单分子光谱检测法的新进展

自上世纪 90年代以来 ,单分子检测已经取得了巨大的进步。它提供了大量非平衡体系中个体或平衡态脉动体系的信息 ,而这些信息是无法从传统的统计测量中获得的。本文主要介绍近 1 0年来 ,单分子光谱检测技术从低温到室温、从非溶液介质到水溶液、从固体到活细胞。

运用分子生物检测法 提高柑橘黄龙病检测效率

柑橘黄龙病属于全球范围内一种破坏性较强的病害,做好早期诊断工作,寻求更加准确、便捷、高效的检测技术,对于防范此病具有非常重要的意义。对于柑橘黄龙病的传统检测方法而言,田间诊断最为简单且省时,但因为黄龙病的症状较为复杂,同时很可能和其他病症混淆,因此仅能作为初步诊断法;而选择显微镜观察法对于样本的选取存在一定限制,可能存在漏检的情况;血清鉴别技术因为单克隆抗体专一性较强,无法适用于不同地区的黄龙病菌变异菌株,也容易存在漏检的问题,必须综合选择不同的单抗组合;DNA杂交判别法依靠核酸检测更加便捷灵敏,但检测成本相对较高,不适合大规模推广,因此近年来,分子生物学检测法已在柑橘黄龙病检测中应用得较为成熟。

二恶英分子生物学检测方法

二恶英类化合物的检测是现代化合物检测的重点和难点,现在二恶英化合物的标准检测方法为高分辨气相色谱-质谱法。但色谱-质谱法费用昂贵、耗时,对试验设备和人员要求高,因此发展了一些其他快速、低廉的检测方法。作者着重介绍了能快速、简便、低廉及高通量检测二恶英类化合物的分子生物学检测方法,并将报告基因法中的化学活性荧光素酶表达法(CALUX)和体外DNA结合法中的凝胶阻滞电泳生物检测法(GRAB)进行了比较。提出了各种方法的优缺点,为发展新的二恶英生物检测法提供了依据。

抗草铵膦转基因水稻品种的快速检测方法的比较

用种子萌发生测法和分子检测法分别检测抗草铵膦转基因水稻品种 ,比较这两种方法的优劣。种子萌发生测法以芽长作为指标优于根长 ,草铵膦处理浓度可在 10mg/L～ 10 0mg/L之间。分子检测用引物对 5′ ACCATCGTCAACCACTACATCG 3′和 5′ GCTGCCAGAAACCCACGTCAT 3′或 5′ ACCATCGTCAAC CACTACATCG 3′和 5′ GAGGTCGTCCGTCCACTCCTG 3′均可扩增导入的bar基因的特异DNA片段。种子萌发生测法具有简单、易操作特点 ,而分子检测法则具有快速、专一性强、灵敏度高等特点。

禾草内生真菌检测方法研究进展

从最初发现黑麦草(Lolium perenne)和高羊茅(Festuca arundinacea)引起家畜中毒到后来其携带的内生真菌被发现,以及进一步的研究证实,内生真菌的存在不但导致家畜中毒而且能显著提高宿主在群落中的竞争力,也因禾草内生真菌的这种重要生理和生态作用,使其逐步成为国内外研究的热点之一,这也给内生真菌检测技术的发展提供了契机。初期主要是借鉴病原真菌等微生物检测的一些较成熟的方法,对禾草内生真菌进行染色镜检或分离检测,但容易受宿主种类、物候期、检测部位等因素的影响,造成检测结果的不准确。随着分子生物学、遗传学等学科的快速发展,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR法(realtime PCR)等现代分子技术在禾草内生真菌方面的应用和改进,使得内生真菌的检测方法不断推陈出新,这些方法能在一定程度上对传统检测方法给予有效的补充。快速有效的确定禾草内生真菌的存在、分布规律、分类地位等,需要准确合理地选择特异性较强的检测方法,例如定性或定量检测,并结合经典的染色镜检和分离法对禾草内生真菌进行确定。本研究对以上内容进行了综述,以期更深层次的借鉴和发展关于其它微生物的经典检测方法,同时开发具有禾草内生真菌特异性的检测技术,这些技术不仅能够鉴定内生真菌存在与否,而且能对内生真菌进行定量和活性的检测,是发展的重要方向和热点。对内生真菌定性、定量和活性的检测是未来值得研究的重点。

食品中单增李斯特菌检测技术研究进展

单增李斯特菌是一种重要的人畜共患食源性致病菌,如何有效控制食品(尤其是即食食品)中的单增李斯特菌,是食品安全的重要任务,其中快速、准确的检测技术是关键因素之一。作者对单增李斯特菌的传统检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法进行综述,并对目前国内单增李斯特菌检测过程中所存在的问题进行探讨,以期为今后的研究提供参考。

单增李斯特菌检测技术研究进展

单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种人畜共患食源性致病菌,可使人畜患脑膜炎、心肌炎、败血症、早产等疾病,危害较大。有效控制食品中的单增李斯特菌,是食品安全的重要课题之一。本文对单增李斯特菌的主要检测技术,如传统分离鉴定、免疫法、分子生物学法、全自动微生物分析系统、生物传感器检测作了简要叙述,为深入研究提供参考。并对我国单增李斯特菌的检测监控进行了展望。

结核分枝杆菌耐药检测方法的研究进展

结核分枝杆菌的耐药问题已成为新世纪结核病控制的难题之一。该菌耐药检测的方法有常规方法和分子生物学方法。其中常规方法有显微镜观察法、菌体药敏法、流式细胞术法、微量快速显色药敏检测法;分子生物学方法主要包括直接测序法、高分辨熔解曲线分析法、多重聚合酶链反应单链构象多态法、多重等位特异聚合酶链反应检测法、分子信标法、线性探针杂交法和基因芯片技术等。

食品及饲料中二噁英类物质快速检测研究进展

本文着重介绍了能快速、简便、低廉及高通量检测二口恶英类化合物的分子生物学检测方法,为发展新的二口恶英生物检测法提供了依据。

同型半胱氨酸及其不同检测方法在缺血性脑血管病中的价值

目的探讨不同方法检测的同型半胱氨酸(Hcy)水平与缺血性脑血管疾病发生的相关性。方法采用2种不同方法分别检测72例缺血性脑血管病患者(观察组)入院时血清Hcy水平及相匹配的60名我院健康体检者(对照组)Hcy水平,比较2组间及不同检测方法的Hcy水平差别。结果观察组血浆Hcy水平明显高于对照组(P<0.05),且不同的检测方法对阳性率有所影响。结论血清Hcy水平升高是缺血性脑血管病发生发展的重要因素之一,用色烯分子通过比色分析法对Hcy的检出应用价值更大。

浅谈快速检测技术在食品微生物检测中的应用

食品微生物含量过高是导致食品安全出现问题的主要原因,对人类的健康十分不利。基于此,本文主要介绍了色谱法、免疫学检测法、分子生物学检测法3种快速检测技术,并分析了技术的优势。重点以高效液相色谱法为例,从实验的角度出发,对其在水产品微生物检测中的应用方法进行了研究。通过对研究结果的观察,证实了快速检测技术的应用价值。

HPSEC-ELSD法同时测定白及多糖的分子量和含量

目的:建立同时测定白及多糖的分子量及其含量的方法。方法:采用高效分子排阻色谱-蒸发光散射检测(HPSEC-ELSD)法。色谱柱为TSK-GEL G4000 PWXL,流动相为纯水,流速为0.6 m L/min,柱温为30℃,进样量为20μL,采用蒸发光散射检测器。采用建立的方法测定3批白及多糖的分子量及其含量。结果:白及多糖的重均分子量测定线性范围为24.17~178.00 k D(R^2=0.985 5),BT07含量测定线性范围为0.508 0~5.080 mg/m L(R^2=0.998 4),检测限、定量限分别为0.116 5、0.274 0 mg/m L,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%(n=6或n=7);白及多糖样品含量测定平均加样回收率为99.16%~100.20%(RSD=0.39%~0.64%,n=9)。3批样品的平均保留时间为14.28 min(RSD=4.35%,n=3),平均重均分子量为23.54 k D(RSD=3.78%,n=3),多分散系数(D,MW/Mn)范围为1.463~1.578,样品平均含量为93.4%(RSD=4.22%,n=3)。结论:建立的HPSEC-ELSD法操作简便、快速,结果准确可靠,可同时测定白及多糖的分子量和含量。

碳青霉烯酶的耐药机制及检测方法的研究进展

碳青霉烯耐药革兰阴性菌(CR-GNB)感染日趋严峻,其多重耐药性导致可利用的治疗药物相对较少,患者死亡率较高,已被美国疾病预防与控制中心列为抗菌素耐药严重威胁[1-2]。2012年-2013年美国一项社区流行病调查中,CR-GNB感染患者的死亡率为9%[3]。而在免疫缺陷的患者CR-GNB感染的死率更高,实体或血液肿瘤患者住院期间因CR-GNB感染导致菌血症或者感染性休克的死率高达56%~61.4%,12%~72%的患者在确诊感染时处于粒细胞缺乏期[4-5]。因此,为了更好地应对CR-GNB带来的威胁,了解CR-GNB的耐药机制及基于耐药机制的检测方法可以为临床医生选择合理准确的治疗方案提供新的思路。

在线质谱走航系统在化工园区大气痕量特征污染物的溯源应用

文章主要研究了基于离子分子反应质谱的走航观测系统应用于化工园区大气痕量特征污染物溯源分析的可行性,通过与便携式气相色谱-质谱联用仪、实验室Tenax采样管富集-热解析气相色谱仪的定性定量比对分析,以及化工园区现场走航观测实例应用,得出离子分子反应质谱仪走航观测系统具有相关线性好、检出限低、精密度好、准确度高的特点,能定性定量监测苯、甲苯、二甲苯、乙苯、异丙苯、乙烯、环氧乙烷、苯酚、丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯腈、硫化氢、甲硫醇、甲硫醚和甲醇等大气污染物,可用于石油化工园区大气痕量特征污染物的源解析中的应用。

食品中单增李斯特菌的检测新技术

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种人畜共患食源性致病菌,可使人畜患脑膜炎、心肌炎、败血症、死婴、早产等疾病,危害较大;有效控制食品中的LM,是食品安全的重要课题之一。对以免疫学、分子生物学为基础建立的一些方法,如酶联免疫吸收分析法(ELISA)、酶联荧光分析法(ELFA)、DNA探针、PCR、DNA微矩阵法,作一简单叙述,为深入研究提供参考。最后指出预防手段非常重要,从源头上杜绝LM污染是关键。

端粒酶的激活与胃癌进展关系的研究

目的 探讨胃腺癌组织中端粒酶的活性与胃癌进展的关系。方法 采用端粒酶原位分子杂交检测法对 4 5例原发性胃腺癌及 4 0例癌旁正常黏膜组织中端粒酶活性进行原位检测。结果 4 5例原发性胃腺癌组织中 ,38例端粒酶呈阳性表达 ,其中早期胃癌阳性率为 6 6 6 % ,中晚期为 93 3%。 4 0例癌旁正常黏膜组织中仅 2例呈阳性表达。晚期胃腺癌组织中端粒酶阳性表达率显著高于早期胃腺癌 (P <0 0 5 )。虽然胃腺组织中端粒酶的表达随分化程度的降低与浸润深度的增加而增强 ,但其表达上的差异均无显著性 (P均 >0 0 5 )。结论 虽然胃腺癌组织中端粒酶的表达与肿瘤分化程度及浸润深度无关 ,但中晚期胃腺癌中的表达水平高于早期胃癌的事实 。

棉铃虫田间种群Bt抗性监测方法综述

迫于苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)毒素的选择压力,棉铃虫(Helicoverpa armigera)田间种群对Bt毒素产生了抗性。为了研究棉铃虫田间种群Bt抗性,研究者们开发出了一系列棉铃虫抗性监测技术。本文介绍了用于棉铃虫Bt抗性监测常用的生物测定法和分子检测法的原理、应用及优缺点等。虽然目前棉铃虫田间种群Bt抗性监测多采用以F_(1)代筛选法和F_(2)代筛选法为代表的生物测定法,但分子检测法正以其优势在棉铃虫Bt抗性检测中占据越来越重要的位置。本综述期望为读者选择合适的棉铃虫Bt抗性监测方法提供参考和建议。