雪旺细胞分步消化培养及其纯化实验研究

目的:探讨双酶分步消化法从乳兔周围神经中分离培养雪旺细胞,以及纯化获得高纯度的雪旺细胞的方法。方法:采用出生1周内乳兔的坐骨神经,先用胰蛋白酶消化分离出一部分细胞,移出后,再予胶原酶消化分离其余的细胞,计算上两步消化后的活细胞的百分率,另外采用:(1)无任何处理;(2)单纯双30min差速贴壁;(3)Ara-c;(4)Geniticin纯化法,以及后3种方法联合应用进行纯化,计算雪旺细胞的纯度。结果:采用分步消化法所得到的活细胞百分率分别为96.5％以上和95％以上,无任何处理的雪旺细胞纯度为85％,单纯双30min差速贴壁纯度为90％,Ara-c纯化的纯度为91％,Geniticin纯化的纯度为95％,(2)、(3)、(4)方法的联合应用纯化的纯度为98％。结论:双酶消化法和联合应用双30min差速贴壁、Ara-c、Geniticin纯化是获取高纯度雪旺细胞的理想方法。