铅锌胁迫对凹叶厚朴幼苗生理特性的影响

【目的】探究凹叶厚朴对铅锌胁迫的耐受性及生理机制,为将凹叶厚朴作为铅锌污染地区生态修复植物提供可行性依据。【方法】设置不同浓度的铅、锌单一及复合3种胁迫方式处理,分析比较其对铅锌胁迫的光合及生理响应特征。【结果】在Pb^(2+)质量分数高于200 mg·kg^(-1)、Zn^(2+)质量分数高于400 mg·kg^(-1)、Pb^(2+)-Zn^(2+)复合质量分数高于(200+200)mg·kg^(-1)时,凹叶厚朴叶片光合色素合成受到抑制,净光合速率、气孔导度、蒸腾速率逐渐下降;单一铅和铅锌复合胁迫下,叶片净光合速率下降的同时都伴随着气孔导度的下降和胞间CO_(2)浓度的上升,表明非气孔因素是导致凹叶厚朴叶片光合作用下降的主要因素。当Pb^(2+)质量分数低于600 mg·kg^(-1)时,过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性逐渐增加;当Zn^(2+)质量分数低于600 mg·kg^(-1)时,抗氧化酶活性均不断上升;当Pb^(2+)-Zn^(2+)复合质量分数低于(300+300)mg·kg^(-1)时,超氧化物歧化酶(SOD)和CAT活性逐渐上升。3种胁迫方式处理下的丙二醛(MDA)含量均随胁迫质量分数增加不断上升,且显著高于对照。随着Pb^(2+)胁迫质量分数的增加,叶片可溶性糖、可溶性蛋白呈上升趋势,而游离脯氨酸含量在Pb^(2+)质量分数高于600 mg·kg^(-1)时是降低的,但降低幅度小;Zn^(2+)及Pb^(2+)-Zn^(2+)复合胁迫下,可溶性糖和游离脯氨酸含量随胁迫质量分数增大而增加,而可溶性蛋白含量在Zn^(2+)质量分数低于600 mg·kg^(-1),复合质量分数低于(300+300)mg·kg^(-1)时逐渐增大。【结论】在Pb^(2+)、Zn^(2+)质量分数小于600 mg·kg^(-1),Pb^(2+)-Zn^(2+)复合质量分数小于(300+300)mg·kg^(-1)时,凹叶厚朴幼苗可以通过提高抗氧化酶活性及可溶性糖和脯氨酸含量等生理生化过程来应对铅锌胁迫,在高质量分数铅、锌胁迫下植株仍能生长,表明凹叶厚朴幼苗对铅、锌具有较强的耐受性。

凹叶厚朴与厚朴的挥发油成分和体外抑菌活性比较分析

试验旨在对比研究凹叶厚朴与厚朴挥发油的化学组成及抑菌活性。挥发油通过水蒸气蒸馏法提取,采用气相色谱-质谱(GC-MS)对凹叶厚朴与厚朴挥发油成分进行分析和鉴定,运用峰面积归一化法确定各成分的含量,使用比浊法研究凹叶厚朴与厚朴挥发油对金黄色葡萄球菌的体外抑制作用。GC-MS结果显示,两种挥发油中芳樟醇、α-松油醇、α-桉叶醇、β-桉叶醇等12种共有成分在凹叶厚朴中的含量大于厚朴,合计占各自挥发油含量的58.25%、46.02%。抑菌试验结果表明,凹叶厚朴与厚朴挥发油对10种金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,其中凹叶厚朴对ATCC25923等8种菌的抑菌效果显著优于厚朴。研究表明,试验结果可为中草药添加剂的开发应用及抑菌剂的研发提供一定参考。

铅锌胁迫对凹叶厚朴幼苗生长及铅锌积累的影响

以凹叶厚朴盆栽幼苗为试验对象,设计Pb、Zn单一胁迫200 mg/kg(P1、Z1)、400 mg/kg(P2、Z2)、600mg/kg (P3、Z3)、800 mg/kg (P4、Z4)及复合胁迫(100+100) mg/kg (M1)、(200+200) mg/kg(M2)、(300+300) mg/kg (M3)、(400+400) mg/kg (M4),以不加Pb、Zn处理为对照(CK),共13个处理,研究处理90 d后凹叶厚朴的生长、生理及铅锌累积变化特征。结果表明:P1、P2、M2处理可使凹叶厚朴幼苗地径增粗,地上及地下部分干质量增加;P4、Z4处理下叶片光合色素含量降至最低,复合胁迫下叶片光合色素含量均低于CK;各胁迫处理下,凹叶厚朴叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性以及可溶性糖、可溶性蛋白及游离脯氨酸含量均高于CK;在3种胁迫方式下,凹叶厚朴叶片丙二醛含量随着胁迫浓度增加均处于上升趋势,P4、Z4、M4的丙二醛含量分别较对照增加了41.36%、17.28%、35.80%,植株受损害程度逐渐加深;随着胁迫浓度的增加,植株的地上部分与根部Pb、Zn含量均逐渐增加,Pb、Zn转移系数呈降低趋势,Pb、Zn主要积累在根部。综合各指标的分析结果,凹叶厚朴对Pb、Zn胁迫有较强的耐受性,具有修复Pb、Zn污染土壤的应用潜力。

凹叶厚朴优良种源人工林改建母树林及优树选择初报

以单株材积、树高和胸径为数量评价指标,综合树干通直度、圆满度、冠幅、树皮厚、枝条数、结实量作为形质评价指标,在凹叶厚朴优良种源基础上选择优良林分,依据母树林的营建技术标准开展优良木评价和去劣留优等经营措施,共评选出67个优良木,从优良木中精选出10个优树,其平均单株材积、树高、胸径、冠幅分别为0.110 6 m^(3)、8.6 m、18.2 cm、4.5 m,比林分均值分别提高了176.1%、18.6%、64.1%、35.5%。

凹叶厚朴中生物碱成分的研究

目的研究凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehderet Wils中的生物碱化学成分。方法离子交换树脂法提取总碱,硅胶柱层析法分离纯化,波谱法鉴定结构。结果从中分得9个异喹啉生物碱。分别为N-降荷叶碱(1)、lirinidine(2)、罗默碱(3)、番荔枝碱(4)、lysicamine(5)、鹅掌楸碱(6)、瑞枯灵(7)、isosalsoline(8)、N-methylisosalsoline(9)。结论生物碱2、3、5、8、9为首次从该植物中分离得到,应用光谱法鉴定了所有化合物的结构。

濒危植物凹叶厚朴幼苗更新及环境解释

凹叶厚朴为我国二级保护野生植物,由于其较高的药用价值,野生资源遭到无节制的盗砍,造成种群数的衰退和群落残败。调查浙江省遂昌县桂洋林场不同群落野生凹叶厚朴的更新状况,结果表明:凹叶厚朴种群大小级为不典型的"J"型,种群在较长的时间内保持稳定状态;凹叶厚朴以萌生更新为主,随着群落郁闭度的增加,萌生苗的比例增高,但不同群落平均萌枝数量、平均胸径及株高无显著差异。实生苗随着郁闭度的增加植株呈现变矮、变细的趋势;凹叶厚朴实生和萌生苗在不同群落中年龄结构差异均极大,针阔叶混交林中更新良好,针叶林大量高龄幼苗生长缓慢,且植株不易进入上层空间,常绿阔叶林中存在严重的更新不良现象;各群落中,更新幼苗株高和胸径增长量均随郁闭度的增加呈现极显著下降的趋势,其中实生苗的下降趋势更为明显;影响实生更新的主要环境因子为草本层盖度和厚度、枯落物盖度、腐殖质厚度及土壤含水率;影响种群萌生更新的主要环境因子为群落的光照及温湿度。因此,降低上层林冠密度,减少草本层、枯落物等的覆盖对于维持种群的发展、缓解其濒危状况具有重要的意义。

凹叶厚朴中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的成分

凹叶厚朴是四川省人工栽种的一种用途广泛的常用中药.在发现凹叶厚朴乙醇提取物具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性基础上,通过活性跟踪,对该提取物进行了分离,发现其中的生物碱显示了较强的抑制活性.通过溶剂萃取、树脂吸附和反复硅胶柱层析等分离方法从凹叶厚朴乙醇提取物中分离得到6个生物碱,用质谱和核磁共振等波谱方法分别鉴定为木兰箭毒碱,木兰花碱,鹅掌楸碱,蕃荔枝碱,罗默碱和Lysicamine,并应用小肠α-葡萄糖苷酶模型测定了它们对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.其中,番荔枝碱和木兰箭毒碱的抑制活性较好,分别为60%和62%;其它4个生物碱成分活性几乎相当,鹅掌楸碱为46%,罗默碱为51%,Lysicamine为49%,木兰花碱为51%.

凹叶厚朴超临界二氧化碳萃取物成分分析

本文对凹叶厚朴超临界二氧化碳萃取物进行了GC-MS分析,检出和厚朴酚、厚朴酚、异厚朴酚、按叶醇等15种成分,其中十六酸、9,8-十八碳二烯酸为首次从该药物中检出。

凹叶厚朴树体厚朴酚、和厚朴酚含量变化模型的研究

为了研究凹叶厚朴树厚朴酚、和厚朴酚的积累分布规律,以10年生凹叶厚朴为试验材料,建立了凹叶厚朴树体解析木高度与厚朴酚、和厚朴酚及树皮厚度含量的数学模型。结果表明:解析木高度与总酚含量、厚朴酚含量、和厚朴酚含量关系最优模型依次为y=─0.053 636x3+0.665 503x2─2.543 869x+3.964 848,y=─0.008939x3+0.110 233x2─0.419 464x+0.693 864,y=─0.044 697x3+0.555 271x2─2.124 405x+3.270 985;树体解析木高度与树皮厚度关系最优模型为y=─0.008 965x3+0.031 331x2─0.143 492x+4.941 212,可用于凹叶厚朴树体厚朴酚、和厚朴酚含量的预测,为科学采收厚朴皮提供了理论依据。

凹叶厚朴优良无性系的嫁接技术研究

以凹叶厚朴为研究材料,研究了嫁接方法、嫁接时间、砧木及接穗粗度、砧木不同处理对凹叶厚朴嫁接成活率及生长的影响。结果表明：凹叶厚朴嫁接适宜的方法是三刀切接法;3月中、下旬嫁接,其成活率及生长量比其它时间嫁接的要高,最高成活率和生长量分别为92%、35.5cm;适宜砧木和接穗粗度均为0.8~1.0cm时,嫁接成活率可达92.6%~94.0%;在地栽砧木上直接嫁接,与将砧木挖出后嫁接,再移栽到营养钵中,两者的嫁接成活率没有明显差异,但生长量差异显著,前者高于后者62.7%。

凹叶厚朴大、小孢子发生和雌、雄配子体发育的研究

凹叶厚朴花药四囊型,腺质绒毡层有1-2层细胞,小孢子形成时胞质分裂方式为修饰性同时型．小孢子四分体排列方式为左右对称型,成熟花粉粒为二细胞型。四分体和小孢子在发生时有不规则变形。子房单心皮。心皮腹面壁上着生2个胚珠,胚珠倒生型,厚珠心,双珠被;抱原细胞一个,并且自表皮下第2层细胞处分化。胚囊发育为单孢蓼型。凹叶厚朴的胚胎学特征与木兰科其它植物的胚胎学特征基本相同,属于较原始的被子植物胚胎类型。在凹叶厚朴大、小孢子发生和雌、雄配子体发育过程中存在部分败育现象。本文初步探讨了凹叶厚朴濒危的生殖生物学原因。

凹叶厚朴扦插繁殖的生根机理研究

为了探索凹叶厚朴扦插生根的方法及其生根机理,促进凹叶厚朴优良无性系的快速推广栽培。以半木质化枝条为插条,依据单因素试验结果,设计L9(34)正交试验,优化扦插生根配方;定期采集插条下段,测定其韧皮部内的营养物质的含量及氧化酶的活性变化;定期采集插穗下部制作石蜡切片,观察生根部位及发生过程。凹叶厚朴的最佳扦插生根配方为:以泥炭土:珍珠岩:黄沙(1:1:1)为基质,用KIB A1000mg/L浸泡30min,生根率可达94.4%;生根过程中,用KIBA浸泡的插条与对照相比,其内的营养物质含量及PPO及POD活性的变化规律相同,但试验组各项峰值到达的时间比要对照早10天,对应的生根时间也早10天;PPO及POD活性最高值达到时间与生根时间相符;凹叶厚朴的不定根产生有潜伏型根原基和诱导型根原基两种类型,潜伏型根原基存在于幼茎的皮层外方,诱导型根原基存在于皮层叶隙维管束的外方,不定根的形成主要以诱导型根原基为主。

不同树龄凹叶厚朴7种次生代谢产物积累研究

目的:建立研究同一地域来源、不同树龄的凹叶厚朴7种次生代谢产物质量分数变化,为确定凹叶厚朴最佳采收条件提供参考依据.方法:利用高效液相色谱法(HPLC)对绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、和厚朴酚与厚朴酚进行分离,并建立标准曲线及回归方程.分析随着树龄的增加,其叶、枝皮、茎皮和根皮中7种次生代谢产物质量分数积累情况.结论:不同树龄的凹叶厚朴叶片、枝皮、茎皮和根皮中7种代谢产物质量分数随着树龄积累差异较大,绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素等主要存在于在树龄相对较小的叶片和枝皮中,随着树龄从7年增加至26年其积累变化不明显;厚朴酚与和厚朴酚主要分布于凹叶厚朴的树皮中,其中根皮质量分数最高,茎皮、枝皮次之;7至13年树龄的植株,其厚朴酚与和厚朴酚积累量随树龄增加而明显增加,13至26年树龄的植株随树龄增加二者积累量增幅不大.因此,凹叶厚朴的最适采收对象是树龄超过13年之后的植株.

湖南道县产凹叶厚朴发汗前后挥发油成分及含量变化的研究

目的研究发汗对湖南道县产厚朴中挥发油的影响,为湖南道县厚朴质量评价体系提供参考。方法采用GC-MS对挥发油进行成分分析。结果发汗不仅能提高厚朴中的挥发油的含量,而且在成分组成和成分含量上与未经过发汗处理的厚朴存在差异。结论若以挥发油含量为考核指标,建议厚朴的产地加工坚持发汗处理。

凹叶厚朴离体胚培养的研究

为了满足市场的资源需求,建立优质凹叶厚朴离体再生体系,为凹叶厚朴工厂化生产提供理论依据,以优质凹叶厚朴离体胚为外植体,以B5为基本培养基,6-BA、NAA、消毒时间为因素,采用L9(33)正交设计,进行无菌苗培养优化试验。结果表明:最佳消毒方法为0.1%升汞浸泡8 min,污染率为12.6%,外植体生长良好;最佳组合为B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+消毒时间8 min,发芽率高达87%。

凹叶厚朴细弱枝与粗壮枝导管分子的比较研究

对凹叶厚朴粗壮枝和细弱枝的次生木质部进行离析研究,发现其导管穿孔板有两种类型,即单穿孔板和梯状穿孔板。在细弱枝中,具不同类型穿孔板的导管分子有八种类型,即一端为单穿孔板的导管分子,另一端为梯状穿孔板的导管分子;只有一端为单穿孔板的导管分子;只有一端为梯状穿孔板的导管分子;两端均为单穿孔板的导管分子;两端均为梯状穿孔板的导管分子;具三个单穿孔板的导管分子;两端具单穿孔板的导管分子,中间具多个梯状穿孔板的导管分子;具多个梯状穿孔板的导管分子。粗壮枝除了无具多个梯状穿孔板的导管分子外,其它细弱枝的导管分子的类型都具有。细弱枝的导管分子宽而长,粗壮枝导管分子窄而短。

凹叶厚朴不同溶剂提取物对几种植物病原菌的抑制活性

以不同的溶剂和提取方法分别对凹叶厚朴皮和茎进行提取,并对所得提取物进行了5种病原真菌的生长抑制活性测试。结果表明:在供试质量浓度为1 mg/ml的情况下,当采用相同的提取方法和提取溶剂时,凹叶厚朴皮的提取物对所有供试病菌抑菌效果比茎的提取物好;当采用相同的植物部位提取物和提取溶剂时,超声波提取物对所有供试病菌抑菌效果比浸提提取物效果好;而当提取方法和提取部位都一定而改变提取溶剂时,以95%乙醇提取物对所有供试病菌抑菌效果最好,石油醚提取物抑菌活性次之,而10%氢氧化钙提取物、水提取物对所有供试病菌抑制率均比较低。凹叶厚朴皮的提取物作为植物源杀菌剂值得进一步研究。

凹叶厚朴离体培养初探

为了建立优质凹叶厚朴的离体快繁再生体系,分别对凹叶厚朴茎段外植体的消毒条件、腋芽诱导培养两个方面进行了初步研究,结果表明:最佳消毒条件为70%C2H5OH处理60 s,HgCl2处理12 min;最佳腋芽诱导配方为B5+NAA 0.05 mg.L-1+6-BA 1.0 mg.L-1,腋芽诱导率可达55%。

施肥、修剪等措施对凹叶厚朴中厚朴酚、和厚朴酚含量累积的影响

目的:提高凹叶厚朴的品质,缩短生产周期,为凹叶厚朴种植提供科学参考依据。方法:本次实验通过采用施肥、修枝、环割、铁丝环扎对凹叶厚朴进行处理,采用HPLC测定两年后厚朴中厚朴酚、和厚朴酚的含量,计算总酚含量增长率。结果:凹叶厚朴中总酚含量累积增长(Y)与肥料中的氮肥、磷肥正相关,与钾肥负相关,回归方程为:Y=1.804+2.470N+2.746P-15.616K(r=0.982)。修枝处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增长了310%,环割处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了125.65%,铁丝环扎处理的凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了343.2%,而同期的空白组中凹叶厚朴中总酚的含量较前期增加了84.62%。实验结果显示不同栽培措施的效果由大到小的顺序是:铁丝环扎>修枝>环割。结论:凹叶厚朴中厚朴酚、和厚朴酚含量的积累可以通过改变土壤的肥力、环割、修枝等栽培措施得以提高。