地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis)AS10 10 6α 乙酰乳酸脱羧酶经硫酸铵沉淀 ,聚乙二醇沉淀 ,DEAE SepharoseFastFlow离子交换 ,GigapiteK 10 0S柱层析及SephadexG 10 0分子凝胶过滤柱等分离纯化步骤 ,得到SDS PAGE电泳纯 ,α 乙酰乳酸脱羧酶的比活提高了 5 3.5倍。对该酶性质的研究表明 ,酶单亚基分子量为 32Kda ,等电点为 4 .5 ;该酶的最适反应温度为 4 0℃ ,最适反应 pH为 6 .0 ,对热 (40℃以上 )敏感 ,在 pH5 .0～ 6 .5之间稳定。酶活不需要金属阳离子 ,Cu2 +、Co2 +强烈抑制酶的活性。摇瓶实验表明 ,纯化的地衣芽孢杆菌α