资冲颗粒对大鼠间充质干细胞生殖分化相关标记基因表达的影响

目的探讨资冲颗粒(熟地、菟丝子等)诱导大鼠间充质干细胞向生殖细胞分化相关基因表达的影响。方法制备大鼠含资冲颗粒血清及大鼠空白血清对大鼠间充质干细胞进行干预。显微镜观察细胞形态变化情况;实时荧光定量PCR测定干预后细胞内生殖分化相关Oct4、Stra8、Itga6、Itgb1、Scp3、Gdf9、Zp1、Zp3基因的表达;MTT法检测细胞增殖情况;运用统计软件分析两组数据。结果镜下观察72 h干预未发现含药血清和空白血清对细胞形态有明显影响;实时荧光定量PCR测定表明含药血清对Stra8、Scp3、Gdf9基因表达有显著影响(P<0.05),对其它基因表达的影响则不显著(P>0.05);MTT法显示5 d干预两组细胞增殖无差别(P>0.05)。结论资冲颗粒大鼠含药血清具有诱导大鼠间充质干细胞向生殖细胞方向分化的潜力。

补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化

目的验证补骨脂素能诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向分化的假说。方法使用终浓度为3.0μg/ml的补骨脂素干预大鼠间充质干细胞,显微观察细胞形态变化情况,接着使用MTT法检测细胞增殖变化,最后使用实时荧光定量PCR(Qpcr)测定被干预细胞的七种代表性的生殖分化标记基因的表达变化,七种标记基因分别为:Oct-4、Stra8、RVLG、SCP3、TNP2、Itgb1、Itga6。结果显微观察表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,大鼠间充质干细胞形态变化不显著;MTT法检测表明3.0μg/ml的补骨脂素干预的5 d中,大鼠间充质干细胞增殖情况变化不显著(P>0.05);Qpcr测定表明3.0μg/ml的补骨脂素干预72 h后,显著上调了Oct-4、Stra8、SCP3、Itgb1等基因的表达(P<0.05),而对RVLG、TNP2、Itga6等基因的表达影响不显著(P>0.05)。结论补骨脂素可能参与诱导大鼠间充质干细胞向雄性生殖细胞方向的分化。