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滚环扩增技术直接检测痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的初步研究
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作者 杨雯 王彬 +2 位作者 郝兰虎 陈效友 陆宇 《结核病与胸部肿瘤》 2015年第1期9-15,共7页
目的评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果。方法选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及... 目的评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果。方法选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及传统药敏试验绝对浓度法测定痰标本中结核分枝杆菌对利福平的敏感性,并进行了比较。结果32份痰标本中结核分枝杆菌,采用RCA法24株可检测到rpoB基因突变,其中23株单位点突变(516位2株,526位12株,531位9株),l株516位和526位联合突变,与直接测序结果均一致。32份痰标本的RCA方法检测与DNA测序结果和药物敏感性试验进行对比,28株结果均一致。4株结果不一致,其中2株RCA及测序无突变,药敏结果显示为耐药;2株RCA及测序显示有突变,药敏结果显示为敏感。结论RCA法用于痰标本中直接检测结核分枝杆菌对利福平的敏感性,同直接测序法结果一致,同传统药敏试验相比,RCA法能够大幅度节省时间,具有很好的临床应用和推广前景。 展开更多
关键词 分枝杆菌.结核 滚环扩增 利福平 药物敏感性
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人类免疫缺陷病毒合并结核分枝杆菌感染者的抗结核细胞免疫功能 被引量:5
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作者 许云亚 胡海燕 +7 位作者 张舒 盛红 邵凌云 孟威艳 王莹 黄玲莉 王昀 张文宏 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期468-472,共5页
目的评价HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染或合并活动性结核患者的抗结核细胞免疫功能。方法应用早期分泌性抗原靶蛋白(ESAT)-6和培养滤出蛋白(CFP)-10诱导的结核酶联免疫斑点法对云南地区100例明确诊断的HIV感染者的血液标本进行结核... 目的评价HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染或合并活动性结核患者的抗结核细胞免疫功能。方法应用早期分泌性抗原靶蛋白(ESAT)-6和培养滤出蛋白(CFP)-10诱导的结核酶联免疫斑点法对云南地区100例明确诊断的HIV感染者的血液标本进行结核分枝杆菌特异性T淋巴细胞检测,同时应用流式细胞仪检测外周血CD3-CD4-T淋巴细胞和CD3^+CD8^+T淋巴细胞的绝对计数水平。采用Mann-Whitney检验进行非参数统计分析。结果临床上无活动性结核感染证据的HIV感染者中合并结核分枝杆菌潜伏感染的感染率高达67.6%。HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染者的外周血CD3-CD4-T淋巴细胞(532×10^6/L)和CD3-CD8-T淋巴细胞(473×10^6/L)绝对计数与单纯HIV感染者(406×10^6/L和504×10^6/L)相比,差异无统计学意义。HIV合并活动性结核感染者的外周血CD3^+CD4^+ T淋巴细胞绝对计数平均值为189×10^6/L,CD3^+CD8^T淋巴细胞绝对计数平均值为293×10^6/L,均显著低于单纯HIV合并结核潜伏感染组和HIV组(=168.0,U=163.0;U=147.0,U=374.0;均P〈0.01)。HIV合并活动性结核感染者的ESAT-6和CFP-10抗原特异性斑点形成细胞数(31/10^6细胞和82/10^6细胞)显著低于HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染者(92/10^6细胞和109/10^6细胞,U=507.0.U=529.5,均P〈0.01)。结论我国无活动性结核临床证据的HIV感染人群中有较高的结核潜伏感染率。HIV合并活动性结核感染者的总体细胞免疫应答功能及特异性抗结核免疫应答功能均严重受损。 展开更多
关键词 HIV 分枝杆菌.结核 酶联免疫斑点技术 流式细胞术 免疫 细胞
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958例结核病患者临床分离株耐药基因检测结果分析 被引量:4
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作者 崔晓利 杨翰 +3 位作者 邬霞 郑丹 尤振宇 党丽云 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2019年第5期541-545,共5页
目的分析958例患者结核分枝杆菌的相关基因突变位点。方法收集2017年1-12月西安市胸科医院对痰液、组织、胸腹腔积液等各类型临床标本进行分枝杆菌培养阳性的2718例患者的菌液,经菌种鉴定非结核分枝杆菌感染患者-11例.结核分枝杆菌感染... 目的分析958例患者结核分枝杆菌的相关基因突变位点。方法收集2017年1-12月西安市胸科医院对痰液、组织、胸腹腔积液等各类型临床标本进行分枝杆菌培养阳性的2718例患者的菌液,经菌种鉴定非结核分枝杆菌感染患者-11例.结核分枝杆菌感染患者2677例.选择结核分枝杆菌菌种同时进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)和耐药基因检测的患者958例.分析不同性别、年龄组患苕的结核分枝杆菌菌株间突变位点差异及突变位点与表型药敏试验检测结果的符合率。计数资料采用x^2检验,以PV0.05为差异有统计学意义。结果958例患者菌株的基因突变位点分析中,任一位点突变率为19.52%( 187/958).5~、21~、41~、61~83岁各年龄组的菌株mpB基因位点突变率分别为7. 89%(9 114) J3. 52%(63/466)、18. 27%(38/208)和9.41;(16 170)。不同年龄组中.中年组的mpB基因位点突变率与青少年组和老年组比较差异有统计学意义(x^2值分别为6.358和5.994. P值分别为0.013和0.018);男性任一位点突变率为19. 45%(121 622).女性为19. 05%(61 336),不同性别比较差异无统计学意义(x^2=0. 023.P=0. 932);突变位点与表型药敏试验的符合率以利福平 ropB 531(C-T)(96. 10%,74/77)、异烟肼 katG 315(6-0(98. 45%, 127/129)最高.但 ropB 51KT-C)与利福平表型药敏试验结果相符率较差(0.00%.0/10)。结论不同年龄组患者的菌株基因位点突变率差异有统计学意义.中年组突变率最高;不同性别患者的突变率差异无统计学意义;应当结合表型药敏试验的检测结果进行耐药基因位点突变在诊断意义上的分析。 展开更多
关键词 分枝杆菌.结核 微生物敏感性试验 分子探针技术 点突变 对比研究
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