血清分化簇40配体水平及血管外肺水指数与重症肺炎合并呼吸衰竭患者病情程度和预后的关系

目的探讨血清分化簇40配体(CD40L)水平及血管外肺水指数(EVLWI)与重症肺炎合并呼吸衰竭患者病情程度和预后的关系。方法选择重症肺炎合并呼吸衰竭患者121例,根据急性生理学和慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)分为低危者31例、中危者49例、高危者41例;入组后规范治疗并随访30天,根据生存状态分为死亡者37例、存活者84例。采集所有研究对象入重症监护室24 h内外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CD40L;通过股动脉、肱动脉或腋动脉留置导管,连接PiCCO监测仪,通过肺热稀释法测量EVLWI。比较不同病情程度重症肺炎合并呼吸衰竭患者血清CD40L水平及EVLWI,采用Spearman相关分析法分析重症肺炎合并呼吸衰竭患者血清CD40L水平、EVLWI与APACHEⅡ评分的关系。采用多因素Logistic回归模型分析重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后不良的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CD40L水平、EVLWI对重症肺炎合并呼吸衰竭患者死亡的预测价值。结果重症肺炎合并呼吸衰竭患者低危者、中危者、高危者血清CD40L水平和EVLWI依次升高(P均<0.05)。Spearman相关分析显示,重症肺炎合并呼吸衰竭患者血清CD40L水平及EVLWI与APACHEⅡ评分均呈正相关关系(P均<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增长、肺外并发症≥2个、APACHEⅡ评分增加以及血清CD40L水平和EVLWI升高为重症肺炎合并呼吸衰竭患者预后不良的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CD40L水平、EVLWI单独与联合评估重症肺炎合并呼吸衰竭患者死亡的曲线下面积分别为0.773、0.779、0.880,血清CD40L水平、EVLWI联合预测重症肺炎合并呼吸衰竭患者死亡的曲线下面积大于血清CD40L水平、EVLWI单独(P均<0.05)。结论血清CD40L水平及EVLWI升高与重症肺炎合并呼吸衰竭患者病情程度增加有关,也是其预后不良的独立危险因素;血清CD40L水平、EVLWI对重症肺炎合并呼吸衰竭患者死亡均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

结肠癌低分化簇分级与临床病理特征和预后关系的研究

目的:分析和探讨结肠癌低分化簇(poorly differentiated clusters,PDC)分级与临床病理特征和预后的关系。方法:回顾性选取2016年12月至2021年7月于皖西卫生职业学院附属医院接受外科手术治疗的102例结肠癌患者的H&E染色标本及病例资料,复评全部患者肿瘤组织中PDC分级,采用χ~2检验和Logistic回归分析PDC分级与临床病理特征的关系,通过Cox模型评价PDC分级与患者预后的关系。结果:PDC G1为52例,G2 14例,G3 36例。PDC分级与肿瘤出芽(tumor budding,TB)独立正相关,而与肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TIL)独立负相关(均P<0.05)。淋巴结转移或癌结节(HR=2.377,95%CI:1.237~4.568;P=0.009)、远处转移(HR=7.455,95%CI:2.597~21.399;P<0.001)和PDC分级(HR=2.095,95%CI:1.099~3.994;P=0.025)均为结肠癌患者疾病进展的独立风险因素。结论:TIL和TB均可影响结肠癌PDC分级,评估癌组织中PDC分级有助于对结肠癌患者进行预后分层。

大肠癌组织中乙醛脱氢酶1和分化簇133的表达及其临床意义

目的研究乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)和分化簇133(cluster of differentiation 133,CD133)在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测60例大肠癌、25例大肠腺瘤和20例正常大肠黏膜组织中ALDH1和CD133的表达,并分析其与临床病理参数和预后的关系。结果大肠癌组织中ALDH1及CD133的表达率(78.3%,75.0%)明显高于大肠腺瘤(54.5%,48.0%)和正常大肠黏膜组织(15.0%,10.0%),每两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。ALDH1的表达与大肠癌的浸润深度、TNM分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与分化程度呈负相关(P<0.05)。CD133的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈正相关(P<0.05)。ALDH1和CD133在大肠癌中的表达呈正相关(P<0.05)。ALDH1及CD133表达阳性的患者,其5年生存率低于表达阴性者(P<0.05)。结论ALDH1及CD133表达升高与大肠癌的发生、发展显著相关,有可能作为判定大肠癌预后的指标之一。

Th1/Th2平衡、分化簇抗原28、可诱导共刺激分子、程序性死亡受体-1和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4在急性冠脉综合征患者外周血中的表达

目的研究Th1/Th2及相关细胞因子、共信号分子分化簇抗原28(CD28)、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)在急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中的表达,并探讨其是否参与ACS的发病机制。方法前瞻性选取2021年7月至2022年4月经中山大学附属第三医院粤东医院心血管内科诊断为ACS的120例患者作为研究对象,采用ACS不同亚型的诊断标准将其分为不稳定型心绞痛(UA)组、ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组,每组各40例。选取同时间段行冠状动脉造影检查正常的40例住院患者作为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中的干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-2、IL-4和IL-10表达水平,采用流式细胞仪检测外周血互助性T细胞(Th)1、Th2细胞占CD4^(+)T细胞的比例以及共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4在CD4^(+)T细胞表面的表达水平,通过冠脉造影手术采用SYNTAX评分法评估ACS患者冠脉病变严重程度,比较四组上述各指标之间的差异并进行各指标之间的相关性分析。结果ACS患者外周血中Th1/Th2比值、Th1数量及相关细胞因子IFN-γ和IL-2的血清表达量高于对照组,其外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达量也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);另外,STEMI组和NSTEMI组的这些指标也均高于UA组,差异有统计学意义(P<0.05);SYNTAX评分与外周血Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2水平和外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量呈明显正相关(P<0.05);外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量均与Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2表达水平呈明显正相关(P<0.05)。结论ACS患者外周血中的Th1、相关细胞因子IFN-γ和IL-2以及其CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达较健康体检者均明显上调,其均可能在ACS的发病机制中发挥了重要作用。

血清淀粉样蛋白A/C反应蛋白比值、活化蛋白C、簇分化抗原64与重症肺炎的关系及对预后的预测价值

目的分析血清淀粉样蛋白A(SAA)/C反应蛋白(CRP)比值、活化蛋白C(APC)、簇分化抗原64(CD64)与重症肺炎(SP)的关系及对预后的预测价值。方法选取2022年4月至2023年4月海南医学院第二附属医院收治的100例SP患者作为病例组,50例普通肺炎患者作为对照组。比较分析病例组与对照组患者的临床资料、实验室检测指标、临床肺部感染(CPIS)评分、肺炎严重指数(PSI)评分。分析血清SAA/CRP、APC、CD64与SP患者CPIS评分、PSI评分的相关性。采用多因素logistic回归方法分析SP发生的独立影响因素。入院后28 d,根据病例组患者的预后将其分为预后不良组(死亡,47例)与预后良好组(存活,53例),比较分析不同预后SP患者的血清SAA/CRP、APC、CD64。分析血清SAA/CRP、APC、CD64对SP患者预后不良的预测价值。结果病例组与对照组患者的性别、年龄、体重指数、吸烟史比例以及饮酒史比例比较差异均无统计学意义(P>0.05);病例组患者的血清SAA/CRP、CD64、CPIS评分、PSI评分均高于对照组,APC低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清SAA/CRP、CD64与SP患者的CPIS评分、PSI评分均呈显著正相关(P<0.05),APC与SP患者的CPIS评分、PSI评分均呈显著负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,血清SAA/CRP、APC、CD64均为SP发生的独立影响因素(P<0.05)。病例组患者的预后不良发生率为47.00%(47/100),预后不良组患者的血清SAA/CRP、CD64均高于预后良好组,APC低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者操作特征曲线分析结果显示,血清SAA/CRP、APC、CD64联合预测SP患者预后不良的曲线下面积为0.993,大于SAA/CRP(曲线下面积为0.828)、APC(曲线下面积为0.776)和CD64(曲线下面积为0.785)单一指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SP血清患者的SAA/CRP、CD64明显升高,APC明显降低,且血清SAA/CRP、APC、CD64联合指标检测对SP患者的预后不良具有较高的预测价值。

分化抗原簇63在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测分化抗原簇63(cluster of differentiation 63,CD63)在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达水平与临床特征和生存的相关性。方法收集2013年6月至2015年1月在安阳市第二人民医院接受手术治疗的NSCLC患者126例,收集患者的一般临床资料和肿瘤组织样品;免疫组化实验检测NSCLC组织中CD63的表达水平,将其分为CD63高表达组和CD63低表达组;卡方检验分析CD63的表达与患者临床特征的相关性;Kaplan-Meier分析方法绘制生存曲线,Log-rank检验比较CD63高表达和低表达组的生存率;Cox回归模型进行单因素及多因素分析影响患者预后的独立危险因素。结果CD63在NSCLC组织中的高表达率为55.6%(70/126),低表达率为44.4%(56/126);CD63低表达组肿瘤分期T 3-T 4期、淋巴转移阳性和TNM分期Ⅲ期患者的比例均高于CD63高表达组;CD63低表达组5年中位生存时间和PFS均低于CD63高表达组(log-rank=5.272,P=0.022;log-rank=6.813,P=0.009);肿瘤分期、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期和CD63低表达均为NSCLC患者预后不良的独立危险因素。结论CD63低表达与NSCLC患者的肿瘤分期、淋巴结转移、TNM分期和预后相关。

簇分化抗原74基因转染对人脐静脉内皮细胞ECV304特性的影响

目的探讨簇分化抗原74(cluster of differentiation 74,CD74)基因在人脐静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cell,HUVEC)的转染条件和CD74基因转染对细胞特性及功能的影响,为深入研究基于调节CD74表达的生物治疗打下基础。方法①将含有CD74 cDNA的pCMV-CD74增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescentprotein,EGFP)质粒通过转化大肠杆菌进行扩增、质粒提取、并经酶切和测序进行鉴定;②将pCMV-CD74质粒转染脐静脉内皮细胞ECV304,通过EGFP荧光质粒对ECV304细胞进行转染率的检测;③采用免疫组化法和Western blot,检测转染前后ECV304细胞CD74分子的表达;采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptase poly-merase chain reaction,RT-PCR)法检测转染后CD74 mRNA水平的表达;④pCMV-CD74质粒转染前后ECV304细胞功能相关基因人类白细胞抗原-A(human leukocyte antigens A,HLA-A)、人类白细胞抗原-DR(human leukocyte anti-gens DR,HLA-DR)、γ-干扰素受体(interferon-γreceptor,IFNGR)表达的检测:采用RT-PCR比较转染前后脐静脉内皮细胞各功能相关基因的表达;⑤应用RT-PCR分析软件分析实验数据。结果转染前后ECV304细胞HLA-A△Ct值分别为9.4881和12.1097,2-△△Ct为6.1543大于2,说明转染前后HLA-A表达有统计学差异;IFNGR△Ct值分别为4.9828和5.5228,2-△△Ct为1.4539小于2,转染前后无统计学差异;HLA-DR△Ct值分别为14.1098和14.7924,2-△△Ct为1.3036小于2,转染前后无统计学差异。结论人脐静脉内皮细胞ECV304表达HLA-A、HLA-DR、IFNGR和CD74mRNA;pCMV-CD74转染可增加ECV304细胞CD74基因和膜分子的表达,增加HLA-A基因的表达,但不增加HLA-DR和IFNGR的表达。

分化抗原簇14基因多态性与感染易感性的相关研究

目的 通过检测分化抗原簇14基因（CD14）单核苷酸多态性（SNP）的频率分布．探讨基因多态性与感染易感性之间的关系。方法选择2004年12月-2006年3月进入重症加强治疗病房（ICU）并发全身性感染的患者112例，并以100名健康自愿献血者为正常对照组。采用聚合酶链反应（PCR）扩增限制性内切酶长度多态性（RFLP）的方法检测CD14基因上-159C／T及-260C／T两个位点的SNP。结果全身性感染组与正常对照组比较：两组CD14-159基因型分布差异有显著性（P=0．005），全身性感染组CD14-159的T等位基因出现频率显著高于正常对照组（P=0．000）；两组CD14-260基因型分布及等位基因出现频率差异均无显著性（P=0．912和P=0．706）。死亡组与存活组比较：两组CD14-159基因型分布差异有显著性（P=0．000），死亡组CD14-159的T等位基因出现频率显著高于存活组（P=0．000）；CD14-260基因型分布及等位基因出现频率在两组问差异均无显著性（P=0．643和P=0．890）。结论CD14基因-159C／TSNP的差异可能与全身性感染患者易感性及感染后病死率增高有关。

狼疮性肾炎病人血清簇分化抗原36、微小RNA-335水平与疾病活动度的关系

目的检测狼疮肾炎病人血清簇分化抗原36(CD36)、微小RNA(miR)-335水平,并分析二者与狼疮肾炎疾病活动度的关系。方法选取仙桃市第一人民医院2017年5月至2020年6月收治的系统性红斑狼疮(SLE)病人138例为研究对象,其中狼疮肾炎活动组92例,非活动组46例,同期选取在该院进行健康体检人员120例为对照组。常规检查所有受试者实验室指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清CD36水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-335水平;Pearson相关性分析检验狼疮肾炎病人血清CD36、miR-335与一般资料的相关性;ROC曲线分析血清CD36、miR-335对狼疮肾炎疾病活动度的诊断价值。结果与对照组比较,狼疮肾炎病人血清CD36、miR-335水平均显著升高(P<0.05);活动组狼疮肾炎病人与非活动组比较,尿素氮[(8.89±2.14)mmol/L比(5.93±1.25)mmol/L]、血肌酐[(93.47±18.26)μmol/L比(52.19±21.35)μmol/L]、尿蛋白[(3.45±1.31)g/24 h比(1.28±0.43)g/24 h]、尿沉渣红细胞[95(55,132)×10^(4)/mL比36(18,65)×10^(4)/mL]、SLE疾病活动指数(SLEDAI)[12(10,15)分比5(4,7)分]、活动指数[10(8,13)分比2(1,3)分]均显著升高,补体C3[(436.12±53.72)mg/L比(674.38±68.91)mg/L]、C4[(75.66±21.43)mg/L比(122.47±30.12)mg/L]、白蛋白[(23.58±6.15)g/L比(31.24±7.83)g/L]水平显著降低(P<0.05);与非活动组比较,活动组狼疮肾炎病人CD36、miR-335水平显著升高,且随着疾病活动度的增加,血清CD36、miR-335水平均逐渐升高,且与狼疮肾炎病人白蛋白、补体C3、C4呈负相关,与血肌酐、尿蛋白、尿沉渣红细胞、SLEDAI、活动指数呈正相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清CD36、miR-335水平诊断狼疮肾炎病人疾病活动度的曲线下面积(AUC)分别为0.83[95%CI:(0.75,0.90)]、0.80[95%CI:(0.73,0.88)],二者联合诊断AUC为0.94[95%CI:(0.90,0.98)]。结论狼疮肾炎病人血清CD36、miR-335水平随着狼疮肾炎疾病活动度的增加而逐渐升高,对狼疮肾炎疾病活动度有一定的诊断价值。

胆囊癌低分化肿瘤细胞簇与预后的相关性

目的探讨低分化肿瘤细胞簇(poorly differentiated clusters, PDC)在胆囊癌中的预后意义。方法低倍镜下观察癌组织浸润前沿PDC最密集的区域,20倍物镜下(显微镜视野最大径为1 mm)行PDC计数,取PDC最大值。依据其数目将其分为3级:G1:<5个PDC;G2:5~9个PDC;G3:≥10个PDC。评估胆囊癌患者病理标本的PDC分级,分析其与临床病理特征的相关性。结果在51例可切除的胆囊癌标本中,PDC-G1 13例(25.50%),PDC-G2 19例(37.25%),PDC-G3 19例(37.25%)。PDC分级与肿瘤分化、淋巴血管侵犯、pT分期、pN分期、远处转移及pTNM分期相关(P<0.05)。单因素分析结果显示,PDC分级、肿瘤分化、淋巴血管侵犯、神经纤维侵犯、pT分期、pN分期、远处转移及pTNM分期与胆囊癌患者的预后有显著相关性(P<0.05)。多因素分析显示,PDC分级、pTNM分期及神经纤维侵犯是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,胆囊癌患者的总生存时间随着PDC分级的升高显著下降(P<0.05)。结论 PDC分级是胆囊癌患者的独立预后因子,高级别PDC与预后不良密切相关,有望成为胆囊癌患者术后是否进行辅助治疗的重要因素。

千金汤加味治疗重症肺炎(痰热壅肺证)的临床观察

目的 探讨千金汤加味治疗重症肺炎(痰热壅肺证)的临床疗效。方法 选择辨证为痰热壅肺证的重症肺炎患者110例,以随机数字表法分为对照组与观察组各55例。对照组依据指南行常规干预措施,观察组常规干预措施同对照组,并予千金汤加味内服。两组均予14 d治疗。比较两组急性生理和慢性健康Ⅱ(APACHEⅡ)评分与临床肺部感染评分(CPIS)、血清核因子κB(NF-κB)和簇分化抗原64(CD64)水平。结果 治疗后,两组APACHEⅡ评分、CPIS评分明显减少,同时观察组明显低于对照组(P<0.05);两组血清NF-κB和CD64水平明显下调,观察组下调更显著(P<0.05)。观察组总有效率为94.55%,明显高于对照组的80.00%(P<0.05)。结论 千金汤加味治疗重症肺炎(痰热壅肺证)的疗效明显,有助于肺部感染与病情的控制,并下调血清NF-κB和CD64水平。

疏肝理气方对浆细胞性乳腺炎患者术后恢复及免疫因子的影响

目的:分析浆细胞性乳腺炎(PCM)患者应用疏肝理气、清热解毒法对其术后恢复及免疫因子的影响。方法:选取PCM术后患者88例,以随机方式分为两组。对照组采用常规西医疗法,研究组在对照组基础上应用中药疏肝理气、清热解毒法治疗,比较两组患者恢复情况、免疫因子指标变化及不良反应、并发症发生情况。结果:研究组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,研究组的术后引流时间、拆线时间、切口愈合时间、住院时间更短(P<0.05)。两组换药时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后当天疼痛视觉模拟评分(VAS)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组术后3 d及术后7 d的VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。与对照组比较,研究组术后7 d的血清分化簇3(CD3^(+))、分化簇4(CD4^(+))、CD4^(+)/分化簇8(CD8^(+))CD8^(+)更高,而CD8^(+)更低,差异有统计学意义(均P<0.05)。两组不良反应、并发症发生率比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:对PCM术后患者应用中药疏肝理气、清热解毒法较单纯西药治疗更利于促进患者恢复,减轻疼痛,促进免疫功能恢复,且安全性较好。

高级别浆液性卵巢癌患者血清CD26、CD109与临床病理特征和预后的关系研究

目的 探讨高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)患者血清分化簇26(CD26)、分化簇109(CD109)与临床病理特征和预后的关系。方法 选取2019年7月至2020年7月宿迁市第一人民医院及泰兴市人民医院收治的145例HGSOC患者作为HGSOC组,选取同期在我院体检的100例正常健康者作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定两组的血清CD26、CD109水平并进行比较,分析CD26、CD109水平与HGSOC患者临床病理特征的关系,采用Cox回归模型分析HGSOC患者预后的影响因素。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析血清CD26、CD109高水平和低水平患者的3年总生存率情况。结果 与对照组比较,HGSOC组血清CD26、CD109水平显著升高(P<0.05)。年龄、肿瘤直径、腹水与否、术前CA125水平不同的患者血清CD26、CD109水平比较差异无统计学意义(P>0.05),淋巴结转移、FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期HGSOC患者血清CD26、CD109水平显著高于无淋巴结转移、FIGO分期Ⅰ+Ⅱ期HGSOC患者(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,CD26高水平组3年总生存率[59.72%(43/72)]显著低于CD26低水平组[79.10%(53/67)](P<0.05);CD109高水平组3年总生存率[62.50%(50/80)]显著低于CD109低水平组[77.97%(46/59)](P<0.05)。Cox回归模型分析显示,淋巴结转移、FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期、血清CD26高水平、血清CD109高水平是HGSOC预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 血清CD26、CD109在HGSOC患者中呈高表达,其表达水平升高与远处转移、FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期及预后不良有关。

不同中医证型非酒精性脂肪性肝病患者血清Vaspin、IL-25、CD68及CD206水平变化及临床意义

目的:探究不同中医证型非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、白细胞介素(IL)-25、巨噬细胞标志物分化簇(CD)68及CD206水平变化及临床意义。方法:纳入2021年3月~2022年3月期间武汉市第七医院收治的142例NAFLD患者进行分析,依据其临床表现、体征及脉搏等进行中医辨证分型,比较不同证型NAFLD患者肝功能、肝纤维化指标、血清Vaspin、IL-25、巨噬细胞标志物CD68、CD206水平及预后情况。结果:142例NAFLD患者临床主要包括4种证型,分别为肝郁痰湿内阻证24例(16.90%)、湿热蕴结证40例(28.17%)、脾虚证56例(39.44%)、痰瘀互结证22例(15.49%);丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)水平比较,肝郁脾虚证均低于其他3种证型(P<0.05);Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、透明质胶(HA)、IV型胶原(CIV)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、Vaspin及CD68水平比较,均痰瘀互结证>痰湿内阻证>湿热蕴结证>肝郁脾虚证(P<0.05);IL-25、CD206水平比较,均痰瘀互结证<痰湿内阻证<湿热蕴结证<肝郁脾虚证(P<0.05);随访2年,23例患者(16.20%)出现疾病进展,119例(83.80%)病情稳定,且痰瘀互结证的预后不良事件(肝硬化、肝衰竭、肝细胞癌)发生率均高于其他3种证型(P<0.05)。结论:不同辨证分型NAFLD患者之间的血清Vaspin、IL-25、CD68及CD206水平存在差异,且这些指标的紊乱可能与NAFLD病情进展及患者预后情况密切关联。

服用非那雄胺的前列腺增生患者前列腺转录组景观特征分析

目的通过转录组分析从基因表达方面探讨非那雄胺对良性前列腺增生(BPH)患者的影响。方法收集2020年10月—2021年10月于北京大学第三医院接受前列腺电切术的患者,根据患者术前是否长期(>6个月)服用非那雄胺分为用药组和非用药组,两组各8例。对两组患者的前列腺组织标本进行转录组测序分析,定量聚合酶链式反应(qPCR)及免疫组化分析验证其结果。结果用药组与非用药组相比,上调基因857个,下调基因806个。通路富集分析显示,非那雄胺导致焦点粘附通路中血管内皮生长因子D型(VEGFD)表达下调;组间网络分析提示钙信号通路为整个过程的关键通路;进一步对其进行基因集富集分析(GSEA)发现分化簇38(CD38)基因表达上调。qPCR及免疫组化验证支持上述转录组结果,同时发现雄激素受体表达升高。结论非那雄胺通过下调焦点粘附通路中VEGFD的表达减少前列腺微血管生成,进而降低BPH手术出血的风险,长期服用非那雄胺导致钙信号通路中CD38表达上调,可能与非那雄胺抵抗有关。

血清LTBP2、Ucn1、CD90水平在子宫内膜异位症诊断及病情严重程度评估中的价值

目的探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、尿皮质醇1(Ucn1)、抗原分化簇90(CD90)水平在子宫内膜异位症(EMT)诊断及病情严重程度评估中的价值。方法选取2020年1月至2023年12月在该院进行诊断治疗的EMT患者103例作为实验组,按病情程度将实验组分为重度组与轻度组,另选取同期在该院体检的体检健康者82例作为对照组。采用Pearson分析血清LTBP2、Ucn1、CD90水平相关性,采用多因素Logistic回归分析影响EMT患病因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LTBP2、Ucn1、CD90对EMT的诊断价值。结果实验组与对照组比较,血清LTBP2、Ucn1、CD90水平呈显著升高的趋势(P<0.05)。实验组血清LTBP2、Ucn1、CD90之间呈正相关(r=0.377、0.344、0.246,P<0.001、<0.001、=0.012)。轻度组与重度组血清LTBP2、Ucn1、CD90水平均显著高于对照组患者,轻度组患者血清LTBP2、Ucn1、CD90水平显著低于重度组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组白细胞介素(IL)-4水平低于对照组,而经期疼痛及盆腔手术史占比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LTBP2、Ucn1、CD90水平、经期疼痛、盆腔手术史是发生EMT的危险因素(P<0.05),IL-4水平是发生EMT的保护因素(P<0.05)。血清LTBP2、Ucn1、CD90及三者联合对EMT诊断的曲线下面积为0.788、0.801、0.810、0.916,灵敏度为63.11%、63.11%、62.14%、84.47%,三者联合(Z_(LTBP2-三者联合)=4.054、P<0.001,Z_(Ucn1-三者联合)=3.966、P<0.001,Z_(CD90-三者联合)=4.193、P<0.001)对EMT诊断价值更高。结论EMT病情程度较重者血清LTBP2、Ucn1、CD90水平较高,血清LTBP2、Ucn1、CD90联合对EMT具有一定诊断价值。

葫芦巴碱调节CD47/SIRPα信号通路对胃癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的:研究葫芦巴碱调节分化簇47(CD47)/信号调节蛋白α(SIRPα)信号通路对胃癌MGC803细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测0、20、40、80、160、320μmol/L的葫芦巴碱处理后的人胃癌细胞株MGC803存活率,筛选其最佳作用浓度。将体外培养的MGC803细胞随机分为对照组、葫芦巴碱组(160μmol/L的葫芦巴碱处理)、CD47敲低组[转染CD47小干扰RNA(siRNA)质粒]、空载组(转染CD47空载质粒)、葫芦巴碱+CD47过表达组(160μmol/L的葫芦巴碱干预处理+转染CD47过表达质粒),培养24 h后。采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞CD47/SIRPα通路表达;EdU染色和MTT法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡;免疫荧光染色检测各组细胞凋亡[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]相关蛋白表达;以不同细胞比例共培养人外周血单个核细胞与各组MGC803细胞后以MTT法检测人外周血单个核细胞对各组MGC803细胞的杀伤率;裸鼠体内移植瘤实验验证葫芦巴碱对CD47/SIRPα通路的调控作用。结果:20、40、80、160、320μmol/L的葫芦巴碱均可降低MGC803细胞存活率(P<0.05),且其降低作用随着葫芦巴碱浓度升高而增强,选择接近半抑制浓度值(168.94μmol/L)的160μmol/L葫芦巴碱进行后续实验。与对照组比较,葫芦巴碱组、CD47敲低组细胞和移植瘤组织CD47、SIRPα mRNA及蛋白表达、EdU阳性率、存活率、Bcl-2相对荧光强度、移植瘤重量、移植瘤体积降低,凋亡率、Bax相对荧光强度、人外周血单个核细胞对MGC803细胞杀伤率升高(P<0.05)。与葫芦巴碱组比较,葫芦巴碱+CD47过表达组细胞和移植瘤组织CD47、SIRPα mRNA及蛋白表达、EdU阳性率、存活率、Bcl-2相对荧光强度、移植瘤重量、移植瘤体积升高,凋亡率、Bax相对荧光强度、人外周血单个核细胞对MGC803细胞杀伤率降低(P<0.05)。结论:葫芦巴碱可通过抑制CD47/SIRPα通路表达来抑制胃癌细胞增殖并诱导其凋亡,还可减轻其免疫逃逸。

多囊卵巢综合征患者血清TXNIP、sCD36水平变化及意义

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、可溶性分化簇36(sCD36)水平变化及意义。方法 选取124例PCOS患者为PCOS组,另选取同期117名体检健康女性为对照组。收集所有研究对象糖脂代谢指标[空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、稳态模型评估(HOMA)-IR,采用酶联免疫吸附法检测血清TXNIP、sCD36。通过Pearson/Spearman相关性分析法分析PCOS患者血清TXNIP、sCD36水平与糖脂代谢指标、HOMA-IR的相关性,多因素Logistic回归分析血清TXNIP、sCD36水平与PCOS的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TXNIP、sCD36水平对PCOS的诊断价值。结果 与对照组相比,PCOS组FPG、FINS、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR、TXNIP、sCD36水平升高,HDL-C水平降低(P均<0.05)。Pearson/Spearman相关性分析显示,PCOS患者血清TXNIP、sCD36与FPG、FINS、TC、TG、LDL-C、HOMA-IR呈正相关(r分别为0.546、0.563、0.605、0.580、0.565、0.662和0.593、0.525、0.616、0.513、0.598、0.683,P均<0.05),与HDL-C呈负相关(r分别为-0.551、-0.545,P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,校正糖脂代谢指标和HOMA-IR后,血清TXNIP(OR=1.047,95%CI:1.017~1.078)、sCD36(OR=1.475,95%CI:1.165~1.868)水平升高为PCOS的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清TXNIP、sCD36水平联合(AUC=0.914,95%CI:0.872~0.946)诊断PCOS的曲线下面积(AUC)大于血清TXNIP(AUC=0.822,95%CI:0.768~0.868)、sCD36(AUC=0.811,95%CI:0.755~0.858)水平单独诊断(P均<0.05)。结论 PCOS患者血清TXNIP、sCD36水平升高,且与糖脂代谢紊乱和IR有关;血清TXNIP、sCD36联合检测对PCOS有较高诊断价值。

血清sFlt-1、sCD14对卒中相关性肺炎的诊断价值

目的探讨血清可溶性fms样酪氨酸激酶1(sFlt-1)、可溶性分化簇14(sCD14)对卒中相关性肺炎(SAP)的诊断价值。方法选取2022年3月至2023年1月该院接收的SAP患者67例作为研究组,同期卒中未合并肺炎患者50例为对照组。采用酶联免疫吸附试验测定血清sFlt-1、sCD14水平,Pearson相关分析血清sFlt-1、sCD14水平与临床资料的相关性,多因素Logistic回归分析卒中患者发生SAP的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sFlt-1、sCD14水平预测卒中患者发生SAP的诊断价值。结果SAP患者血清sFlt-1、sCD14水平高于卒中未合并肺炎患者和单纯肺炎患者(P<0.05);卒中患者发生SAP与年龄、心房颤动、心力衰竭、误吸、吞咽困难、脑干卒中、使用质子泵抑制剂、发热、咳嗽、呼吸困难、低密度脂蛋白胆固醇、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白、白细胞计数、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、临床肺部感染(CPIS)评分有关(P<0.05);相关性分析结果显示,血清sFlt-1水平与sCD14呈正相关(r=0.439,P<0.001),血清sFlt-1、sCD14水平与NIHSS评分、CPIS评分均呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,sFlt-1、sCD14、使用质子泵抑制剂、PCT、吞咽困难、年龄为卒中患者发生SAP的影响因素(P<0.05);ROC曲线结果表明,血清sFlt-1、sCD14联合评估卒中患者发生SAP的曲线下面积高于各项指标单独检测(Z_(sFlt-1-联合)=2.194,P=0.028;Z sCD14-联合=2.310,P=0.002)。结论SAP患者血清sFlt-1、sCD14水平升高,二者联合对预测SAP发生具有较好诊断价值。

靶向c-Met/CD47 CAR-T细胞对卵巢癌细胞的作用

目的体外研究敲减间充质上皮转化因子(c-Met)的表达对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等影响,制备靶向c-Met的嵌合抗原受体T(CAR-T)并观察对卵巢癌细胞的杀伤效能。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(WB)检测卵巢癌细胞系c-Met的表达情况;转染敲减c-Met,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、细胞克隆检测细胞增殖情况;细胞侵袭(Transwell)、细胞划痕检测细胞侵袭、迁移能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况及慢病毒感染细胞的阳性率;CCK-8检测CAR-T细胞在靶细胞刺激下的增殖能力;乳酸脱氢酶(LDH)检测细胞的杀伤率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)的释放情况。建立裸鼠皮下移植瘤模型,注射T、CAR-T、c-Met CAR-T、c-Met/CD47 CAR-T效应细胞组,测肿瘤重量,苏木精-伊红(HE)染色、免疫组化,研究CAR-T细胞对卵巢癌的治疗作用。结果显示SKOV3细胞系c-Met表达量高;与对照组相比,敲减c-Met组细胞增殖、侵袭、迁移能力降低及凋亡率增加;G1、S期降低,G2期增加;流式细胞术检测显示CAR-T、c-Met CAR-T、c-Met/CD47 CAR-T细胞的感染效率分别为97.42%、97.39%、97.35%;CCK-8检测显示c-Met/CD47 CAR-T细胞对靶细胞的增殖潜力显著增强;LDH检测显示c-Met/CD47 CAR-T细胞对靶细胞的杀伤率显著增加;ELISA检测表明SKOV3诱导c-Met/CD47 CAR-T细胞释放更多的IFN-γ和IL-2;皮下注射SKOV3细胞时c-Met/CD47 CAR-T细胞组裸鼠移植瘤重量小于T、CAR-T、c-Met CAR-T细胞组;HE结果显示各细胞治疗组中组织器官均未见生理结构破坏;免疫组化结果显示c-Met/CD47 CAR-T细胞组中c-Met阳性着色较弱。结论c-Met/CD47可作为CAR-T细胞治疗卵巢癌的分子靶点,并能够对c-Met表达越高的卵巢癌细胞靶向识别、杀伤能力越强,同时更能提高增殖能力和细胞因子释放水平。