影响分光光度法检测藻类叶绿素a的因素

目的为检测藻类叶绿素a提供可借鉴的依据．方法采用玻璃离心管与塑料离心管，待测液样在分光光度计中稳定不同时间。在叶绿素a提取过程中对液样加以冷藏的方法，进行对比试验．结果塑料离心管测得的水样叶绿素a值，比用玻璃离心管测得的值平均高30．1％．液样在分光光度计中稳定时间0～5min内，叶绿素a值随稳定时间延长而提高，5min以后提高速度减缓．冷藏时间在6h以内，叶绿素a值平均增加1．92μg·（L·h）^-1，6h以后，叶绿素a值增加速度减缓．结论塑料材料对叶绿素a值测定有干扰作用，采用塑料离心管测得的水样叶绿素a值偏高。建议用玻璃离心管．待测液样在分光光度计中的稳定时间对藻类叶绿素a值的测定有影响。如果稳定时间过短，会使测定结果偏低．适合的稳定时间为10～20min，在叶绿素a提取过程中。将液样适当进行冷藏，可使叶绿素a充分溶解于溶液中，适合的冷藏时间为6～8h，供分光光度法检测藻类叶绿素a参考．

室内空气中氨的靛酚蓝分光光度法检测的质量控制

通过对室内空气中氨的靛酚蓝分光光度法检测的整个相关过程的影响因素进行质量控制,从而提高室内空气中氨浓度检测的准确性。

紫外-可见分光光度法检测高纯度人C1酯酶抑制剂蛋白质含量的经验公式

目的建立高纯度人C1酯酶抑制剂(C1 esterase inhibitor,C1-INH)蛋白质含量(质量浓度)检测的紫外-可见光分光光度法(简称A_(280 nm)法),得到双对数方程的经验公式,用于C1-INH精纯阶段含目标蛋白样品的蛋白质含量在线检测。方法以1批高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)纯度98.49%的C1-INH原液作为对照品,用注射用水稀释获得不同质量浓度的稀释品,分别检测稀释品A_(280 nm)值,以稀释品的A_(280 nm)值与理论质量浓度进行不同方程的线性拟合,选取回收率在理论值100%±10%、R^(2)>0.99的质量浓度区间建立最佳拟合方程。在此线性范围内,用原始值和消光值分别拟合得到不同的方程,对2种拟合方程的准确度、精密度和稳定性进行验证。通过原始值均值方程和不同基质液的检测均值来建立经验公式,用该经验公式计算不同批次纯化工艺中间样品的蛋白质质量浓度并与免疫比浊法和凯氏定氮法的检测结果进行比较,确定其准确性。用该经验公式指导C1-INH精纯样品的检测。结果建立的A_(280 nm)法采用双对数方程拟合标准曲线的线性范围为0.214~3.567 mg/mL;在此线性范围内,用原始值和消光值分别拟合双对数方程,2个标准曲线的重复性和稳定性均较好,且高、中、低值质控品及检测下限的准确度(即回收率)<100%±7%,精密度CV<3%。含目标蛋白质的多种基质液按照原始均值方程计算得到对应的蛋白质质量浓度在0.044~0.064 mg/mL,均值为0.051 mg/mL;经验公式为:蛋白质质量浓度x={10(lg(y)+0.3820.764)-0.051}×稀释倍数,用该公式计算的添加了对照品的各基质的回收率在96.636%~109.533%。检测不同批次纯化工艺中间样品的结果显示,对于精纯样品,该经验公式与凯氏定氮法的结果比值在0.93~1.12,免疫比浊法结果与凯氏定氮法的结果比值在1.19~2.33。用该经验公式计算的不同精纯阶段中间样品的结果与凯氏定氮法结果更接近。结论建立的A_(280 nm)法经验公式可用于精纯阶段的高纯度C1-INH样品的蛋白质含量在线快速检测。

流动注射-二极管阵列检测分光光度法同时测定食品中的硫胺素和核黄素

建立了流动注射同时测定食品中硫胺素（VB1）和核黄素（VB2）的简单快速的方法。在氢氧化钠和碳酸氢钠混合溶液的缓冲介质中,以对氨基苯磺酸重氮盐与硫胺素发生偶氮反应,核黄素不发生反应,采用电感耦合器件二极管阵列检测装置进行检测,实现了对食品中VB1、VB2的同时测定。方法的线性范围VB1和VB2分别为0.0066mg/ml和0.0084。平均加标回收率VB1和87.3％～105.4％,VB2o 90.0％～99.7％;相对标准偏差VB1为3.6％～7.0％/VB2为4.7～6.6％。方法简单、快速、测定干扰小,结果与标准测定方法一致。

微波高压消解石墨炉原子吸收分光光度法测定小麦粉中铅的含量

本实验采用硝酸—过氧化氢对小麦粉样品进行微波高压消解前处理,利用石墨炉原子吸收分光光度法测定小麦粉中铅含量。测定时采用磷酸二氢铵作基体改进剂,灰化温度提高到600℃,并采用氘灯扣背景的方法使得基体干扰大大降低。铅含量在0～20 ug/L范围内呈线性相关,相关系数为0.9998。本方法检出限为1.2 ug/L,RSD小于3%。结果表明,该方法操作简单、易行,精密度高,是小麦粉中铅及其他重金属污染物测定较为理想的方法。

分子信标探针荧光法测定慢性粒细胞性白血病相关基因

根据慢性粒细胞性白血病(CML)相关基因b3a2序列设计了一种带有荧光基团和淬灭基团的凸环结构探针(分子信标,MB),研究其与互补目标DNA杂交前后的荧光变化行为,建立了b3a2基因检测的新方法。在最适条件下,得到杂交后溶液荧光强度与本底荧光强度的比值(S/B)和目标DNA的浓度呈线性关系,r=0.9973,线性范围4.0×10-9～3.2×10-8mol/L。该方法为实际样品的检测奠定了基础。

运用高效液相色谱——二极管阵列探测技术与固相萃取法测定啤酒中的多酚物质

由于多酚化合物在啤酒中的含量较低，如果用分光光度法测定其浓度操作比较复杂，啤酒样品要先进行予浓缩。运用固相萃取（SPE）和高效液相色谱（HPLC）——二极管阵列探测技术可分析测定以下多酚类化合物：五倍子、原儿茶素、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、水杨酸、儿茶素、表儿茶素、五羟黄铜等。这些多酚化合物对啤酒的胶体稳定性和口感稳定性有一定的影响。本方法使用了六种不同的SPE柱和三种不同溶剂洗脱液（乙腈、丙酮、甲醇）。HPLC方法的可行性可通过以下参数如再现性、相对标准偏差（RSD≤10％）、定量限（LOQ）、检出限（LOD）等来进行证实。检测捷克啤酒结果发现其多酚化合物含量变化较大。

青蒿素最佳提取工艺研究

目的:探讨青蒿最佳提取工艺。方法:用分光光度法分别对不同提取工艺所得的青蒿素进行检测。结果:不同提取工艺中,以120#汽油回流提取法所得的收率和含量最高。结论:120#汽油冷巡环提取法适合现代化大生产。

同种异体肌腱羟脯氨酸测定的正交试验

[目的]探讨不同因素对检测同种异体肌腱中羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量的影响。[方法]使用分光光度计,基于正交试验的方法,对同种异体肌腱进行HYP含量检测,以样品的酶解时间(4、12、24 h)、酶解的水浴温度(37℃、60℃、100℃),根据样品在酶解过程中需要盐酸优化酶解,设定酸酶比(1∶2,1∶1,2∶1),样品酶解时的水浴震荡频率(180 r/min、200 r/min、250 r/min)4个单因素变量交替试验,得到最优化检测因素。[结果]单因素分析结果表明,在其他变量不变的情况下,酶解时间12 h,水浴温度为60℃,酸酶比为2∶1,保证pH值为7.4左右,200 r/min震荡频率,能保证HYP酶解效果最佳,正交试验及极差分析表明酸酶比影响作用最大,其他影响因素依次为水浴温度、震荡频率和时间。[结论]同种异体肌腱HYP含量检测,需调整pH值、温度、震荡频率及酶解时间保证酶的活性做高,使样本检测率达到最高,以期合理使用资源,同时达到最佳的检测效果。