两种汉逊酵母细胞高压匀浆破碎方式的比较

目的比较分步和循环2种高压匀浆破碎方式对汉逊酵母细胞的破碎效果,以期为今后汉逊酵母细胞工业化规模生产破碎方式的选择提供实验依据。方法采用分步和循环2种高压匀浆破碎方式对3批汉逊酵母细胞浓缩发酵液进行破碎,取破碎前后样品,置光学显微镜下观察细胞形态,检测宿主蛋白含量、细胞破碎率、蛋白释出度、释出蛋白粒径分布等指标,并进行比较。结果分步和循环破碎2种高压匀浆破碎方式破碎3批汉逊酵母细胞浓缩发酵液后,完整细胞数量减少,细胞碎片增多,但细胞形态未见明显差异;宿主蛋白含量(平均灰度值分别为115.259和109.125)、细胞破碎率(均值分别为60.29%和58.96%)、蛋白释出度(均值分别为39.55%和37.28%)、释出蛋白粒径分布(分步方式破碎后释出蛋白粒径平均分布在90.41和525.07 nm处,分别占样品蛋白含量的31.37%和68.63%;循环方式破碎后释出蛋白粒径平均分布在109.11和547.37 nm处,分别占样品蛋白含量的29.93%和70.07%)的差异均无统计学意义(F分别为1.054、1.159、4.245、8.875,t分别为1.0360、0.5041、0.6050、0.1397,P均<0.05)。结论循环和分步2种高压匀浆破碎方式对汉逊酵母细胞的破碎效果相当,但循环破碎方式更简便,且可避免污染风险,更适用于工业化规模生产汉逊酵母细胞的破碎。