应用RT-PCR检测香蕉分化芽中黄瓜花叶病毒

通过改进的异硫氰酸胍法提取香蕉分化芽中的总RNA,既经济又满足了RT-PCR的要求。运用RT-PCR两步法和一步法都可从带毒的香蕉分化芽提取的RNA中扩增出739 bp的特异性条带,而阴性对照未扩增出任何条带,并对RT-PCR一步法进行了优化及应用。本研究建立了经济简便的检测香蕉分化芽中黄瓜花叶病毒(cucum-ber m osa ic v irus,CM V)的RT-PCR方法,为灵敏高效的RT-PCR方法在香蕉分化芽检测中的应用奠定了基础。

长期培养的红豆草愈伤组织及其分化芽中染色体变异的研究

对长城１号和埃斯基红豆草在组织培养和原生质体培养中形成的愈伤组织及分化的芽进行了细胞学研究．结果表明，在上述材料中均存在染色体数的变异，其变化范围为７～１１２，主要变异类型是以７为基数的整倍性增减，非整倍性变化的较少．染色体数的变异程度与愈伤组织的性质、培养时间的长短、继代培养中激素的累积浓度以及２，４－Ｄ的浓度有着密切的关系．在丧失分化能力的长城１号红豆草愈伤组织中，正常核型的细胞仅占３３％～３５％；有分化能力的埃斯基红豆草愈伤组织中，正常细胞为４１％～５０％；而在分化的芽中正常细胞数均超过５０％．培养时间越长，激素累积浓度越高，染色体的变异程度越大．在短时间内使用高浓度的２，４－Ｄ进行培养，也可以引起较大的变异．另外。

PP_(333)、BA和NAA对山杨叶柄分化芽增殖和生长的影响

试验表明,BA对山杨叶柄分化芽的增殖和生长影响均显著;NAA对芽的增殖影响不显著,而对生长影响显著。在WPM基本培养基附加0.5ppm BA和0.05ppm NAA的试验条件下,PP_(333)对芽的增殖及高生长均有影响,且高生长影响大于增殖的影响。最佳增殖培养基为WPM+BA_(1.0)+NAA_(0.05)+PP_(333 1.0);高生长最佳培养基为WPM+BA_(0.5)+NAA_(0.1)+PP_(333 0.5)。

水稻愈伤组织诱导及不定芽分化培养体系建立

目的:筛选高效诱导水稻愈伤组织及不定芽分化培养体系的培养基,为水稻基因工程育种奠定基础。方法:以优质水稻品种(润珠香占)成熟胚为外植体,研究成熟胚愈伤组织出愈情况、不同培养基以及植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导及不定芽分化的影响。结果:水稻愈伤诱导培养基出愈率大小为N6>B_(5)>MS>WPM,N_(6)与B_(5)、MS、WPM差异显著;2,4-D浓度愈伤组织诱导率大小为B_(4)>B_(3)>B_(5)>B_(6)>B_(2)>B_(1),B_(4)与各处理组之间差异显著;植物生长物质浓度配比对愈伤组织不定芽分化率大小为T_(5)>T_(7)>T_(6)>T_(1)>T_(8)>T_(3)>T_(2)>T_(4),T_(5)与各处理组之间差异显著。结论:水稻成熟胚愈伤诱导的最佳培养基及2,4-D质量浓度分别为N6、2.0 mg/L;不定芽分化最佳植物生长物质6-BA、KT、NAA质量浓度比为1∶1∶1,不定芽分化率最高。

白术胚轴和胚根直接分化不定芽的再生体系

为了建立白术Atractylodes macrocephala Koidz.通过胚轴、胚根外植体直接分化不定芽的高效离体再生体系,研究了外植体类型、植物生长调节剂种类及质量浓度对不定芽直接分化的影响.研究结果表明,以白术无菌苗的胚轴、胚根为外植体,在分化培养基上可直接诱导不定芽分化,其中胚轴不定芽分化率最高可达91.18%,每个外植体产生芽的数量最高可达13个;诱导不定芽分化的最佳培养基为MS(Murashige and Skoog)+TDZ(thidiazuron)1.5mg/L+NAA(naphthylacetic acid)0.2mg/L.将分化的不定芽培养于附加IBA(indol 3-butiric acid)0.5mg/L的1/2MS培养基中诱导生根,生根率达66.66%以上.本研究为药用植物白术的工厂化育苗和脱病毒以及利用植物基因工程技术进行品质改良提供了有效的再生途径.

不同激素浓度组合对甜叶菊幼叶诱导愈伤和芽分化的影响

为提高甜叶菊的组织培养效率,以甜叶菊幼叶为外植体,研究75%消毒酒精和0.1%氯化汞的不同消毒时间组合对外植体的消毒效果;以及不同激素浓度组合对外植体愈伤组织的诱导和芽分化的影响。结果表明:甜叶菊幼叶外植体材料的最佳灭菌条件为75%消毒酒精30s,0.1%氯化汞2min;最佳诱导愈伤组织和分化芽培养基为MS+1.5mg·L^(-1) 6-BA+0.5mg·L^(-1) NAA,此时不定芽增长率为85.7%,外植体适宜的生根培养基为1/2 MS十0.2mg·L^(-1)IAA,生根率为88.6%。

墨兰根状茎绿芽分化的研究

对影响墨兰根状茎绿芽分化的几个因素进行研究的结果表明 :在基本培养基中添加 5 .0 0mg·L-16 -BA +0 5 0mg·L-1NAA的激素配比 ,绿芽产率高达 1 80 % ,且绿芽生长势旺盛 低剂量 (1和 2Gy ) 60 Coγ -射线辐射可促进根状茎绿芽分化 ,提高绿芽产率和生长势 ;高剂量 (5～ 1 0Gy )辐射则显著降低绿芽产率 ,使其生长势减弱 活性炭完全抑制绿芽分化 。

红掌愈伤组织诱导和芽的分化

对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究。同一成熟度的外植体 ,其叶柄愈伤组织诱导率、芽分化率、分化时间均明显优于叶片。不同放置方式和光照时间对叶片愈伤组织的诱导亦有影响 ,叶背向下放置 ,光照时间 2 4h/d和 10h/d愈伤组织诱导率较高 ,分别为 10 0 %、 97%。光照时间对叶柄愈伤组织诱导无显著影响 ,但光照 2 4h/d和 10h/d较无光照处理的明显促进芽的分化。叶柄培养以N6,KC和 1/2MS培养基为佳。叶片培养则以P ,N6和 1/2MS为好。以未展叶叶柄为外植体 ,从接种到丛芽分化共 4 9d ,较已有报道提前 11～ 31d。

AgNO_3对桑叶片培养不定芽分化的影响

Ag NO3对桑叶片不定芽分化的促进作用因品种而异 ,以新一之濑试管苗幼叶为外植体 ,添加Ag NO31.0～ 2 .0 mg/ L,叶片不定芽分化率为 81.3%～ 87.5 % ;同时芽丛的发生频率明显提高 ,不定芽分化时间提早 5～ 7d.但Ag NO3处理时间宜控制在 10 d之内 ,超过 15 d,分化率降低 。

影响墨兰×兔耳兰根状茎芽分化的因素

以墨兰(Cymbidium sinense)×兔耳兰(Cymbidium lancifolium)种间杂种根状茎为材料,系统研究了基本培养基、植物生长调节剂、有机附加物、切割方式等7种因素对兰花种间杂种根状茎芽分化的影响。结果表明:基本培养基对芽分化影响显著,1/2MS基本培养的平均芽分化率最高。植物生长调节剂对芽诱导率影响不显著,但对平均芽分化率影响显著,在含6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上,平均芽分化率最高,为130.00%。有机附加物对根状茎芽分化有促进作用,添加100mL/L椰子汁显著提高平均芽分化率。活性炭显著抑制根状茎芽分化。30g/L麦芽糖对芽分化有显著的促进作用。切割方式对芽分化影响显著,掰断效果最好,不切割次之,切成1cm最差。光照强度对根状茎芽分化影响显著,适宜的光照强度为500lx。

影响桑树叶片培养不定芽形态分化主要因素的研究

以ＭＳ为基本培养基，探讨了植物激素、ｐＨ值、糖类、琼脂含量及桑树品种、外植体六因素对桑树叶片培养不定芽形态分化的影响，明确了植物激素是控制不定芽分化的决定因素，以ｐＨ５．６、琼脂６ｇ／Ｌ、葡萄糖２０ｇ／Ｌ为宜，桑树品种间不定芽分化率差异极显著，外植体以试管植株叶片分化率为高，田间植株叶片培养从桑树脱苞至停止生长前皆可进行。叶片不定芽分化率已达９６％。

红掌不同外植体愈伤组织诱导与不定芽分化的研究

以红掌3个不同部位的材料(叶片、叶柄、茎段)为接种外植体,对红掌的离体培养技术进行了初步的研究。结果表明,不同部位对愈伤组织诱导差异显著,其中叶柄诱导率最高,达到86.7%,为最佳取材部位。诱导愈伤组织培养基以M S+6-BA 2.0 m g.L-1+2,4-D 0.2 m g.L-1为最好;M S+BA 2.0 m g.L-1+NAA 0.25 m g.-L 1对不定芽分化效果良好。

不同激素组合对番茄芽分化率的影响

以宇番一号和0949-46为试验材料,通过对子叶和下胚轴的离体培养,研究不同激素浓度组合对番茄芽分化率和根形成的影响。结果表明,诱导子叶出芽的最佳激素组合是ZT 2.0 mg·L-1+IAA 0.2 mg·L-1,诱导下胚轴出芽的最佳激素组合是6-BA 2.0 mg·L-1+IAA 0.2 mg·L-1,两个品种子叶的芽分化率都高于下胚轴芽分化率。有利于根形成的最佳IAA浓度是0.2 mg·L-1。该研究为番茄再生体系及与其相关各领域的研究提供理论依据。

药用植物款冬花芽分化过程观察

实验以不同生长发育阶段的款冬花序芽突起为材料,通过制作石蜡切片,在显微镜下观察款冬花序芽分化各阶段的形态特征。结果表明:款冬花序芽从7月上旬开始花序(盘)分化至十月初小花胚珠分化完成,分化时期可分为分化前期、花盘形成期、花原基分化期、中央花(筒状)花瓣原基分化期、中央花雄蕊原基分化期、中央花雌蕊原基分化期、边缘花(舌状)花瓣原基分化期、边缘花雌蕊原基分化期、中央花花粉分化形成期、子房胚珠分化期共10个时期,阐明了款冬花序芽分化各时期与生长时间的关系。

影响红掌愈伤组织诱导、增殖和芽分化的因素

以P ink champ ion等盆栽植株和试管苗为材料,研究了影响红掌愈伤组织诱导、增殖和芽分化的因素。结果表明,不同品种的愈伤组织诱导率和外植体褐变率均存在显著差异,诱导率和褐变率之间呈显著的负相关关系。外植体、外源激素和培养基对愈伤组织的诱导有显著影响,不同品种和外植体的适宜诱导培养基不同。光照对愈伤组织的诱导有显著的抑制作用;高浓度生长素、低浓度细胞分裂素,促进愈伤组织的增殖,高浓度细胞分裂素及低浓度生长素促进愈伤组织芽分化;固体培养比液体培养更有利于愈伤组织的增殖和芽分化。

桑树叶片愈伤组织的诱导及不定芽分化影响因素的研究

通过正交试验,探讨了植物生长调节剂噻二唑苯基脲(Th id iazuron,TDZ)、α-萘乙酸(NAA)、桑品种、叶龄、叶位等5种因素对桑树叶片愈伤组织诱导的影响。筛选出了桑树叶片愈伤组织诱导的最佳条件为:21 d苗龄的陕305组培苗叶片,培养基MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。在此条件下,陕305愈伤组织诱导率可达93.9%。对得到的陕305叶片愈伤组织进行了不定芽分化诱导,结果表明,最佳分化培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+2%果糖,愈伤组织不定芽分化率高达100%。

长白落叶松愈伤组织诱导与不定芽分化

以长白落叶松成熟胚作为外植体进行消毒和不定芽诱导。研究结果表明:将去皮种子用流水冲洗3d,用70%酒精消毒1min,转入1%的次氯酸钠消毒50min后,再将剥出的胚放入0.5%的次氯酸钠中浸泡2s为最佳消毒方法;在光照条件下(约1600lx),BM培养基中填加1.0mg/LBA,愈伤组织与不定芽的诱导效果最好,愈伤组织诱导率达到100%,不定芽分化率为73.8%;在BM培养基中加入1%活性碳对不定芽有伸长作用。

盐桦(Betula halophila)愈伤组织的高效诱导和不定芽的分化

设计不同激素、不同水平的单因子试验和正交试验,统计盐桦出愈率、分化率,筛选出诱导盐桦愈伤组织的最适外植体和最适培养基。盐桦愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适外植体为茎段;诱导愈伤组织的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.4;愈伤组织分化抽枝的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L;高效诱导愈伤组织和不定芽分化的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。琼脂7%,蔗糖浓度20 g/L。愈伤组织诱导率和不定芽分化率分别达到82%和93.6%以上。

向日葵(Helianthus annus)的组织培养及芽分化研究

以向日葵不同品种 (系 )为材料 ,进一步研究了向日葵离体培养的必要条件 ,讨论了基因型、日龄、外植体类型、激素组合及配比对向日葵再生能力的影响。