水平井地质导向出层问题判断方法研究

水平井地质导向在入靶后的最大难点就是可能遇到出层问题无法判断是出层原因和出层位置.面对这一问题,确定地层倾角和垂向钻进深度以及随钻曲线特征是做好出层问题判断的主要依据.阐述了运用这些数据判断钻头相对目的层的位置,以确定顶出或者底出.通过这些方法可以快速解决地质导向过程中遇到的出层问题,减少在出层后无法做出正确判断而损失的水平段长度.可以达到提高水平井砂岩钻遇率和含油钻遇率的目的.

外源氨基酸对层出镰刀菌菌丝生长和伏马毒素合成的影响

由层出镰刀菌引起的水稻穗腐病,不仅造成水稻产量损失,而且因产生真菌毒素而导致稻米品质下降。本研究通过在生长培养基中添加外源氨基酸,评价其对层出镰刀菌菌丝生长和伏马毒素合成的影响。结果表明,不同氨基酸和不同添加量对菌丝生长均有影响。与未添加氨基酸的对照相比,在MM培养基上添加L-精氨酸、L-谷氨酸、L-脯氨酸和L-瓜氨酸,在PDA培养基上添加L-谷氨酸,均抑制菌丝生长。添加氨基酸显著提高了伏马毒素含量,且随着氨基酸浓度升高,在PDA中产毒量减少,在MM中则呈增加趋势。外源氨基酸明显改变了伏马毒素生物合成基因在转录水平上的表达,但基因表达模式与毒素含量并不一致。综合分析表明,外源氨基酸会影响层出镰刀菌菌丝生长和伏马毒素含量,且不同氨基酸组分与菌丝生长和伏马毒素合成的关联性不同。

十五种药用植物水提物对层出镰刀菌的抑制活性

开展植物提取物对层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)的抑制活性研究,为其防治奠定理论基础,采用菌丝生长速率法测定药用植物水提物对层出镰刀菌的抑制及毒力作用。结果表明:黄连等15种药用植物提取物对层出镰刀菌菌丝生长有一定的抑制作用,当药用植物水提物浓度为20 mg干样/mL时,其抑菌率为0.24%~77.17%,其中以黄连的抑制效果最佳,黄连水提物对层出镰刀菌的毒力回归方程的EC50值为1.0630 mg干样/mL。黄连水提物在防治层出镰刀菌方面具有的良好应用潜力。

7种生物药剂对铁皮石斛层出镰刀菌的生物活性及其协同作用

为明确7种生物药剂对铁皮石斛层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)的生物活性及其协同作用,为田间绿色高效防控铁皮石斛软腐病提供参考,采用菌丝生长速率法测定了7种生物药剂对铁皮石斛层出镰刀菌的室内毒力及其协同作用,并通过盆栽试验和田间试验验证防效。结果表明,7种生物药剂对铁皮石斛层出镰刀菌菌丝生长均具不同的抑制作用,其中丁子香酚、蛇床子素、四霉素、申嗪霉素的抑菌效果较好,EC_(50)值分别为0.38、4.92、0.32、1.85μg/mL。协同作用结果显示,不同药剂组合对铁皮石斛层出镰刀菌菌丝生长的抑制作用有一定差异,其中丁子香酚+申嗪霉素和四霉素+申嗪霉素分别以有效质量比为1∶3和9∶1时增效作用明显,其共毒系数(CTC)分别为195.65和145.76,EC_(50)值分别为1.35μg/mL和1.13μg/mL;而丁子香酚+蛇床子素、蛇床子素+申嗪霉素、蛇床子素+四霉素3个组合分别以有效质量比为9∶1、1∶1、9∶1时增效显著,其CTC分别为325.38、236.46、541.53,EC_(50)值分别为2.86、1.23、0.75μg/mL;且盆栽试验和田间试验表明,丁子香酚+蛇床子素、蛇床子素+申嗪霉素和蛇床子素+四霉素3个组合分别以有效质量比为9∶1、1∶1和9∶1时对铁皮石斛软腐病均具有较好的防治效果。可见,7种生物药剂及其组合对铁皮石斛软腐病均具有一定的防治效果,可用于田间铁皮石斛软腐病的防治。

引起板栗内腐病的层出镰孢菌生物学特性研究

本试验主要对引起板栗内腐病的层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)进行生物学特性的研究,研究了不同培养基、碳源、氮源、pH、温度及光照条件对层出镰孢菌菌丝生长的影响,了解其生物学特性,为进一步研究板栗内腐病防控技术奠定基础。结果表明:培养病原菌至第6 d时,板栗栗仁培养基最适宜其菌丝的生长;最适合菌丝生长的碳源是木糖醇,氮源以硝酸钾为最佳;pH为8时最利于菌丝生长;最适宜菌丝生长的温度为25℃;在全光照的条件下可以促进菌丝生长。

列当生防菌层出镰刀菌Br-1发酵条件的优化及田间防治效果

列当是根寄生杂草,很难防除。菌株Br-1是从感病列当中分离出的对列当有较高防治效果的层出镰刀菌。为了提高菌株Br-1的产孢量,本研究通过单因素试验和正交设计试验对其培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,菌株Br-1适宜的发酵培养基为葡萄糖1%,NH4NO_3 0.2%,KH_2PO_4 0.3%,Mg SO4·7H_2O0.1%;优化后的培养条件为:最初pH 5.0,培养温度24℃,装液量20%,振荡速度190 r/min,发酵时间6 d。较优化前的初始培养基和培养条件产孢量提高了257.5倍。在田间防治试验中菌株Br-1对弯管列当的防治效果最高可达67.2%。

层出镰孢高效杀菌剂筛选及田间防效

玉米鞘腐病是玉米上的一种重要鞘部病害,其病原主要为层出镰孢。为筛选该病的有效防治药剂,本研究选取9种杀菌剂进行了室内毒力测定,并对效果较好的药剂进行了田间防治试验。结果表明:苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯、苯甲·嘧菌酯、咪鲜胺、硅唑·咪鲜胺对层出镰孢均有一定的抑制效果,其中苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯、咪鲜胺和硅唑·咪鲜胺对层出镰孢具有较好的防治效果,其EC50值分别为2.16,1.59,0.01,0.01mg/L;对孢子萌发的抑制率分别为6.57%,9.09%,59.09%,58.08%;田间防效分别达55.72%,62.54%,52.32%和45.51%,挽回玉米产量损失率分别为2.61%,0.39%,8.45%,10.15%。综合上述结果可知,上述4种杀菌剂对玉米鞘腐病防效显著,可作为防治该病的备选药剂。

茄子层出镰孢菌花腐病病原鉴定及其生物学特性研究

2016年7月在辽宁省北镇市的茄子大棚内发现了一种茄子花腐病,该病害发病初期表现为花瓣上产生水渍状病斑,病斑逐渐扩大,变褐,进而侵染茄子幼果。湿度较大时,发病的花瓣和幼果均产生白色霉层,果实干瘪。为了鉴定自茄子花腐病斑上首次分离出的疑似镰孢菌Fp01,利用柯赫氏法则验证了其致病性,并且对菌落的形态、色素颜色、菌落生长速率、分生孢子的形态进行观察,初步将病原菌鉴定为层出镰孢菌;采用真菌rDNA ITS区的通用引物ITS4和ITS5对DNA进行PCR扩增,PCR产物经过测序后,测序的结果在Gen Bank中进行BLAST分析,分子鉴定结果表明茄子花腐病的病原菌是层出镰孢菌(Fusarium proliferatum),其序列在Gen Bank中的登录号为KY237800。结合不同的培养基、温度、酸碱度、碳氮源等生理指标研究该病原菌的生物学特性。对茄子层出镰孢病菌花腐病病原菌的生物学特性的初步研究结果表明:该菌株生长最适培养基为PSA培养基,最适温度为25℃,最适pH值为7,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为硫酸铵,菌落致死温度为55℃10min;分生孢子萌发最适温度为25℃,最适pH值为7,最适碳源为1%葡聚糖溶液,最适氮源为1%氯化铵溶液,致死温度为54℃10min。

层出镰刀菌T-DNA插入突变体库的构建与分析

苹果再植病害(Apple replant disease,ARD)是世界苹果主产区广泛发生的病害。前期研究表明,层出镰刀菌是造成苹果再植病害的重要致病菌之一,但其分子致病机制尚缺乏研究报道。本研究的目的是建立农杆菌介导的层出镰刀菌的遗传转化体系,并获得大规模的遗传稳定的层出镰刀菌ATMT突变体库,为研究该菌的分子致病机理奠定基础。对影响农杆菌介导转化效率的主要因子进行单因子条件测验,得到其最优转化体系为:抑制H10菌丝和孢子生长的潮霉素的浓度为100μg/mL,层出镰刀菌的分生孢子浓度为107个/mL,农杆菌OD600值为0.3,AS浓度为200μg/mL,共培养时间为48h,共培养温度为26℃。利用这一体系构建了3000个转化子的突变体库,并对随机选择的200个突变体进行潮霉素抗性基因的PCR检测,并经过在PDA培养基上5代培养,验证了T-DNA插入片段的稳定性。

层出镰孢菌原生质体制备条件的研究

[目的]研究层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)原生质体的最佳条件,建立高效制备层出镰孢菌原生质体制备的方法.[方法]通过对菌丝体菌龄、酶解液组合、酶解反应温度及酶解时间等影响因素进行优化,对层出镰孢菌原生质体的制备条件进行研究.[结果]菌块在CMC液体培养基中25℃培养分生孢子3 d后,过滤离心后转移至YEPD液体培养基中培养12 h,该菌丝最适于层出镰孢菌原生质体的制备;用1.2 mol/L KCl溶液配制含有5 mg/m L裂解酶、25 mg/m L崩溃酶、0.05 mg/m L溶壁酶的酶解液在30℃下对菌丝酶解1.5 h,此时原生质体的数量最大,为2.47×10~9个/m L.原生质体再生培养时,使用40%PTC溶液恢复细胞壁,在TB3液体培养基中30℃过夜培养,离心后与TB3固体培养基混合后倒入平板培养,原生质体再生率可达39.75%.[结论]通过对菌丝体菌龄、酶解液浓度、温度、酶解时间等条件的优化,可提高层出镰孢菌原生质体的产量及再生率,为进一步研究层出镰孢菌致病分子机制提供理论依据.

层出镰刀菌处理对食用百合保护酶相关基因表达的影响

以4种食用百合为试材,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法,研究了层出镰刀菌处理对食用百合保护酶相关基因(POD、CAT)相对表达量的影响,以期为研究食用百合抵抗逆境的分子机制提供参考依据。结果表明:POD在“龙牙×兰州”(R6-2、6)杂交百合、“铁炮×兰州”杂交百合、“兰州”百合被处理后的第1天相对表达量达到峰值且显著高于处理后的其它时间段,分别约为对照组的18.57、63.81、51.41、37.42倍,然而“铁炮”百合则是被处理后的第3天相对表达量达到峰值且显著高于处理后的其它时间段,约为对照组的113.19倍;CAT在“龙牙×兰州”(6)杂交百合、“铁炮×兰州”杂交百合均是被处理后的第1天相对表达量达到峰值且其显著高于处理后的其它时间段,分别约为对照组的68.02、19.77倍,在“龙牙×兰州”(R6-2)杂交百合、“兰州”百合则是被处理后的第3天相对表达量达到峰值,且显著高于处理后的其它时间段,分别约为对照组的30.69、25.19倍,铁炮百合是被处理后的第5天基因相对表达量达到峰值且显著高于其它时间段,约为对照组的71.83倍。

不同药剂对层出镰刀菌抑制效果的研究

为了探明4种药剂对苜蓿根腐病致病菌层出镰刀菌的抑制效果,试验在PDA培养基中加入0,500,1 000,1 500,2 000,2 500倍稀释的多菌灵、代森锰锌、波尔多液和甲基托布津,对层出镰刀菌进行抑制处理,测定菌落直径和抑制率。结果表明：4种药剂均对层出镰刀菌有一定的抑制效果,同一稀释倍数下以甲基托布津抑制效果最好,甲基托布津、代森锰锌、波尔多液和多菌灵均在稀释500倍时抑制效果较好。

产毒条件下层出镰刀菌总RNA提取方法的比较研究

目的通过比较研究不同总RNA提取方法,建立一种产毒条件下层出镰刀菌总RNA提取的方法。方法样品在低温液氮高通量组织研磨仪中快速冷冻研磨,分别采用RNA提取试剂盒、Trizol法、CTAB法和改良的Trizol和试剂盒合并法提取其总RNA,并通过微量核酸检测仪、琼脂糖凝胶电泳和逆转录定量PCR(quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)对提取的总RNA样品进行品质检测。结果试剂盒法不能提取到总RNA;Trizol法和CTAB法均可提取到总RNA,但质量较低,有明显降解现象;而改良的Trizol法更适合产毒条件下层出镰刀菌总RNA的提取,此方法可在30min内完成操作,获得的总RNA质量高,完整性好,条带清晰均无降解现象。结论该方法快速、方便、高效、通用,提取到的总RNA纯度高,浓度和完整性完全满足后续层出镰刀菌全转录组测序文库构建的要求。

不同品种大蒜提取物对层出镰孢菌的抑菌作用分析

大蒜(Allium sativum)是一种有着独特气味、含有抗菌活性的葱属植物。该研究比较了4种不同大蒜(太仓白皮、二水早、红七星和独蒜)的抗菌活性,抗菌活性最强的是“红七星”,其次是“二水早”。利用GC-MS对大蒜提取物进行成分分析,结果显示:“二水早”和“红七星”中含有大量的5-羟甲基糠醛。此外,“二水早”和“红七星”中的硫化物含量和抑菌活性也高于其他两种大蒜。根据电解质和蛋白质的泄漏量、AKP活性和透射电镜观察的结果,“红七星”提取物的抗菌活性机制可能对其膜的完整性起破坏作用。

铲运机脉内转层出矿工艺在上向水平分层充填采矿中的应用

湖北鸡笼山金矿倾斜—急倾斜中厚矿体采用上向水平分层充填法开采,存在采场顶板管理复杂、采矿效率低和矿石损失率高等问题,在Ⅰ#矿体进行了基于上向水平分层充填采矿法的铲运机脉内转层出矿工艺研究,通过扩大采场结构参数以及使用平立交替凿岩爆破技术,在中厚矿体脉内采准低采切比条件下,实现了盘区内铲运机脉内转层高效率机械化出矿作业,提高了采场综合生产能力。

南水北调某泵站联轴层及出水流道模板施工与安全分析

本文针对南水北调工程的特殊性,在联轴层及出水流道模板方面,进行施工方案优化分析,达到在确保安全、质量的前提下,节约成本工期提前对同类工程实施有很大的借鉴作用从实施效果各项指标统计分析表明达到甚至优于规范要求取得了预期成效。

层出镰孢菌连续移植菌株生物学特性及遗传多样性研究

为了探寻连续移植对强致病力层出镰孢菌株遗传变异的影响,本试验利用生物学测定和ISSR分子标记对层出镰孢菌连续移植20次菌株的菌落形态、显微形态、致病性和遗传多样性等进行了研究。生物学测定结果表明:不同移植次数菌株在菌落形态和菌体形态上未表现出明显差异;但菌丝生长速率、产孢量和致病力随着移植次数增多而表现出下降趋势,并且菌株产生菌核的能力减弱。ISSR分子标记分析结果表明:层出镰孢菌连续移植菌株间基因组DNA在简单重复序列间区存在丰富的遗传多样性;虽然大多数移植次数相近的菌株间表现出较高的遗传相似性,但菌株间的遗传分化明显,而这种遗传分化与菌株间表现出的生物学特性无明显的相关性。综上所述,层出镰孢菌株经过连续移植后出现了显著的退化现象。

激光重熔Al－Si合金层间隙析出Si中缺陷研究

激光重熔Ａｌ－Ｓｉ合金层间隙析出Ｓｉ中缺陷研究赵云飞李斗星（中科院金属所固体原子像开放研究实验室，沈阳１１００１５）在Ｓｉ中，６０°全位错一般分解为３０°和９０°半位错，其间夹着一片层错。这种扩展位错具有较为复杂的不同组态结构，可分为Ｓｈｕｆｌｅ（混...

层梯式两端出耳栽培黑木耳技术

随着人们保护森林资源意识的增强和柞木耳段的日益减少,袋料栽培黑木耳技术具有生产周期短、成本低、经济效益高的优点,已经被人们广为重视.常规的挂袋栽培法,在袋壁形成大量耳芽,受开孔所限,不能全部长大,不仅耗费了大量营养,还因开口过多,菌料暴露面积大,受污染率高,挂袋出耳搭架费工、耗时,加大了成本.为了改变上述不足,笔者在挂袋法栽培的基础上,进行了层梯式两端出耳栽培试验,取得了较好的效果.

皱木耳白毛病病原菌的分离与鉴定

从皱木耳患白毛病的子实体中分离、纯化病原菌,经科赫法则验证,通过形态学观察病原菌的菌落形态特征,并采用ITS序列分析技术,确定了病原菌的分类地位。研究结果表明皱木耳白毛病的病原菌为层出镰刀菌,且该病原菌在皱木耳中首次报道。