目的评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果。方法选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及...目的评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果。方法选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及传统药敏试验绝对浓度法测定痰标本中结核分枝杆菌对利福平的敏感性,并进行了比较。结果32份痰标本中结核分枝杆菌,采用RCA法24株可检测到rpoB基因突变,其中23株单位点突变(516位2株,526位12株,531位9株),l株516位和526位联合突变,与直接测序结果均一致。32份痰标本的RCA方法检测与DNA测序结果和药物敏感性试验进行对比,28株结果均一致。4株结果不一致,其中2株RCA及测序无突变,药敏结果显示为耐药;2株RCA及测序显示有突变,药敏结果显示为敏感。结论RCA法用于痰标本中直接检测结核分枝杆菌对利福平的敏感性,同直接测序法结果一致,同传统药敏试验相比,RCA法能够大幅度节省时间,具有很好的临床应用和推广前景。展开更多
文摘目的评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果。方法选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及传统药敏试验绝对浓度法测定痰标本中结核分枝杆菌对利福平的敏感性,并进行了比较。结果32份痰标本中结核分枝杆菌,采用RCA法24株可检测到rpoB基因突变,其中23株单位点突变(516位2株,526位12株,531位9株),l株516位和526位联合突变,与直接测序结果均一致。32份痰标本的RCA方法检测与DNA测序结果和药物敏感性试验进行对比,28株结果均一致。4株结果不一致,其中2株RCA及测序无突变,药敏结果显示为耐药;2株RCA及测序显示有突变,药敏结果显示为敏感。结论RCA法用于痰标本中直接检测结核分枝杆菌对利福平的敏感性,同直接测序法结果一致,同传统药敏试验相比,RCA法能够大幅度节省时间,具有很好的临床应用和推广前景。