三叶青多糖增强Lewis肺癌小鼠抗肿瘤免疫反应

背景与目的肺癌具有高致病率和高致死率,但肺癌治疗仍缺乏低毒高效的抗肿瘤药物。三叶青多糖在抗肿瘤治疗方面具有开发价值。本文旨在观察三叶青多糖对Lewis肺癌小鼠免疫反应的影响,并探讨其分子机制。方法建立Lewis肺癌小鼠模型并采用随机数字表法进行分组。脾多肽组灌胃50 mg/kg脾多肽,三叶青多糖低、中、高剂量组分别灌胃62.5、125、250 mg/kg三叶青多糖,模型组和对照组灌胃等容积生理盐水。比较肿瘤形成、转移情况;苏木素-伊红(haematoxylin-eosin,HE)染色观察肿瘤细胞病理学变化;流式细胞术检测巨噬细胞吞噬能力、凋亡水平、M1/M2型极化水平及外周血T细胞亚群和细胞因子水平;噻唑蓝溴化四唑(methyl thiazolyldiphenyl tetrazolium,MTT)法检测巨噬细胞增殖活性;β-D-吡喃半乳糖苷氯酚红(chlorophenol red-β-D-galactopyranoside,CPRG)法检测树突状细胞(dendritic cell,DC)抗原提呈功能;实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测肿瘤组织分化抗原簇47(cluster of differentiation 47,CD47)信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)和蛋白表达及巨噬细胞中信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)表达。结果三叶青多糖3个剂量组和脾多肽组抑瘤率和抗转移率高于模型组,肿瘤组织病理损伤严重,巨噬细胞吞噬墨汁阳性率和吞噬肿瘤细胞效率升高,巨噬细胞凋亡率下降,巨噬细胞增殖活性、巨噬细胞向M1型极化比例、DC抗原提呈能力、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)升高,血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤组织CD47、巨噬细胞蛋白酪氨酸磷酸酶1(SH2-containing protein tyrosine phosphatase 1,SHP-1)、蛋白酪氨酸磷酸酶2(SH2-containing protein tyrosine phosphatase 2,SHP-2)及磷酸化信号调节蛋白α(phosphorylation signal regulatory proteinα,p-SIRPα)表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。上述指标三叶青多糖低剂量组与脾多肽组的差异均无统计学意义(P>0.05),且三叶青多糖的作用均呈剂量依赖性。结论三叶青多糖有抗Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和转移及免疫反应的作用,其机制可能与抑制SIRP/CD47信号通路有关。