分泌型卷曲相关蛋白2在肿瘤中的研究进展

分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)2是卷曲蛋白家族成员,广泛存在于细胞外基质中。SFRP2作为经典WNT通路的抑制剂及非经典WNT通路的激活剂,参与胚胎发育、骨形成、心肌重构、心肌纤维化和肿瘤等生理、病理过程。近年来有研究表明,SFRP2既可以作为肿瘤抑制因子,抑制实体瘤及非实体瘤细胞的增殖,也可以促进肿瘤血管生成,有利于肿瘤细胞的生长和转移,因此成为抗肿瘤血管生成的治疗靶点。目前,关于SFRP2在肿瘤中发挥促癌作用还是抑癌作用尚无定论。因此,本文对SFRP2在肿瘤中的研究进展进行综述。

分泌型卷曲蛋白2和β-链蛋白对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的观察分泌型卷曲蛋白2（sFRP2）和β-链蛋白（β-catenin）对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法构建包含sFRP2蛋白全长的pcDNA3．1质粒，进行质粒转染，使得sFRP2在HCT116细胞中的表达上调；通过Western blot实验检测转染后HCT116细胞中sFRP2的表达水平；行细胞计数试剂盒（CCK-8）实验检测sFRP2表达上调后对结直肠癌细胞增殖能力的影响；采用划痕实验，检测sFRP2表达上调后对结直肠癌细胞迁移能力的影响；通过Transwell实验，检测sFRP2表达上调后对直肠癌侵袭能力的影响。结果转染后sFRP2及β-eatenin在胃癌细胞中的表达水平明显升高，sFRP2蛋白与β-肌动蛋白（β-aetin）比值为0．62±0．03比0．21±0．02（t=25．430，P=0．001），β-eatenin蛋白与β-actin比值为0．32±0．02比0．17±0．01（t=15．000，P=0．001），差异均有统计学意义；测量sFRP2转染组、对照组和空载质粒组在12、24、36、48、60h的吸光度值，分别为0．213±0．015比0．215±0．018比0．218±0．012、0．345±0．053比0．351±0．041比0．362±0．038、0．382±0．058比0．413±0．051比0．433±0．048、0．441±0，079比0．503±0．033比0．534±0．053、0．482±0．034比0．594±0．045比0．628±0．062，sFRP2转染组与对照组及空载质粒组比较（12h：t=0．016，P=0．988和t=0．041，P=0．970；24h：t=0．155，P=0．884和t=0．452，P=0．675；36h：t=0．695，P=0．525和t=1．173，P=0．306；48h：t=1．254，P=0．278和t=1．693，P=0．166；60h：t=3．440，P=0．026和江3．576，P=0．023），细胞增殖速度明显减慢；以空白组0h和48h划痕两侧距离之差作为标准，空白组、空载质粒组、sFRP2转染组分别为1．00±0．00、0．91±0．06、0．61±0．04、sFRP2转染组划痕两侧距离比空白组、空载质粒组较远，迁移速度明显较慢（t=16．890，P=0．001和t=7．206，P=0．002）；sFRP2转染组透膜（75．69±7．19）个，对照组透膜（195．39±8．68）个，sFRP2转染组透膜细胞数明显少于对照组（t=25．459，P=0．001），表明细胞侵袭能力显著下降。结论sFRP2的上调明显抑制了HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭。

粪便硫酸类肝素蛋白多糖2与分泌型卷曲相关蛋白2基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用价值

目的:研究粪便硫酸类肝素蛋白多糖2(SDC2)与分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因甲基化检测在结直肠癌(CRC)筛查中的应用价值。方法:选取CRC患者51例为CRC组。选取同期进展期腺瘤患者61例为进展期腺瘤组,选取同期健康体检者50例为正常对照组。采集所有受试者粪便样本,以甲基化特异性PCR法检测粪便SDC2及SFRP2基因甲基化情况。比较各组粪便SDC2及SFRP2基因甲基化情况。分析粪便SDC2及SFRP2基因甲基化与CRC患者临床病理特征的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析粪便SDC2及SFRP2基因甲基化检测筛查CRC的效能。结果:CRC组患者粪便SDC2及SFRP2基因甲基化率高于进展期腺瘤组和正常对照组,且进展期腺瘤组粪便SDC2及SFRP2基因甲基化率高于正常对照组(均P<0.05)。TNM分期Ⅲ-Ⅳ期CRC患者粪便SDC2及SFRP2基因甲基化率高于Ⅰ-Ⅱ期患者(均P<0.05)。而性别、年龄、病变部位、肿瘤大小以及分化程度均与CRC患者粪便SDC2及SFRP2基因甲基化无相关性(均P>0.05)。ROC曲线分析显示,粪便SDC2及SFRP2基因甲基化单项检测筛查CRC的效能较高,且两者联合检测的效能高于单项检测。结论:粪便SDC2及SFRP2基因甲基化检测有助于筛查CRC,两者联合检测的筛查效能更高。

分泌型卷曲相关蛋白2抑制人结直肠癌细胞系SW480的增殖和迁移

目的探究分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)抑制人结直肠癌细胞系SW480增殖、迁移的分子机制。方法在人正常结肠上皮细胞HCoEpiC和结直肠癌细胞系SW480中采用Western blot和RT-qPCR检测SFRP2的表达;构建shSERP2稳转SW480细胞株;在shNC SW480和shSFRP2 SW480细胞中采用Western blot和RT-qPCR检测SFRP2、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和Twist的表达;HIF-1α抑制剂(IDF-11774)刺激shSFRP2 SW480细胞后,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭。结果SW480细胞中SFRP2的表达量低于HCoEpic细胞(P<0.01);敲降SFRP2后,SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力显著提高(P<0.001);而细胞内HIF-1α和Twist表达水平显著提高(P<0.01);HIF-1α抑制剂(IDF-11774)刺激后,其增殖、迁移、侵袭能力显著回降(P<0.001)。结论SFRP2通过调控HIF-1α-Twist信号轴发挥其抑癌作用。

分泌型卷曲相关蛋白2基因启动子区甲基化水平与左侧乳腺癌术后放射治疗早期心脏毒性的相关性分析

目的 探讨分泌型卷曲相关蛋白2(secreted frizzle-related protein 2,SFRP2)基因启动子区甲基化水平与左侧乳腺癌术后放射治疗早期心脏毒性的相关性。方法 选取2017年1月至2021年1月于山东省东营市人民医院进行改良根治术的194例左侧乳腺癌患者为研究对象,根据放射治疗后6个月是否发生心脏毒性将患者分为观察组(发生心脏毒性,41例)和对照组(无心脏毒性,153例)。比较分析两组患者放射治疗后6个月的SFRP2基因甲基化水平、mRNA表达量以及放射治疗前后的左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和N末端B型利钠肽前体(N-terminal B-type precursor of natriuretic peptide precursor,NT-proBNP)水平。分析SFRP2基因甲基化水平与LVEF、cTnI、NT-proBNP、mRNA表达量的相关性。结果 放射治疗后6个月,观察组患者SFRP2-1岛、SFRP2-2岛的甲基化水平均显著高于对照组(P<0.05)。放射治疗前,两组患者的LVEF、cTnI、NT-proBNP水平比较差异均无显著性(P>0.05);放射治疗后6个月,观察组患者的LVEF显著低于对照组(P<0.05),cTnI、NT-proBNP水平均显著高于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,SFRP2-1岛的甲基化水平与LVEF、mRNA表达量呈负相关(r<0,P<0.05),与cTnI、NT-proBNP呈正相关(r>0,P<0.05);SFRP2-2岛的甲基化水平与LVEF、mRNA呈负相关(r<0,P<0.05),与NT-proBNP呈正相关(r>0,P<0.05),但与cTnI无显著相关性(P>0.05)。放射治疗后6个月,观察组患者的SFRP2基因mRNA表达量为1.81±0.16,低于对照组的2.47±0.21,差异有显著性(P>0.05)。结论 SFRP2基因启动子区甲基化水平升高与左侧乳腺癌术后放射治疗早期心脏毒性事件的发生相关,可能成为早期识别放射治疗相关心脏毒性的分子标志物。

血清sFRP2、omentin-1在肥厚型心肌病的水平及其与炎症因子和心功能指标的关系

目的探讨肥厚型心肌病(HCM)患者血清分泌型卷曲相关蛋白2(sFRP2)、网膜素1(omentin-1)水平与炎症因子和心功能指标的关系。方法选取2018年7月至2021年5月安康市中医医院心血管内科收治的HCM患者110例作为HCM组,根据最大左心室壁厚度(LVPWT)分为轻度肥厚组(57例)、中度肥厚组(42例)和重度肥厚组(11例)。另选取同期心功能正常的志愿者64例作为对照组。比较4组一般资料、生化指标和超声心动图检测指标。采用ELISA检测血清sFRP2、omentin-1水平。采用Pearson相关分析HCM患者血清sFRP2、omentin-1水平与炎症因子和心功能指标的相关性。结果与对照组比较,轻度肥厚组、中度肥厚组和重度肥厚组舒张压、收缩压、左心室心肌质量(LVMM)、LVPWT均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。4组体质量指数、年龄、性别、总胆固醇、血尿酸等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,轻度肥厚组、中度肥厚组和重度肥厚组血清sFRP2、omentin-1水平均明显降低,血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清sFRP2、omentin-1水平与HCM患者舒张压(r=-0.43、-0.53,P<0.05)、收缩压(r=-0.44、-0.55,P<0.05)、LVMM(r=-0.42、-0.66,P<0.05)、LVPWT(r=-0.44、-0.62,P<0.05)、IL-6(r=-0.42、-0.52,P<0.05)、TNF-α(r=-0.42、-0.58,P<0.05)均呈负相关。结论HCM患者血清sFRP2、omentin-1呈低表达,检测血清sFRP2、omentin-1水平有助于评估HCM的发生、发展进程。

粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值

目的探讨粪便SDC2、TFPI2、SFRP2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的临床价值。方法收集苏州大学附属第一医院2021年6月至2022年2月就诊患者105例,其中结直肠癌组患者30例,腺瘤组患者45例,健康对照者30名,采用荧光定量PCR法检测患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2的甲基化情况。分析粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其三者联合检测诊断结直肠癌的敏感度及特异度,以病理结果为金标准,通过ROC曲线分析该检测方法对疾病的诊断效能。结果结直肠癌组患者粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合结直肠癌检测阳性率高于腺瘤组和正常对照组,且腺瘤组高于正常对照组。SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化及其联合检测结直肠癌的敏感度分别为46.7%、53.3%、66.7%、76.7%;特异度分别为96.7%、93.3%、96.7%、86.7%。ROC曲线分析显示粪便SDC2、SFRP2、TFPI2甲基化联合检测筛查结直肠癌的效能较高。结论粪便SDC2、TFPI2、SFRP2甲基化联合检测对结直肠癌早期筛查的诊断价值较高,具有重要意义。

血清HDAC2、SFRP2水平与老年慢性心力衰竭患者心室重构的关系

目的 探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清组蛋白脱乙酰酶2(HDAC2)、分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)表达水平与心室重构的相关性。方法 选择2021年1月—2022年6月宝鸡市人民医院心血管内一科诊治老年CHF患者117例为CHF组,根据心功能分级分为Ⅱ级47例、Ⅲ级38例、Ⅳ级32例;选择同期在医院体检健康者120例为健康对照组。采用ELISA法检测血清HDAC2、SFRP2水平,超声心动图检查心功能相关指标[左心房内径(LAD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF)、左心室重构指数(LVRI)],Pearson分析CHF患者血清HDAC2、SFRP2与心室重构指标的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清HDAC2、SFRP2对CHF的诊断价值。结果 CHF组血清HDAC2、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平显著高于健康对照组,SFRP2水平显著低于健康对照组[t(Z)/P=14.476/<0.001、17.465/<0.001、23.903/<0.001];血清HDAC2水平比较Ⅱ级<Ⅲ级<Ⅳ级(F/P=54.632/<0.001),血清SFRP2水平比较Ⅱ级>Ⅲ级>Ⅳ级(F/P=78.503/<0.001)。CHF组LAD、LVEDD、LVMI显著高于健康对照组,LVEF、LVRI显著低于健康对照组(t/P=15.221/<0.001、14.824/<0.001、9.728/<0.001、20.848/<0.001、8.335/<0.001);LAD、LVEDD、LVMI水平比较,Ⅱ级<Ⅲ级<Ⅳ级(F/P=71.571/<0.001、45.980/<0.001、16.697/<0.001),LVEF、LVRI比较,Ⅱ级>Ⅲ级>Ⅳ级(F/P=101.017/<0.001、16.544/<0.001)。Pearson分析显示,血清HDAC2与LAD、LVEDD、LVMI、NT-proBNP呈正相关(P<0.01),与LVEF、LVRI呈负相关(P<0.01);血清SFRP2与LAD、LVEDD、LVMI、NT-proBNP呈负相关(P<0.01),与LVEF、LVRI呈正相关(P<0.01)。ROC曲线结果显示,血清HDAC2、SFRP2及二者联合预测CHF的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.865、0.931,二者联合预测效能高于单独检测(Z/P=3.258/0.001,2.286/0.022)。结论 CHF患者血清HDAC2水平升高,SFRP2水平降低,与心室重构相关,可作为临床辅助评估CHF患者病情的指标。

分泌型卷曲相关蛋白2对HepG2细胞生物学行为的影响

目的了解分泌型卷曲相关蛋白2（sFRP2）对HepG2细胞增殖、侵袭和迁移等生物学行为的影响。方法采用sFRP2重组腺病毒感染HepG2细胞，四甲基偶氮唑盐法检测HepG2细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期分布，免疫组织化学法检测肿瘤转移相关因子的表达，Westernblot检测D连环素的表达，Transwell小室检测细胞迁移能力。结果sFRP2明显抑制HepG2细胞增殖，限制细胞周期从G0／G1期进入S期;sFRP2显著增强HepG2细胞CD44和cD82／KAI1等与肿瘤转移抑制相关蛋白的表达，而明显降低有助于肿瘤侵袭转移的细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达；sFRP2可降低HepG2细胞的迁移能力。sFRP2感染前后，HepG2细胞均有D连环素的表达，且其表达差异无统计学意义。结论sFRP2的重组腺病毒能成功感染HepG2细胞，并对HepG2细胞的增殖、侵袭和转移具有抑制效应。

脂联素通过分泌型卷曲相关蛋白2及相关通路缓解AngⅡ诱导的心肌肥厚

目的探讨脂联素(APN)通过调控分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)及相关通路对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥厚的作用及机制。方法出生3d Wistar大鼠中分离出原代心室肌细胞(NRVMs)。采用免疫荧光法检测NRVMs的骨架蛋白α-SMA的表达。将提取的NRVMs分为空白组、1 nmol/L组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、500 nmol/L组,检测不同浓度AngⅡ对NRVMs的作用。将NRVMs分为空白组、AngⅡ组、APN+AngⅡ组、AngⅡ+APN+si-sFRP2组、AngⅡ+APN+LiCl组、APN组、SP600125+AngⅡ组以及SB203580+AngⅡ组检测APN对AngⅡ作用的影响。采用Western blotting法检测各组细胞sFRP2的表达量以及Wnt/β-catenin、p38/JNK通路的激活。采用qPCR法检测各组细胞心肌肥厚相关指标以及sFRP2的表达水平。结果在NRVMs中加入AngⅡ24 h后,与空白组相比,1 nmol/L组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、500 nmol/L组ANP、BNP的表达升高(FANP=27.30,P=0.002;FBNP=38.18,P=0.002),p-JNK和p-p38表达均升高(Fp-JNK=57.65,P<0.001;Fp-p38=8.880,P=0.018),sFRP2的表达下调(FAngⅡ=47.53,P<0.001)。加入APN预处理1 h后,与单加AngⅡ组相比,APN+AngⅡ组NRVMs心功能损伤标志物ANP、BNP的表达降低(FANP=101.8,P<0.001;FBNP=51.14,P<0.001),sFRP2的含量上调(F=88.93,P<0.001),同时Wnt/β-catenin(F=41.33,P=0.006)及p38/JNK(Fp38=73.42,P<0.001;FJNK=39.28,P=0.002)通路的激活被抑制。加入p38/JNK通路抑制剂后,能够达到APN预处理的效果(FANP=122.9,P<0.001;FBNP=202.3,P<0.001)。结论 APN可能通过上调sFRP2,抑制Wnt/β-catenin、p38/JNK通路的激活,从而抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚。

Wnt拮抗物分泌型卷曲相关蛋白2与大肠癌的研究进展

Wnt蛋白对正常细胞增殖起调整促进作用,改变发生在大多数大肠癌的Wnt信号途径导致β-链蛋白的积聚,分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)结合Wnt并通过这条途径抑制信号。当SFRP基因甲基化时,Wnt信号途径激活,蛋白质的机能随之出现异常,使癌细胞不断增殖,导致大肠癌发生。90％的大肠癌患者与SFRP基因甲基化有关,而甲基化SFRP2是最敏感的大肠癌诊断标志物之一。在人类粪便中检测SFRP2基因的甲基化为检测和研究大肠癌提供一种新的策略。

粪便中SFRP2基因甲基化与大肠癌的相关性

目的探讨粪便中的分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)2基因甲基化对大肠癌患者的诊断价值。方法选取2011年12月至2013年12月该院经病理检查确诊的52例大肠癌病人及32例结肠镜阴性的健康者(对照组)。通过亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测大肠癌52例粪便中SFRP2基因启动子两个区域(区域1和区域2)甲基化状态,分析SFRP2基因甲基化与肿瘤临床病理因素的关系。结果大肠癌患者及健康者粪便中广泛甲基化、部分甲基化及无甲基化分别为59.6%(31/52)、84.6%(44/52)、15.4%(8/52)和12.5%(4/32),25.0%(8/32)、75.0%(24/32);广泛和部分SFRP2的甲基化率在大肠癌患者粪便的检出率均明显高于健康体检者(P<0.05);SFRP2基因甲基化与大肠癌患者性别、肿瘤分期、浸润程度无显著关联。结论 SFRP2基因甲基化是大肠癌进展过程中的早期事件,粪便SFRP2基因甲基化有望成为早期无创诊断大肠癌的新途径。

SFRP2单克隆抗体对肾癌SNU349细胞增殖及迁移的影响

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)在肾透明细胞癌与正常肾组织中的表达情况,研究SFRP2单克隆抗体对肾癌SNU349细胞株增殖、迁移的影响。方法采用基因芯片分析及qRT-PCR检测37例肾透明细胞癌组织及10例癌旁正常组织中SFRP2的表达情况;采用细胞增殖试验及划痕试验检测不同浓度的SFRP2单克隆抗体对SFRP2高表达株肾癌SNU349细胞体外增殖、迁移的影响。结果PCR芯片及qRT-PCR结果显示,SFRP2在部分肾透明细胞癌组织中表达明显增高(P<0.05);SFRP2单克隆抗体能有效抑制肾癌SNU349细胞的体外增殖和迁移,其抑制作用呈浓度依赖性(P<0.05)。结论SFRP2在部分肾透明细胞癌组织中显著高表达,其表达程度与肿瘤分期无明显关系。SFRP2单克隆抗体能有效抑制肾癌SNU349细胞体外增殖、迁移,提示SFRP2可能是相应SFRP2高表达型肾癌的治疗靶点之一。

宫颈癌病灶内SFRP2、TPX2表达量与癌细胞凋亡、EMT过程的相关性

目的:研究宫颈癌病灶内SFRP2、TPX2表达量与癌细胞凋亡、EMT过程的相关性。方法:选取2015年6月~2016年12月期间在中国人民解放军第一七四医院接受手术切除治疗的宫颈癌患者作为研究对象,手术切除后留取宫颈癌病灶和癌旁病灶适量,抽提RNA后采用荧光定量PCR试剂盒测定病灶组织内SFRP2、TPX2、凋亡基因、EMT基因的表达量。结果:宫颈癌病灶内SFRP2、SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadherin的mRNA表达量显著低于癌旁病灶,TPX2、SP2、CyclinD1、Piwil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadherin、Vimentin1的mRNA表达量显著高于癌旁病灶;宫颈癌病灶内SFRP2的mRNA表达量与SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadherin的mRNA表达量呈正相关,与SP2、CyclinD1、Piwil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadherin、Vimentin1的mRNA表达量呈负相关,TPX2的mRNA表达量与SARI、AIF、FHIT、NDRG4、MCPH1、E-cadherin的mRNA表达量呈负相关,与SP2、CyclinD1、Piwil2、HERC4、EFEMP1、EZH2、TGF-β1、N-cadherin、Vimentin1的mRNA表达量呈正相关。结论:宫颈癌病灶内低表达的SFRP2及高表达的TPX2能够抑制癌细胞凋亡、促进癌细胞EMT过程。

SFRP2对脂肪干细胞成骨分化的作用研究

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)对脂肪干细胞(ADSC)成骨分化的影响。方法:利用重组慢病毒载体的SFRP2 shRNA基因敲除ADSC中SFRP2进行丧失性功能研究;利用HA-SFRP2逆转录病毒载体过表达SFRP2进行获得性功能研究;定量RT-PCR和Western Blot检测基因表达;碱性磷酸酶活性(ALP)测定、茜素红染色、钙离子定量以及定量RT-PCR检测脂肪干细胞的体外成骨分化能力。结果:定量RT-PCR和Western Blot显示SFRP2sh可以在ADSC中有效的抑制SFRP2的表达;ALP、茜素红和钙离子定量结果显示敲除SFRP2能明显抑制ADSC体外成骨分化能力;定量RT-PCR结果显示敲除SFRP2抑制骨涎蛋白(BSP)、Osterix(Osx)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达;定量RT-PCR和Western Blot显示HASFRP2可以在ADSC中有效的过表达;ALP、茜素红和钙离子定量结果显示过表达SFRP2能明显促进ADSC体外成骨分化能力;定量RT-PCR显示过表达SFRP2明显促进BSP的表达。结论:SFRP2促进脂肪干细胞的体外成骨分化功能。

探讨SFRP2基因甲基化在大肠癌筛查中的作用

目的:探讨粪便中分泌型卷曲相关蛋白2(secreted frizzled-related protein 2,SFRP2)基因超甲基化作为筛查大肠癌的非侵袭性工具的可行性。方法:用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析69例大肠癌、34例腺瘤和26例增生性息肉患者的瘤组织和粪便中SFRP2基因启动子甲基化状态,30例内镜下正常的健康者作为对照。其中大肠癌患者的粪便分别于术前及术后第9天采集。同时分析SFRP2基因甲基化与肿瘤临床病理因素之间的关系。结果:SFRP2基因在91.3%(63/69)的大肠癌组织、79.4%(27/34)的腺瘤组织和53.8%(14/26)的增生性息肉组织中发生超甲基化,并在同一患者所对应的粪便中有87.0%(60/69)、61.8%(21/34)和42.3%(11/26)检测到发生超甲基化。在正常对照的结肠黏膜中没有检测到SFRP2基因甲基化,但在粪便中有2例发生了SFRP2基因甲基化。在大肠癌患者术前和术后第9天的粪便中SFRP2基因超甲基化比较差异有统计学意义(P<0.001)。此外,SFRP2超甲基化与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、肿瘤分期、位置及病理分级等无显著相关性。结论:粪便中SFRP2基因超甲基化是大肠癌的一种新的分子标志,对于非侵袭性检测大肠癌具有高度的潜力。

sFRP2在心脏发育和心脏病理改变中作用的研究进展

分泌型卷曲相关蛋白2(sFRP2)是Wnt信号通路上的一个关键调节分子,在心脏发育过程和心脏病病理学中起着多重调节作用。sFRP2通过双向调节心肌母细胞的扩张和心肌的分化来调节心脏发育,并表现出特殊的时空特异性。在心脏纤维化过程中,sFRP2表现出浓度依赖性,低浓度sFRP2促进心脏纤维化进展,而高浓度的sFRP2抑制心脏纤维化。在病理性心肌肥大改变中,sFRP2对病理性心肌肥大具有保护作用;在血管再生方面,sFRP2可以抑制缺氧引起的内皮细胞凋亡,促进内皮细胞迁移,诱导内皮血管生成,促进血管再生;在心脏再生治疗方面,sFRP2能够改善人间充质干细胞(hMSCs)在氧化应激下的生存能力,提高干细胞移植的治疗效果。笔者就sFRP2在心脏发育及心血管疾病病理改变中的作用进行综述。

检测粪便中SFRP2基因超甲基化对筛查结直肠癌的意义

目的探讨粪便中分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因超甲基化作为筛查大肠癌的非侵袭性方法的可行性。方法用甲基化荧光定量PCR(Methylight)技术分析大肠癌69例,腺瘤34例和增生性息肉26例瘤组织和粪便中SFRP2基因甲基化状态,30例健康者作为对照。同时,分析SFRP2基因甲基化与肿瘤临床病理特点之间的关系。结果SFRP2基因在91.3%(63/69)的大肠癌组织、79.4%(27/34)的进展型腺瘤组织和53.8%(14/26)的增生性息肉组织中发生超甲基化,在同一患者所对应的粪便中有87.0%(60/69)、61.8%(21/34)和42.3%(11/26)发生超甲基化。在正常对照的结肠黏膜组织中没有检测到SFRP2基因甲基化,但在粪便中有2例发生了SFRP2基因超甲基化。此外,SFRP2超甲基化与肿瘤的临床特征包括性别、年龄、肿瘤分期、位置及病理分级等无显著相关性。结论粪便中SFRP2基因超甲基化是大肠癌的一种新的分子标记物,对于非侵袭性检测大肠癌具有高度的潜力。

外周血中SFRP2基因超甲基化改变与大肠癌关系的初步研究

目的 :探讨外周血分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因超甲基化改变与大肠癌发生、发展的关系。方法:利用甲基化特异性PCR(MSP)技术分析117例大肠癌患者术前的外周血中SFRP2基因启动子区异常甲基化改变情况,其中直肠癌69例,结肠癌48例。以50例大肠良性疾病患者和30例健康志愿者的外周血标本作为对照。结果:外周血中SFRP2基因超甲基化在直肠癌、结肠癌和大肠良性病变中的发生率分别为60.8%(42/69)、56.2%(27/48)和4%(2/50),在30例健康志愿者的血液标本中没有检测到SFRP2基因甲基化。此外,SFRP2基因超甲基化与肿瘤分期、分化及淋巴结转移呈正相关性,而与患者的年龄、性别及肿瘤的大小、位置等临床病理学特征无统计学相关性。结论:外周血中SFRP2基因甲基化与大肠癌的发生、发展呈一定相关性,其可成为检测早期CRC较为敏感的DNA单碱基标志物。

SFRP2对小鼠淋巴结总T细胞的作用研究

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)对C57小鼠淋巴结总T细胞功能的影响。方法:利用SFRP2重组蛋白构建高浓度SFRP2条件;体外分离培养C57小鼠淋巴结总T细胞;流式细胞术检测0.4ng/mL SFRP2重组蛋白对C57小鼠淋巴结总T细胞的增殖、凋亡及亚群的影响。结果:0.4ng/mL SFRP2重组蛋白抑制总T细胞的增殖和凋亡,主要抑制早期凋亡,对晚期凋亡率无明显影响;0.4ng/mL SFRP2重组蛋白增加Th1亚群比例,降低Th2亚群比例,提高了Th1/Th2比例。结论:一定浓度SFRP2重组蛋白可以抑制总T细胞的增殖和凋亡,并促进T细胞向Th1亚群分化,抑制其向Th2亚群分化。