凤丹皮HPLC指纹图谱研究

目的建立安徽凤丹皮HPLC指纹图谱,为凤丹皮的质量控制提供依据。方法采用HPLC法,以甲醇∶乙腈（1∶1）-0.5‰甲酸水为流动相进行梯度洗脱,在265 nm波长下,以丹皮酚为参照物,建立10批丹皮的指纹图谱。结果凤丹皮有10个共有峰。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）版》,计算各被测样品的HPLC指纹图谱的整体相似度,10批被测样品的色谱指纹图谱的整体相似度在0.914-0.991,并得出了凤丹皮的对照指纹图谱。结论该指纹图谱方法简便、重现性好,可专属性地研究丹皮的指纹图谱,为有效地控制凤丹皮的内在质量提供了科学依据。

不同采收期凤丹皮中3种药效成分动态变化研究

目的通过研究不同采收期安徽南陵凤丹皮3种药效成分的动态变化,确立凤丹皮的最佳采收期,为牡丹皮GAP生产提供依据。方法采用高效液相色谱法,以甲醇-乙腈(1:1)-0.5‰甲酸为流动相进行梯度洗脱,在265nm波长处,同时测定不同生长发育期凤丹皮中没食子酸、丹皮酚、芍药苷3种化学成分的含量。结果凤丹皮中3种药效成分的含量不同时期存在差异,但均以9月份为最高。结论9月份为安徽凤丹皮的最佳采收时期;该法简便、精密度高、重复性好,为有效地控制牡丹皮的内在质量提供了科学依据。

趁鲜加工对凤丹皮的适用性研究

目的:比较凤丹皮趁鲜切制与晒干后软化切制两种加工方法制得的饮片中芍药苷和丹皮酚的含量,探讨牡丹皮的最佳加工方法。方法:收集亳州栽培的凤丹皮根系,将根系中粗细相等的根一部分趁鲜切制,一部分晒干后软化切制。采用HPLC同时测定两种饮片中芍药苷和丹皮酚的含量。结果:趁鲜切制饮片中芍药苷的含量高于晒干后软化切制的饮片,而晒干后软化切制的饮片中丹皮酚的含量高于趁鲜切制的饮片。结论:丹皮采用趁鲜切制的加工方法较为适宜。

凤丹皮水溶性成分的特征图谱研究

目的研究凤丹皮水溶性成分的特征图谱,为控制凤丹皮的质量提供依据。方法采用HPLC法,以乙腈—0.05 mol.L-1磷酸二氢钾为流动相进行梯度洗脱,在230 nm下,以丹皮酚、芍药苷、没食子酸为参照物,对凤丹皮水溶性成分的特征图谱进行分析。结果凤丹皮有12个共有峰,特征图谱的整体相似度均在0.687～0.864。结论获得的凤丹皮水溶性成分特征图谱具有良好的重现性,其特征性、专属性强,相似度高,可为控制凤丹皮的质量提供依据。

PCR微流控芯片的制备及其在凤丹皮DNA指纹图谱研究中的初步应用

采用商品化的毛细管柱直接制备了PCR微流控芯片,与常规方法比较该方法制备的芯片成本低廉价格便宜,可在普通实验室制作,将该方法制备的PCR微流控芯片和微流控-热电极系统联用,对凤丹皮的扩增产物进行了初步研究。

凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分含量的经时变化特征分析

目的:分析凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分含量的经时变化特征,丰富凤丹皮品质评价的科学内涵。方法:通过对凤丹根次生木质部的生长轮显微鉴定,获取不同生长年限的凤丹皮。采用HPLC法测定凤丹皮中丹皮酚类和芍药苷类成分的含量,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长选择258、230、270 nm。结果:建立并验证了同时测定凤丹皮中丹皮酚、丹皮酚新苷、丹皮酚原苷、芍药苷、氧化芍药苷和苯甲酰芍药苷含量的HPLC法,上述6种成分在其定量范围内线性关系良好(r>0.9990),平均加样回收率98.62%~101.89%,RSD均<4.0%。丹皮酚类(除丹皮酚新苷)及芍药苷类成分质量分数呈逐年下降的趋势;丹皮酚类成分相对含量随生长年限逐步增加,至第4年趋于稳定;5年生凤丹皮中丹皮酚类成分含量是芍药苷类成分的2.09倍。结论:丹皮酚新苷是多年生凤丹皮中丹皮酚类成分的主要存在形式。丹皮酚新苷的质量分数、丹皮酚类与芍药苷类成分的相对质量分数可作为多年生凤丹皮品质的评价指标。

凤丹皮总苷高效液相色谱特征指纹图谱研究

目的建立凤丹皮总苷的指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠依据。方法采用Agilent TC-C_(18)(2)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈(A)-0.05%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长230nm,进样容积20μL。结果建立了凤丹皮总苷高效液相色谱特征指纹图谱的共有模式,指定18个共有峰,统计结果显示,11批凤丹皮总苷样品高效液相色谱特征指纹图谱相似度均大于0.80。结论建立的特征指纹图谱方法快速、准确、简便,可用于凤丹皮总苷的质量控制。

正交试验-多指标归一化法优化凤丹皮水提工艺

目的:优化凤丹皮水提工艺。方法:采用L_9(3~4)正交试验设计,以凤丹皮中8个成分没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚的峰面积百分比和浸膏率经归一化法后的综合评分为考察指标,对凤丹皮水提工艺的药材浸泡时间、料液比、提取时间、提取次数进行优化,并进行验证试验。结果:最优水提工艺为加20倍水,浸泡药材1 h,提取2次、每次2 h。验证试验结果中,3次试验的综合评分分别为65.98、68.85、69.25,各指标的RSD均小于5%(n=3)。结论:建立的综合评分方法能较全面地反映凤丹皮的相对有效成分含量,以此优化得到的提取工艺合理、可行。

一株凤丹皮内生真菌Fusarium acutatum的次生代谢产物研究

目的研究来源于凤丹皮中分离得到的一株内生菌Fusarium acutatum的次生代谢产物。方法应用硅胶、Sephadex LH-20、开放ODS结合半制备高效液相色谱分离技术进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定结构。结果从固体发酵产物中分离得到15个化合物,分别鉴定为neosartorin(1),cyclonerodiol(2),enniatin H(3),(3R,6R)-4-甲基-6-(1-甲基乙基)-3-苯甲基全氢-1,4-噁嗪-2,5-二酮(4),赤霉菌吡喃酮D(5),赤霉菌吡喃酮F(6),麦角甾醇(7),过氧化麦角甾(8),麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(9),(7E,9E)-6,11-dioxononadeca-7,9-dienoic acid(10),5-羟甲基-2-呋喃甲醛(11),α-D-吡喃葡萄糖基-(1→1′)-3′-氨基-3′-去氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(12),α-D-alloypyranose(13),豆甾醇(14),β-谷甾醇(15)。结论化合物1~15为首次从该内生菌中分离得到。

多指标正交试验优选凤丹皮醇提工艺

目的优选凤丹皮最佳乙醇回流提取工艺。方法采用L9(34)正交试验设计,选择乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,以凤丹皮中6个活性成分(氧化芍药苷、儿茶素、芍药苷、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚)的含量及浸膏率作为指标,进行综合评分。结果凤丹皮的最佳乙醇回流提取工艺为10倍量90%的乙醇,每次提取60 min,提取2次。结论采用多指标综合评分法考察凤丹皮乙醇回流提取工艺,指标全面,方法客观,对于规范凤丹皮的提取工艺具有一定的意义。

铜陵不同土壤生长的凤丹皮中丹皮酚和芍药苷含量比较

目的：用高效液相色谱法测定铜陵不同土壤生长的同年生凤丹皮中丹皮酚和芍药苷的含量，并比较其质量差异。方法：采用WatersVP—ODS—C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm）；丹皮酚含量测定流动相：甲醇-水（60：40），检测波长：274nm，柱温：30℃，流速1．0mL·min-1；芍药苷含量测定流动相：乙腈-0．1％H3PO4（20：80），检测波长：230nm，柱温：30℃，流速：1．0mL·min-1。结果：丹皮酚在1．073—5．365μg，芍药苷在0．593—2．965Ixg均呈良好线性关系，r分别为0．9999，0．9991，丹皮酚平均回收率为99．96％（RSD=0．72％），芍药苷平均回收率为99．03％（RSD=0．49％）。结论：选定的3种土壤生长的凤丹皮的丹皮酚和芍药苷含量均是金沙土〉稻田土〉马钢土。

安徽凤丹皮的质量研究

本文测定了凤丹皮不同等级、贮藏期、生长年限牡丹酚的含量及不同生长发育阶段牡丹酚含量与产量的关系。同时测定了氨基酸、微量元素、水份和灰分的含量。

安徽道地药材“凤丹皮”的采收与加工

目的探讨安徽凤丹皮的适宜采收时期,以及加工方法。方法:根据文献中对丹皮有效成分的研究。结果每年的4-5月或9月采收栽培3-5年的牡丹根皮。讨论:对丹皮的活性有效成分以及加工工艺还需进一步系统研究。

凤丹皮的特征及栽培加工

丹皮为毛茛科植物牡丹的干燥根皮,有凤丹皮、连丹皮、骨丹皮等商品规格,栽培或野生。野生品不分规格统称“川丹皮”。安徽、湖南、四川等地是丹皮的主要产区。凤丹皮产于安徽铜陵县顺安乡牡丹村、凤凰村及南陵县丫山部份地区即凤凰山境内,早在明末崇桢年间即有种植,被誉为安徽四大名药之一。凤丹皮不同于其它丹皮之处是:条干园直粗长、外皮光滑细腻,深褐色或赭色,有纵皱纹理。

凤丹皮的质量标准研究

目的建立凤丹皮的定性、定量分析方法。方法对凤丹皮进行TLC定性鉴别,并分别测定10批凤丹皮的水分、灰分、浸出物及丹皮酚的含量。结果凤丹皮在薄层色谱中,与牡丹皮对照药材、丹皮酚对照品以及没食子酸对照品,在相应的位置上,显示相同颜色的斑点。凤丹皮的水分结果在10.9%-11.6%之间浮动,总灰分在4.0%-4.7%之间浮动,酸不溶性灰分在0.38%-0.70%之间浮动,醇溶性浸出物在24.8%-29.4%之间浮动,HPLC法测定丹皮酚的含量分析中,在0.04232-0.4232μg/ml的范围内,浓度与峰面积之间呈现良好线性关系,r=0.9999,平均回收率为104.58%。结论该实验方法简便、准确、可靠、重现性好,可为凤丹皮药材质量标准的制定提供科学依据。

凤丹丹皮酚抗菌作用的研究

用钢管法、滤纸法、挖孔法对凤丹丹皮酚的抗菌作用进行了研究 ,结果表明 :凤丹丹皮酚对黄色八叠球菌、福氏痢疾杆菌、枯草芽孢菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等五种供试细菌均有较强的抑制作用 ,尤其是黄色八叠球菌最为敏感 ;三种方法中挖孔法效果最佳。

同株凤丹皮的不同部位中丹皮酚和芍药苷的含量比较

目的：采用高效液相色谱法,比较同地同株凤丹皮中不同部位的丹皮酚和芍药苷含量差异.方法：采用WatersVP-ODS-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;丹皮酚含量测定流动相甲醇-水（55∶45）,检测波长274 nm,柱温35℃,流速1.0mL·min-1;芍药苷含量测定流动相乙腈-0.1％H3PO4（20∶ 80）,检测波长230 nm,柱温35℃,流速1.0 mL· min-1.结果：丹皮酚在1.073 ～5.365 μg,芍药苷在0.593 ～2.965μg均呈良好线性关系,相关系数分别为0.999 9,0.999 1,平均回收率丹皮酚为99.96％（RSD 0.72％）,芍药苷为99.03％（RSD 0.49％）.结论：在选定的同株凤丹皮最细部位的丹皮酚和芍药苷含量均高于最粗部位及中等部位.

正交试验优化凤丹皮中单萜苷的煎煮工艺

目的:优化凤丹皮中单萜苷的煎煮工艺。方法:以氧化芍药苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷和浸膏得率为评价指标,采用正交试验设计对凤丹皮中单萜苷的煎煮工艺进行优化。结果:最佳煎煮工艺条件为加15倍量的水,浸泡10 min,煎煮3次,每次15 min。结论:此优化的煎煮工艺稳定,合理。

趁鲜切制法对牡丹皮饮片中芍药苷含量的影响研究

目的考察趁鲜切制法对牡丹皮质量的影响。方法采用高效液相色谱法,测定不同加工方法样品中芍药苷的含量。结果可采取采收4年生凤丹皮药材净制、趁鲜切片、晒干的方法加工牡丹皮饮片。结论该研究为牡丹皮饮片的产地趁鲜切制提供了科学依据。