究对象,根据术后6个月内是否发生ISR将研究对象分为ISR组(发生ISR,40例)和无ISR组(未发生ISR,160例)。比较分析两组患者的临床特征。采用多因素logistic回归方法分析AIS患者颅内动脉狭窄支架成形术后ISR的独立危险因素。采用受试者工作特征曲线分析血清CHI3L1、sTREM-1水平对AIS患者颅内动脉狭窄支架成形术后ISR的预测价值。结果 ISR组患者的狭窄程度、低密度脂蛋白胆固醇、CHI3L1、sTREM-1均显著高于无ISR组(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,狭窄程度增加以及低密度脂蛋白胆固醇、CHI3L1、sTREM-1水平升高为AIS患者颅内动脉狭窄支架成形术后ISR的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清CHI3L1、sTREM-1联合指标预测AIS患者颅内动脉狭窄支架成形术后ISR的曲线下面积为0.872,显著高于CHI3L1(曲线下面积为0.793)和sTREM-1(曲线下面积为0.794)单一指标(P<0.05)。结论 CHI3L1、sTREM-1为AIS患者颅内动脉狭窄支架成形术后ISR的独立危险因素,且联合指标检测对AIS患者的颅内动脉狭窄支架成形术后ISR具有一定预测价值。

壳多糖酶3样蛋白1在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在肺癌诊断中的临床价值。方法选取2022年1-12月安徽医科大学第一附属医院北区收治的106例肺癌患者为肺癌组,同期收治的76例肺良性疾病患者作为肺良性疾病组及20例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验法检测CHI3L1水平,化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)水平。结果肺癌组血清CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组血清CEA较肺良性疾病组明显升高,而血清CHI3L1较肺良性疾病组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与肺腺癌、肺鳞癌患者比较,小细胞肺癌患者血清NSE、ProGRP水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌、小细胞肺癌患者比较,肺鳞癌患者血清CYFRA21-1水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,肺癌组Ⅰ~Ⅱ期患者血清NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1进行多因素Logistic逐步回归分析,发现NSE、CHI3L1对肺癌的发生产生影响。CHI3L1、NSE联合检测诊断肺癌的灵敏度为96.2%,特异度为90.0%,曲线下面积为0.965。结论血清CHI3L1可辅助肺癌的诊断与鉴别诊断,CHI3L1、NSE联合检测有助于临床对肺癌的早期发现,具有良好的临床应用价值。

血清几丁质酶3样蛋白1、MMP-9与脑白质高信号的相关性

目的通过检测血清炎性因子几丁质酶3样蛋白1(YKL-40)、MMP-9水平,探讨其与脑白质高信号(WMH)的相关性,为WMH的发病机制和预防治疗提供新思路。方法选取2020年12月至2022年6月在郑州大学第二附属医院神经内科就诊的WMH患者120例,行头颅磁共振成像评估WMH严重程度,根据Fazekas量表评分将患者分为轻度组(1~2分,42例)、中度组(3~4分,51例)、重度组(5~6分,27例)。收集患者的一般资料、实验室检查指标,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者血清YKL-40、MMP-9水平并进行比较分析。WMH严重程度影响因素采用有序logistic回归分析;YKL-40、MMP-9水平与WMH严重程度相关性采用Spearman相关性分析。结果轻度组高血压患病率显著低于中度组、重度组,差异有统计学意义(P<0.05);3组间年龄、血清YKL-40、MMP-9水平两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。有序logistic回归分析结果显示:血清YKL-40(OR=1.15,95%CI:0.003~0.286,P<0.05)、血清MMP-9(OR=1.26,95%CI:0.138~0.329,P<0.05)升高是WMH严重程度的独立危险因素。Spearman相关性分析结果显示:血清YKL-40(r=0.811,P<0.05)、MMP-9(r=0.913,P<0.05)水平与WMH严重程度呈正相关。结论血清YKL-40、MMP-9水平与WMH严重程度呈正相关,有助于预测WMH的严重程度、明确发病机制并为其治疗预防提供新思路。

阿尔茨海默病患者血清C-X-C基序趋化因子配体12和几丁质酶3样蛋白1的表达水平及其临床意义

目的分析阿尔茨海默病(AD)患者血清C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)的表达水平及其临床意义。方法选择113例AD患者作为AD组,60例血管性痴呆(VD)患者作为VD组,60例健康体检者作为对照组,根据简易精神状态检查(MMSE)量表评分结果将AD组患者分为轻度组(n=27)、中度组(n=51)、重度组(n=35)。比较AD组、VD组、对照组之间及不同病情严重程度的AD患者之间的血清CXCL12、CHI3L1表达水平。采用Pearson检验分析AD患者血清CXCL12、CHI3L1表达水平与MMSE量表评分的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCL12、CHI3L1表达水平对AD的诊断效能。结果与对照组相比,AD组和VD组的血清CXCL12表达水平降低,血清CHI3L1表达水平升高,且AD组的血清CXCL12表达水平低于VD组,血清CHI3L1表达水平高于VD组(P<0.05);不同病情严重程度AD患者血清CXCL12、CHI3L1表达水平差异有统计学意义,其中血清CXCL12表达水平为重度组<中度组<轻度组,血清CHI3L1表达水平为重度组>中度组>轻度组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,AD患者血清CXCL12表达水平与MMSE量表评分呈正相关,血清CHI3L1表达水平与MMSE量表评分呈负相关,血清CXCL12表达水平与血清CHI3L1表达水平呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CXCL12、CHI3L1表达水平单独及联合诊断AD的曲线下面积分别为0.862、0.831、0.915,二者联合诊断的效能优于单独诊断(P<0.05),且血清CXCL12和CHI3L1表达水平的最佳截断值分别为2.03 ng/mL和211.08 ng/mL。结论AD患者血清中CXCL12表达下调、CHI3L1表达上调,二者表达异常与AD病情严重程度密切相关。二者或可作为辅助诊断AD及判断其病情严重性的生物学标志物。

冠状动脉CT血管造影定量分析指标与冠心病患者血清分泌性卷曲蛋白5几丁质酶-3样蛋白-1表达水平相关性

目的 分析冠状动脉CT血管造影定量分析指标与冠心病患者血清分泌性卷曲蛋白5(SFRP-5)、几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)表达水平的相关性。方法 选择安阳市第六人民医院2019年10月至2022年10月收治的96例接受冠状动脉CT血管造影检查的患者作为研究对象。根据冠状动脉CT血管造影Agatston法积分的不同将所有患者分为钙化组(75例)和对照组(21例),根据CT血管造影Agatston法积分从低至高的顺序将钙化组患者分为A组、B组和C组。其中A组患者22例,B组患者25例,C组患者28例,对比对照组和钙化组患者基线资料,检测并对比对照组和A、B、C组患者血清SFRP-5、YKL-40水平,采用Pearson分析法分析冠状动脉CT血管造影Agatston法积分与血清SFRP-5、YKL-40指标的相关性。结果 2组患者性别、体质指数经对比,差异无统计学意义,钙化组患者年龄较对照组大,钙化组患者糖尿病史、高血压史患者占比相较于对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C组血清YKL-40水平均比对照组高,且C组比B组高,B组比A组高,A、B、C组血清SFRP-5均比对照组低,且C组比B组低,B组比A组低,差异有统计学意义(均P<0.05);Pearson分析法显示,冠状动脉CT血管造影Agatston法积分与血清YKL-40表达水平呈正相关(r=0.63,P<0.05),而与血清SFRP-5表达水平呈负相关(r=-0.66,P<0.05)。结论 冠状动脉钙化的影响因素有年龄、糖尿病史、高血压史,冠状动脉CT血管造影检查所显示的冠状动脉钙化程度与患者血清SFRP-5、YKL-40表达水平之间存在紧密联系,检测上述指标可用于对患者冠状动脉钙化程度进行评估。

几丁质酶-3样蛋白1对脂多糖诱导小鼠骨骼肌卫星细胞炎症损伤相关分子表达的影响

目的探讨在脓毒症模型中几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)介导骨骼肌干细胞损伤的潜在机制。方法用6种浓度的脂多糖(LPS)刺激体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和细胞增殖与毒性试剂盒(CCK-8)筛选出细胞处理最佳浓度。构建CHI3L1过表达和干扰载体转染骨骼肌卫星细胞,采用聚合酶链反应(PCR)、蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)验证转染效率。将细胞按随机数字表法分为空白对照组(不加任何干预的细胞)、模型组(LPS刺激未转染的细胞)、过表达CHI3L1组(LPS刺激转染了CHI3L1过表达质粒的细胞)、过表达CHI3L1对照组(LPS刺激转染了空载质粒的细胞)、干扰CHI3L1组(LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列的细胞)、干扰CHI3L1对照组(LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列阴性对照的细胞)。采用ELISA检测细胞外天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;采用Western blotting检测细胞中IL-1β、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达水平。结果根据CCK-8和ELISA检测结果筛选出最佳浓度为5 mg/L的LPS进行后续实验,且PCR、Western blotting证实转染有效。与空白对照组比较,模型组细胞外IL-1β、caspase-1含量和细胞中Akt、p-Akt、IL-1β的蛋白表达水平均明显升高〔IL-1β(ng/L):11.22±0.55比8.63±0.63,caspase-1(pmol/L):9.47±0.22比8.65±0.15,Akt/GAPDH:1.36±0.12比1.06±0.15,p-Akt/GAPDH:0.78±0.07比0.09±0.01,IL-1β/GAPDH:1.38±0.12比0.18±0.03,均P<0.05〕。与模型组、过表达CHI3L1对照组比较,过表达CHI3L1组细胞外IL-1β、caspase-1含量和细胞中p-Akt、IL-1β的蛋白表达均明显升高〔IL-1β(ng/L):14.93±0.97比11.22±0.55、9.38±0.40,caspase-1(pmol/L):10.35±0.03比9.47±0.22、8.46±0.24,p-Akt/GAPDH:1.21±0.04比0.78±0.07、0.63±0.04,IL-1β/GAPDH:1.87±0.08比1.38±0.12、1.51±0.17,均P<0.05〕。与模型组、干扰CHI3L1对照组比较,干扰CHI3L1组细胞外IL-1β和caspase-1含量及细胞中p-Akt、IL-1β的蛋白表达均明显降低〔IL-1β(ng/L):8.98±0.73比11.22±0.55、10.44±0.65,caspase-1(pmol/L):7.61±0.63比9.47±0.22、8.37±0.38,p-Akt/GAPDH:0.50±0.04比0.78±0.07、0.94±0.06,IL-1β/GAPDH:0.77±0.02比1.38±0.12、1.13±0.07,均P<0.05〕。结论CHI3L1可能通过caspase-1和IL-1β介导脓毒症模型中小鼠骨骼肌干细胞的损伤;CHI3L1可能参与了调控骨骼肌干细胞中Akt的信号通路,而对STAT3信号通路无明显影响。

急性脑梗死病人血清壳三糖苷酶1和几丁质酶3样蛋白1表达水平与预后的关系

目的检测急性脑梗死病人血清壳三糖苷酶1(CHIT1)和几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)的表达水平,并探讨其与病人预后的关系。方法选择2018年12月至2020年12月咸宁市中心医院接收的96例急性脑梗死病人作为疾病组,根据预后情况分为预后良好组(52例)和预后较差组(44例)。同期在咸宁市中心医院进行体检的96例健康者作为健康组。使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清CHIT1和CHI3L1表达水平;多因素logistic回归分析急性脑梗死病人90 d预后的影响因素;ROC曲线分析血清CHIT1和CHI3L1水平预测急性脑梗死病人90 d预后的价值。结果相比于健康组,疾病组血清CHIT1和CHI3L1的表达水平显著增加[(55.33±8.97)比(23.28±6.13)μg/L,(76.04±11.53)比(34.86±7.21)μg/L,P<0.05];预后较差组病人血清CHIT1和CHI3L1的表达水平显著高于预后良好组[(63.44±9.86)比(48.46±7.70)μg/L,(91.41±17.68)比(63.03±13.13)μg/L,P<0.05];血清CHIT1和CHI3L1可作为急性脑梗死病人90 d预后的影响因素(P<0.05);CHIT1和CHI3L1联合预测急性脑梗死病人90 d预后的曲线下面积(AUC)明显大于CHIT1和CHI3L1单一指标(P<0.05)。结论急性脑梗死病人血清中CHIT1和CHI3L1表达水平增加,与病人的预后有关,可用于预测急性脑梗死病人短期预后,具有作为预后标志物的潜力。

微RNA-223-3p调控NOD样受体热蛋白结构域3/胱天氨酸蛋白酶-1/白细胞介素-1β信号通路抗小鼠肝纤维化的作用及机制

目的探讨微RNA-223-3p(miR-223-3p)调控NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/胱天氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路抗小鼠肝纤维化的作用及其机制。方法将32只ICR小鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、miR-223-3p模拟物(miR-223-3p agomir)组和阴性对照miRNA模拟物(agomir-NC)组,建立四氯化碳小鼠肝纤维化模型。miR-223-3p agomir组和agomir-NC组于第4周末尾静脉注射miR-223-3p agomir及agomir-NC(给药剂量为每只200 nmol/L),每周给药3次,连续给药2周。分别比较4组小鼠血清总胆红素(TBIL)、白蛋白(Alb)、血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)表达水平,采用苏木精-伊红(HE)染色及马松(Masson)染色检测肝组织病理改变。采用基因本体分析(GO)、KEGG分析对miR-223-3p进行功能分析,采用Targetscan数据库对miR-223-3p的靶基因进行预测,实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)检测肝组织NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA及蛋白表达情况。结果与模型组相比,miR-223-3p agomir组血清TBIL[(24.32±3.24)比(62.21±4.52)]、Alb[(34.12±7.32)比(59.21±8.21)]、HA[(136.12±10.25)比(298.56±32.14)]、PCⅢ[(39.52±4.25)比(78.32±14.21)]、Ⅳ-C[(50.25±6.32)比(165.85±12.35)]表达均明显降低(P<0.05),小鼠肝组织损伤得到明显改善,浸润的炎性细胞明显减少,纤维化程度明显减轻。GO、KEGG富集及miRNA-mRNA-KEGG关联分析结果显示,miR-223-3p可在炎症、免疫等的59个生命进程中发挥作用。靶点预测结果显示NLRP3可能为miR-223-3p的反向靶点。与模型组相比,miR-223-3p agomir组小鼠肝组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA表达[(1.24±0.12)比(2.17±0.14)、(1.44±0.11)比(2.65±0.18)、(1.31±0.13)比(1.97±0.21)]及蛋白表达[(0.89±0.05)比(1.93±0.04)、(1.29±0.07)比(2.15±0.09)、(1.50±0.05)比(2.52±0.12)]水平均显著降低(P<0.05)。结论过表达miR-223-3p可抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路的激活,降低机体炎症反应,改善小鼠肝组织损伤,进而发挥其抗肝纤维化作用。

几丁质酶-3样蛋白-1与冠心病患者冠脉病变狭窄程度的相关性分析

目的通过检测几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)的水平,探讨该新型生物标记物与冠心病患者冠脉狭窄程度的关联。方法纳入2015年1月1日-2017年10月1日于解放军总医院心血管内科行冠状动脉造影诊断为冠心病的患者200例,测定所有患者YKL-40的水平,并对所有患者进行Syntax评分及定量冠状动脉造影分析以判断冠脉狭窄严重程度。结果 Syntax评分低分组、中分组、高分组患者YKL-40水平分别为(136.18±14.00) mmol/L、(158.36±12.39) mmol/L、(181.18±12.94) mmol/L;此外,随冠脉狭窄程度增加,YKL-40水平呈升高趋势,YKL-40水平与冠脉狭窄程度呈正相关(r=0.808,P <0.05)。结论冠心病患者YKL-40水平与冠脉病变狭窄程度正相关,YKL-40可作为评估冠脉狭窄程度的生物标记物。

血清几丁质酶-3样蛋白-1和骨桥蛋白与子宫内膜异位症的相关性研究

目的检测血清几丁质酶-3样蛋白-1(YKL40)及骨桥蛋白(OPN)在子宫内膜异位症患者血清中的水平,探讨YKL40及OPN与子宫内膜异位症的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测45例子宫内膜异位症患者(子宫内膜异位症组)及23例对照组患者血清中YKL40及OPN的水平并进行比较。结果手术前,子宫内膜异位症组患者血清YKL40及OPN的检测水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1周复查,子宫内膜异位症组YKL40及OPN水平降低,与手术前比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组与术前比较差异无统计学意义(P>0.05)。术前临床分期Ⅲ、Ⅳ期患者血清YKL40水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);而血清OPN水平Ⅲ、Ⅳ期患者与Ⅰ、Ⅱ期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 YKL40及OPN与子宫内膜异位症的发生、发展及预后密切相关,但二者无明显相关性,可能在子宫内膜异位症的发生发展中是2个独立的事件。

人几丁质酶-3样蛋白-1在人胃癌细胞中的表达及其对人胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响研究

目的 :构建针对人几丁质酶-3样蛋白-1(chitinase-3-like protein-1, CHI3L1)基因的短发卡RNA(short hairpin RNA, shRNA)干扰表达载体,观察CHI3L1基因表达对人胃癌细胞株BGC-823细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:根据人CHI3L1基因序列设计并构建CHI3L1基因的shRNA真核表达载体,通过荧光显微镜观察转染效果。应用逆转录-聚合酶链反应和Western-Blot方法检测BGC-823细胞的CHl3L1 mRNA和CHl3L1基因的表达,通过平板克隆形成实验观察BGC-823细胞的增殖情况,通过Transwell实验观察BGC-823细胞侵袭能力的变化。结果 :建立了稳定表达CHI3L1 shRNA的BGC-823细胞的CHI3L1 mRNA和CHI3L1基因的表达均显著减少,且见CHI3L1 shRNA可显著抑制BGC-823细胞的增殖和侵袭能力。结论 :干扰CHI3L1基因的表达可显著抑制BGC-823细胞的增殖和侵袭能力。

载脂蛋白AⅠ/载脂蛋白B、可溶性糖基化终产物受体和几丁质酶-3样蛋白1与H型高血压患者冠状动脉病变程度的关系

目的 探讨H型高血压患者载脂蛋白AⅠ/载脂蛋白B(ApoAⅠ/ApoB)、可溶性糖基化终产物受体(sRAGE)及几丁质酶-3样蛋白-1(YKL-40)与冠状动脉病变程度的关系。方法 选择2021年6至12月在杭州市余杭区第三人民医院和浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院治疗的原发性高血压患者255例,其中H型高血压患者155例[同型半胱氨酸(Hcy)≥15μmol/L]为观察组,非H型高血压患者100例(Hcy<15μmol/L)为对照组。于清晨空腹采集静脉血后,比较两组一般情况和血清ApoAⅠ/ApoB、sRAGE、YKL-40,血清Hcy含量及Gensini评分,分析H型高血压患者冠状动脉病变程度的影响因素。结果 观察组患者血清Hcy含量高于对照组。观察组研究对象病变支数以双支病变、三支病变居多,冠状动脉狭窄程度以Ⅲ级病变、Ⅳ级病变居多;对照组患者以无病变、单支病变居多,冠状动脉狭窄程度以Ⅱ级病变居多;观察组患者Gensini评分高于对照组(23.65±3.12比10.41±2.09,t=37.359);血清ApoAⅠ/ApoB(1.74±0.17比2.34±0.21,t=25.059)、sRAGE水平[(37.12±3.08)比(51.23±6.81)ng/L,t=22.492]低于对照组,血清YKL-40水平高于对照组[(33.09±2.31)比(15.81±1.82)μg/L,t=63.199],均P<0.001。观察组双支病变和三支病变的患者血清ApoAⅠ/ApoB(1.16±0.29比2.16±0.35,t=19.431)、sRAGE水平[(28.45±5.31)比(46.23±4.62)ng/L,t=22.145]低于无病变或单支病变的患者,血清YKL-40水平高于无病变或单支病变的患者[(39.49±3.64)比(18.66±2.36)μg/L,t=41.839;均P<0.001]。观察组冠状动脉狭窄程度≥50%的患者血清ApoAⅠ/ApoB(1.23±0.26比2.31±0.46,t=18.138)、sRAGE水平[(26.32±4.55)比(44.39±3.54)ng/L,t=27.470]低于狭窄程度<50%的患者,血清YKL-40水平高于狭窄程度<50%的患者[(40.11±6.59)比(20.89±4.99)μg/L,t=20.369],均P<0.001。多因素logistic回归分析结果表明,ApoAⅠ/ApoB(OR=0.498,95%CI 0.438~0.567)、sRAGE(OR=0.684,95%CI 0.620~0.754)、YKL-40(OR=1.141,95%CI 1.043~1.249)和Hcy(OR=1.210,95%CI 1.035~1.416)为H型高血压患者冠状动脉病变程度的影响因素(均P<0.05)。结论 ApoAⅠ/ApoB、sRAGE、YKL-40和Hcy水平与H型高血压患者冠状动脉病变程度密切相关。

瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血清几丁质酶-3样蛋白-1浓度的影响

目的探讨急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者使用瑞舒伐他汀治疗2周后对血清几丁质酶-3样蛋白-1(chitinase 3-like protein 1,YKL-40)浓度的影响。方法选取2011年1月至2012年12月莱州市人民医院收治的ACS患者120例,分为3组,每组40例,均予硝酸酯、拜阿司匹林、β受体阻断药、低分子肝素等常规治疗。A组给予常规治疗,B组在常规治疗基础上予瑞舒伐他汀10 mg/d,C组在常规治疗基础上给予瑞舒伐他汀20 mg/d。所有患者在治疗前、治疗2周后分别测定血脂、血糖和血清YKL-40浓度。结果 A组治疗前、后血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05),而治疗后的血清YKL-40浓度比治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。B组、C组治疗2周后血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇浓度比治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但血清YKL-40浓度的降低幅度更大(P<0.01)。结论瑞舒伐他汀能明显降低血清YKL-40浓度,其效应随剂量的增加而增强。

脑和肌肉ARNT样蛋白1、周期昼夜节律调节因子2、Notch1、糖原合成酶激酶-3β在结直肠腺癌组织中的表达及意义

目的探讨脑和肌肉ARNT样蛋白1(BMAL1)、周期昼夜节律调节因子2(PER2)、Notch1、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在结直肠腺癌组织中的表达及意义。方法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例结直肠癌患者手术切除的新鲜结直肠癌组织及相应癌旁组织中BMAL1、PER2、Notch1、GSK-3βmRNA的相对表达量;免疫组化法检测50例手术切除的结直肠腺癌及癌旁组织、30例经内镜切除的结直肠腺瘤组织中BMAL1、PER2、Notch1、GSK-3β蛋白的表达情况。结果结直肠癌组织中,BMAL1、PER2 mRNA的相对表达量均低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05);结直肠癌组织和癌旁组织中Notch1、GSK-3βmRNA的相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。免疫组化结果显示,结直肠腺癌组织、结直肠腺瘤组织及结直肠腺癌癌旁组织中,BMAL1、PER2的表达呈递增趋势,而Notch1、GSK-3β的表达呈递减趋势。淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期结直肠腺癌患者结直肠腺癌组织中BMAL1、Notch1蛋白表达均高于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者(P﹤0.05);病理类型为黏液腺癌的结直肠腺癌组织中PER2蛋白的表达高于管状腺癌(P﹤0.05),GSK-3β的表达低于管状腺癌(P﹤0.05)。Spearman相关分析结果显示,结直肠癌组织中BMAL1的表达与PER2的表达呈正相关(r=0.332,P=0.018),PER2的表达与GSK-3β的表达呈负相关(r=-0.291,P=0.040),Notch1的表达与GSK-3β的表达呈正相关(r=0.285,P=0.045),其余指标间的表达无相关性。结论BMAL1、Notch信号通路、GSK-3β均可能参与调控结直肠癌的发生、发展过程,且GSK-3β可能与BMAL1和Notch信号通路之间存在相互调控作用。

NLRP3/caspase-1介导的细胞焦亡在动脉粥样硬化发生、发展中的作用

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性炎症性疾病,是全球范围内主要的心血管疾病负担和死亡原因。细胞焦亡是一种新型的促炎调节的细胞死亡,其特征是细胞肿胀破裂和促炎性细胞因子IL-1β和IL-18等的强释放,与其他细胞死亡方式显著不同。NOD样受体3(NOD-like receptors 3,NLRP3)炎性小体激活半胱氨酸天冬氨酸酶-1(cysteine-dependent aspartate-specific proteases,caspase-1)诱导的细胞焦亡与AS的发生、发展以及斑块的稳定性密切相关。本文主要阐述NLRP3/caspase-1介导的细胞焦亡在AS进程中的作用,以及在AS发展中靶向细胞焦亡的潜在治疗策略,旨在更好地理解细胞焦亡触发AS发生的机制,以期为防治AS提供新靶点和新策略。