医学研究生分子细胞生物学技术实验课的探索与改革

分子细胞生物学是在分子水平研究细胞生命活动基本规律的前沿学科。在研究生教学中开设分子细胞生物学技术实验课,可以有效地提高研究生科研思维及动手能力。为此,中国医科大学分子细胞生物学教研室在研究生选修课教学中设置了分子细胞生物学技术实验课。通过系统理论讲授与实验操作相结合的方式,不仅启迪了研究生(特别是临床型研究生)的科研思路,同时通过研究生亲自参与分子克隆、细胞培养、荧光素酶双报告基因检测等实验操作及数据分析,提高了研究生的动手操作和科研分析能力,为研究生未来的科学研究奠定了基础。

金属毒性研究(Ⅱ)

在考察了金属离子对细胞酶活性和细胞代谢能力影响的基础上,进一步研究了金属离子对细胞抗毒机构的玻坏和金属离子对细胞DNA,RNA合成功能的限制.利用细胞生物学技术从定量和定性两个方面探讨Cr(Ⅲ),Cr(Ⅵ),Ni,Al,Ag,和V金属离子对生命组织的毒性作用.研究发现,Cr(Ⅵ)对细胞DNA,RNA合成限制最为显著,Ni和V金属离子在同等水平上妨碍RNA合成,随着离子浓度增加,Cr(Ⅲ)离子对细胞DNA及RNA限制增大.Al离子对RNA合成限制大于对DNA合成.Ag离子对细胞DNA,RNA合成的限制作用相同.细胞谷胱甘肽(GSH)还原能力是细胞最重要的解毒机构,也是细胞中防御毒性物质最关键因素.细胞GSH还原能力度量分析表明:微量的Cr(Ⅵ)即可导致细胞GSH下降.金属Ni离子破坏细胞骨架,使细胞内信息传递受阻,亦表现较强毒性.

金属毒性研究(Ⅰ)

细胞毒性分析是评定生物材料相容性实验标准(ASTM,ISO)中极为重要的项目.作者采用体外细胞培养模式,研究了构成金属和合金生物材料的金属离子(Al,Ni,Cr,V,Ag)的毒性.通过测定细胞碱式磷酸酶(ALP)活性及细胞四甲基偶氮唑盐(MTT)还原能力,对现行的常用金属生物材料的毒性进行了定量评估,进而探讨金属离子或原子对人体组织的毒害和腐蚀作用.研究结果表明,微量六价铬离子即表现出强烈的细胞毒性.当溶液离子浓度高于100μmol/L时,钒和三价铬亦表现强烈毒性.银离子浓度高于500μmol/L后表现毒性.引起老年痴呆病的金属铝离子的毒性具有双向性(Biphase).当浓度低于10μmol/L时,铝离子刺激细胞增殖;浓度处于10～1000μmol/L,参数持平,当浓度高于800μmol/L时,毒性增加.此外,作者详细介绍了细胞培养、细胞病毒基因转染、测定细胞碱式磷酸酶活性及细胞四甲基砜还原能力测定等细胞分子生物学技术.