刀豆球蛋白A处理异种移植神经对神经再生的影响

用刀豆球蛋白A(concanavalin A,Con A)预先处理的异种移植神经,对神经再生的影响。含Con A50mg的Ringer液1 000ml(4℃)灌注日本大耳兔2h后,取出兔的胫神经。麻醉Wistar大白鼠,切除其右坐骨神经5mm,移植入8mm长,经Con A处理的兔胫神经。术后4、8、12周,可见再生神经纤维通过近端吻合部,长入异种移植神经,继而越过远端吻合部,向远段坐骨神经生长。移植神经段和远段坐骨神经中再生神经纤维成束或散在分布,再生的无髓纤维散在于有髓纤维之间。8周以后,大鼠手术侧的腓肠肌乙酰胆碱酯酶(AChE)呈阳性,再生神经终末纤维与运动终板相连。手术侧爪部皮肤的真皮和表皮,出现再生神经纤维和游离感觉神经末梢。Con A预先处理兔神经,有利于宿主的再生神经纤维能通过异种移植神经向远段生长,重新支配靶器官。

刀豆球蛋白A所致实验性肝损伤模型的构建

目的建立刀豆球蛋白A(ConA)诱导小鼠实验性肝损伤的模型。方法Balb/C小鼠40只,分别尾静脉注射ConA,根据注射剂量,小鼠被随机分为4组(每组10只):A组10mg/kg;B组20mg/kg;C组30mg/kg;另设D组作为实验对照组,尾静脉仅注射生理盐水。给药后8h观察小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性、死亡率和肝组织的病理改变。选择最佳ConA剂量,观察此剂量下不同时间点ALT活性、死亡率和肝组织的病理改变特点。结果经ConA处理后8h,A组与D组无小鼠死亡,B组死亡3只,C组小鼠全部死亡;各组血清ALT值:A组为(215.55±70.19)IU/L,B组为(2516.14±764.69)IU/L,均显著高于对照组D组的(57.30±12.21)IU/L(分别t=-8.466、t=-10.143,均P=0.000)。光镜下,A组可见肝细胞变性;B组和C组可见肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死,以C组为甚。20mg/kgConA尾静脉注射,小鼠死亡率、ALT活性、肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死在一定时间范围内(24h)随时间增加而加剧。结论ConA小鼠实验性肝损伤模型建立,ConA剂量以20mg/kg、观察时间以8h为宜。

伴刀豆球蛋白A识别正常与肝癌γ-谷氨酰转移酶的实验观察

目的 :观察伴刀豆球蛋白A是否能有效的区分出正常与肝细胞肝癌特异γ 谷氨酰转移酶 (HCC SGGT) ,为进一步建立简便、快速、灵敏、特异的检测肝癌特异GGT的方法奠定基础。方法 :用植物凝集素亲和微柱法 ,二步洗脱 ,分离 10例正常人、5例肝细胞肝癌病人、5例良性肝病病人血清中的GGT ,用速率法检测酶活性。得到层析图谱、总酶活性比和亲和率。结果 :正常与良性肝病病人血清第一步洗脱的酶活性较低(平均峰高分别为 1 62 ,1 2 6) ,而肝癌病人血清第一步洗脱的酶活性较高 (平均峰高为 16 8)。总酶活性比分别为 0 2 4,0 13 ,0 48;亲和率分别为 80 6% ,88 1% ,67 6%。结论 :伴刀豆球蛋白A与正常人、良性肝病病人血清中的GGT亲和性较强 ,与肝癌病人血清中的GGT亲和性较弱 ,伴刀豆球蛋白A能有效的区分出正常与肝癌特异GGT ,利用该特性可建立检测肝癌特异GGT的植物凝集素亲和法。

脂多糖及伴刀豆球蛋白A诱导脾淋巴细胞增殖试验方法用于免疫毒性评价的可行性研究

目的研究脂多糖（LPS）及伴刀豆球蛋白A（ConA）诱导脾淋巴细胞增殖试验的两种方法用于免疫毒性评价的可行性。方法雄性Wistar大鼠40只，体重180～200g，随机分为对照组和2，5，10mg／kg环磷酰胺染毒组，每组10只大鼠，各剂量组每日灌胃染毒1次，连续28d，对照组给予生理盐水。染毒结束后24h，断头处死大鼠，取脾脏，制浓度为3×10^6个／ml的脾细胞悬液，用MTT方法进行LPS及ConA诱导脾淋巴细胞增殖试验。结果10mg／kg环磷酰胺染毒组大鼠的B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖能力（吸光度值，分别为0．032±0．037和0．028±0．050）低于对照组的B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖能力（分别为0．124±0．093和0．458±0．320），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论LPS及ConA诱导脾淋巴细胞增殖试验的两种方法用于免疫毒性评价具有可行性。

刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的凋亡机制研究

目的:探讨刀豆球蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤中凋亡及其免疫机制。方法:BALB/c小鼠80只,分为正常组5只,模型组75只,尾静脉注射刀豆球蛋白A15mg/kg,正常组生理盐水注射,不同时间点处死采集下腔静脉血和肝组织。ELISA法检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-4,肝组织10%福尔马林固定进行TUNLE染色。Realtime-PCR法检测不同时间点冰冻小鼠肝组织中Fas、Caspase3的基因表达。结果:模型组小鼠血清中IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,与正常组相比明显升高,且肝脏组织凋亡明显,均与造模次数和时间相关。小鼠肝组织中Fas、Caspase3表达在给药后逐渐升高,Caspase3于12小时为高峰期,Fas以24小时为高峰期,且与Caspase3呈相关性。结论:细胞凋亡是刀豆球蛋白A诱导小鼠慢性肝损伤的主要机制之一,凋亡的发生发展与细胞因子分泌变化密切相关,凋亡与Fas/Fasl信号通路激活有直接关系,且Caspase3参与了凋亡的发生发展。

伴刀豆球蛋白A-糖复合物的模拟分析

主要分析 Con A与不同的糖特异性结合时其活性位点构象变化的特征。模拟分析了 Con A糖结合活性中心氨基酸残基结构特征 ,同时对相应残基原子可及性表面进行了计算和分析。结果表明 :(1) Con A在和不同的糖结合时 ,存在不同的结合方式 ;(2 )不管 Con A和什么糖结合 ,主要的作用是由活性中心的 Tyr12、Asn14、Asp2 0 8和 Arg2 2 8提供的 ;(3)无论是结合单糖还是寡糖 ,活性中心总是与第一个糖环起主要的结合作用。

三种品系小鼠对伴刀豆球蛋白A所致急性肝损伤的耐受性比较研究

目的应用不同剂量伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导三种不同品系小鼠急性肝损伤,比较肝酶变化、死亡率和肝组织病理学变化。方法分别用6、12、20和30 mg·kg-1 ConA处理C57BL/6J、BABL/c和KM小鼠,8 h后对比观察急性肝损伤动物血清酶学及肝组织病理学变化情况。结果在6 mg·kg-1 ConA的作用下,三个品系小鼠均被成功制造出急性肝损伤模型;在12 mg·kg-1ConA作用下,KM小鼠血清ALT和AST分别为(1006.8±12.1)U/L和(1391.8±13.4)U/L,显著高于BABL/c小鼠[(75.7±0.5)U/L和(284.7±23.4)U/L)和C57BL/6J小鼠(104.4±32.2)U/L和(492.2±12.3)U/L,P均<0.05];同样,KM小鼠肝指数和脾指数分别为(5.4±0.3)和(0.7±0.5),均显著高于BABL/c小鼠[(5.2±0.4)和(0.6±0.3)和C57BL/6J小鼠(5.0±0.6)和(0.6±0.2),P均<0.05];在20 mg·kg-1ConA作用下,三组小鼠血清AST和ALT水平无统计学差异,但BABL/c小鼠(4/10)和C57BL/6J小鼠(5/10)死亡率显著高于KM小鼠(1/10);在30 mg·kg-1ConA作用下,三个品系小鼠死亡率均较高(KM小鼠为30%,BABL/c和C57BL/6J小鼠均为100%)。结论不同品系的小鼠对ConA的耐受性不同,KM小鼠对ConA的耐受性明显优于BABL/c小鼠和C57BL/6J小鼠,且呈剂量依赖性。

刀豆球蛋白A刺激对人外周血T淋巴细胞的增殖作用

目的探讨刀豆球蛋白A刺激人外周血T淋巴细胞增殖的最佳浓度。方法以人外周血制备T淋巴细胞,与刀豆球蛋白A共同培养后,采用CCK-8法检测T淋巴细胞的增殖情况。结果不同浓度的刀豆球蛋白A对人外周血T淋巴细胞的刺激效果不同,以20μg/m L时刺激增殖效果最好。大于20μg/m L时,刀豆球蛋白A表现出对人外周血T淋巴细胞的抑制作用。结论刀豆球蛋白A对人外周血T淋巴细胞的增殖具有双重作用,且在20μg/m L时刺激增殖效果最好。

二甲双胍激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)缓解伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠急性爆发型肝炎

目的研究二甲双胍(Met)对伴刀豆球蛋白A(ConA)所致急性爆发型肝炎小鼠的保护作用并探索其机制。方法C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC组)、ConA组、Met组,每组8只。后两组分别灌饲0.2 mL生理盐水和100 mg/kg Met连续5 d后,尾静脉注射0.1 mL ConA(25 mg/kg)建立小鼠急性爆发型肝炎模型,18 h后处死。全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及总胆红素(TB)水平;HE染色观察小鼠肝组织病理改变;免疫组织化学染色法检测肝组织巨噬细胞浸润;实时定量PCR检测肝脏组织白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达;血细胞分析仪检测小鼠外周血白细胞(WBC)总数及其中淋巴细胞数量,流式细胞术检测脾细胞中Th17细胞比例;免疫荧光组织化学染色检测肝组织胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达;Western blot法检测肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化的AMPK蛋白表达。结果与ConA组相比,Met组小鼠血清ALT、AST及TB明显下降,肝病变减轻,巨噬细胞浸润减少,外周血白细胞总数及其中淋巴细胞数量增多,脾脏中Th17淋巴细胞比例下调,IL-1β、IL-6及TNF-α的水平降低,凋亡下降,磷酸化的AMPK的表达升高。结论Met通过激活AMPK,降低Th17细胞比例,抑制肝脏炎细胞浸润和炎细胞因子产生,减轻ConA诱导的肝损伤。

乳过氧化物酶与伴刀豆球蛋白A共修饰电极的电化学活性研究

用乳过氧化物酶（LPO）和伴刀豆球蛋白A（Con A）共修饰金电极,首次得到了乳过氧化物酶的直接电化学响应,在此基础上研究了乳过氧化物酶对过氧化氢（H2O2）的电催化活性,并研究了一氧化氮（NO）对LPO电催化活性的影响。在Con A的作用下,乳过氧化物酶在循环伏安图中显示1对准可逆的氧化还原峰,表现出薄层电化学行为。在pH 7.4的磷酸缓冲溶液中的表观氧化还原电位为-190 mV。该共修饰电极对H2O2表现出电催化还原活性,由此构建的传感器对H2O2的检测范围是2.0×10^-5-4.0×10^-3mol/L。实验发现,微摩尔量级的NO会抑制乳过氧化物酶对H2O2的催化活性。

伴刀豆球蛋白A刺激高胆固醇血症兔的单核细胞释放高水平的生长因子

复制高胆固醇血症（ｈｙｐｅｒｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ，ＨＣ）兔模型，取其血液分离单核细胞（ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，ＭＣ），培养于含或不含伴刀豆球蛋白Ａ（ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）的无血清ＤＭＥ／Ｆ１２培养基中，收集不同条件的ＭＣ条件培养基（ＭＣ－ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ，ＭＣ－ＣＭ）。并检测其促有丝分裂活性。结果表明。

伴刀豆球蛋白A与感染抗青蒿酯钠伯氏疟原虫红细胞的凝集反应

伴刀豆球蛋白Ａ与感染抗青蒿酯钠伯氏疟原虫红细胞的凝集反应吕丽莉刘爱如赵东坡隋在云山东省中医药研究所２５００１４关键词伴刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）感染伯氏疟原虫抗青蒿酯钠株红细胞感染伯氏疟原虫正常株红细胞正常红细胞凝集反应中国图书资料分类法分类号Ｒ３２...

伴刀豆球蛋白A/葡聚糖修饰的金纳米颗粒自组装膜增强信号的表面等离子体共振葡萄糖传感器

通过特异性识别作用在表面等离子体共振传感器的金膜表面构建了伴刀豆球蛋白A/葡聚糖修饰的金纳米颗粒自组装膜。当有葡萄糖存在时,膜被分解,从而实现对葡萄糖的灵敏检测。结果表明:由于金纳米颗粒和金膜之间的等离子体波耦合作用,修饰了金纳米颗粒的自组装膜上,葡萄糖的检测信号有明显增强。该传感器可以选择性地检测0.1～100mmol/L浓度范围内的葡萄糖溶液,且敏感膜可以多次再生使用。

刀豆球蛋白A诱导的葡聚糖纳米凝胶高层级自组装

基于葡聚糖这类结构明确的水溶性多糖,以接枝聚合诱导自组装法(GISA)制备得到具有交联结构的葡聚糖纳米凝胶。在此基础上,利用刀豆球蛋白A(Con A)与葡聚糖中葡萄糖单元之间的特异性识别作用,诱导葡聚糖纳米凝胶的高层级自组装,从而制备尺度可控的Con A-葡聚糖纳米凝胶高层级自组装体。通过透射电镜、红外光谱、核磁共振光谱、等温滴定量热法等手段对高层级自组装体的粒径、结构和形貌进行表征,探讨了其高层级自组装的机理。此外,还探究了Con A以及Con A-葡聚糖纳米凝胶高层级自组装体对人肺癌细胞A549的细胞毒性。结果表明:该自组装体的尺寸同葡聚糖与Con A的质量比直接相关;游离的Con A对A549细胞具有抑制作用,且Con A在参与高层级自组装的过程中生物活性保持不变。

伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜受体结合对膜下F－actin的影响

配体与膜受体结合可启动细胞信息传递通路，激活细胞并产生生物学效应。应用共聚焦激光扫描显微术，流式细胞分光光度计，生物活性测量等技术，研究ＭＡ与巨噬细胞膜受体结合后，膜下肌动蛋白丝构筑和含量随时间变化，以及细胞热能量改变。结果是ＣｏｎＡ结合巨噬细胞膜受体后，膜下肌动蛋白多聚化加快，构筑成细胞内Ｆ－ａｃｔｉｎ立体空间网络，Ｆ－ａｃｔｉｎ含量增加具有时间相关性，细胞热能量增加。巨噬细胞内这些变化提示ＣｏｎＡ通过膜受体诱导膜下肌动蛋白多聚化和构筑过程有信息传递和激活细胞等重要作用。

蒿鳖养阴软坚方对刀豆球蛋白A诱导的肝纤维化Nrf2/HO-1信号通路影响

目的:探讨蒿鳖养阴软坚方对刀豆球蛋白A(Con A)诱导的肝纤维化Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法:Balb/c小鼠随机分为正常、模型、秋水仙碱和蒿鳖养阴软坚方低、中、高剂量(1.16 g/kg、3.36 g/kg、11.58 g/kg)组。除正常组外,剩余各组均尾静脉注射1.5 mg/m L Con A,每周1次,持续10周。取小鼠肝脏作病理切片,观察肝脏的病理变化,检测肝组织羟脯氨酸浓度,免疫组化法检测肝组织Nrf2、HO-1蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,蒿鳖养阴软坚方各剂量组能不同程度地减轻肝组织的炎症反应和降低肝组织羟脯氨酸的浓度,显著减轻肝纤维化程度(P<0.05);随着蒿鳖养阴软坚方浓度增加,Nrf2和HO-1的阳性表达逐渐增强。结论:蒿鳖养阴软坚方对Nrf2/HO-1信号通路具有激活作用,且该作用可能为其抗肝纤维化机制之一。

伴刀豆球蛋白A中铽(Ⅲ)和钴(Ⅱ)之间的能量转移——一种新的金属离子之间距离的探针

基于Frster偶极-偶极无辐射能量转移机理估测溶液状态下能量给予体和接受体之间的距离已广泛应用于生物大分子的构象分析中,但仍局限于有机物基团之间的距离测定,Horrocks等人用铽和钴离子作为探针测定了嗜热菌蛋白酶分子内一个钙离子与锌离子之间的距离。

诸葛菜花粉粒表面伴刀豆球蛋白A受体扫描电镜观察

诸葛菜花粉粒表面伴刀豆球蛋白Ａ受体扫描电镜观察刘智慧，郑常文，董长江，黄玉祥，罗鹏（四川大学生物系，成都６１００６４）张明珍（四川师范大学生物系，成都６１００６６）有花植物的有性生殖过程是从花粉粒与柱头表面某些识别物质的特异性作用开始的，尽管花粉粒和...

伴刀豆球蛋白A与巨噬细胞膜上受体作用下膜变形性及细胞吞噬能力变化

本文采用图像分析、相差显微、生物活性测定等技术,研究ConA与巨噬细胞膜受体结合后对细胞行为与功能的影响. ConA与受体结合后巨噬细胞膜面积增大、变形性和吞噬能力增强、细胞产热量增加,表明细胞膜结构与功能发生变化.本实验是将图像分析技术用来研究相对图像采集速度要慢得多的活细胞特性的一次成功尝试.

呕吐毒素处理对伴刀豆球蛋白A刺激鸡脾脏淋巴细胞的体外影响

本试验研究了呕吐毒素(DON)处理对伴刀豆球蛋白A(CoA)刺激脾脏淋巴细胞的体外影响。鸡脾脏分离得到的淋巴细胞用12.5μg/mL CoA刺激,然后用不同浓度(0~50μg/mL)DON处理18小时,测定了细胞内钙离子浓度、pH值、钙调蛋白(CaM)mRNA水平和Na^+,K^+-ATP酶及Ca^(2+)-ATP酶活性。结果显示,随着DON处理水平提高,细胞内钙离子浓度和CaM mRNA水平呈剂量依赖性升高,也相同程度提高了ATP酶活性,处理组和对照组间差异达到显著或极显著水平(P<0.05或P<0.01)。试验结果提示,细胞内钙稳态失调和酸化是DON对鸡淋巴细胞毒性的关键机制。