血清醇脱氢酶、分泌型蛋白Dickkopf1、黏附分子1在原发性肝癌患者中的表达及临床意义

目的探讨血清醇脱氢酶(SADH)、分泌型蛋白Dickkopf 1(DKK1)、黏附分子1(ICAM-1)在原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法选取2017年1月至2019年1月在石家庄市第五医院治疗的原发性肝癌患者120例(肝癌组),同时选取其他肝病患者60例(肝病组)、健康志愿者60例作为对照(健康组),检测比较各组血清SADH、DKK1、ICAM-1水平,同时分析肝癌组不同患者SADH、DKK1、ICAM-1水平差异,以及与患者预后的关系。结果肝癌组血清SADH、DKK1、ICAM-1水平明显高于肝病组和健康组(P<0.05);肝病组血清SADH、ICAM-1水平明显高于健康组(P<0.05)。观察组肿瘤直径≥5 cm、临床分期Ⅲ期患者血清SADH明显高于肿瘤直径<5 cm、临床分期Ⅰ~Ⅱ期患者(P均<0.05);临床分期Ⅲ期、多个肿瘤患者血清DKK1明显高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、单个肿瘤患者(P均<0.05);Child-Pugh分级C级、多个肿瘤患者血清DKK1明显高于Child-Pugh分级A级和B级、单个肿瘤患者(P均<0.05);死亡患者血清SADH、DKK1和ICAM-1水平均明显高于存活患者(P均<0.05)。结论原发性肝癌患者血清SADH、DKK1、ICAM-1水平升高,与患者临床分期、肿瘤个数、肿瘤直径以及预后有一定关系,三者联合预测患者预后有一定价值。

老年经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄患者胱抑素C、基质金属蛋白酶抑制剂-1、分泌型卷曲相关蛋白5表达及临床意义

目的探讨老年经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)患者胱抑素C(CysC)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP-5)表达及对靶血管病变的预测价值。方法选取2020年5月至2022年5月保定市第一中心医院PCI术后1年内发生ISR的65例老年冠心病患者作为观察组,选取同期65例PCI术后1年内未发生ISR的老年冠心病患者作为对照组,比较两组一般资料、术后血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平,分析血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平与ISR发生的相关性,并比较观察组不同Mehran分型患者血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平,分析各指标水平与Mehran分型的相关性,分析血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平预测靶血管发生ISR的价值。结果观察组血清CysC水平高于对照组(t=6.949,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平低于对照组(t=7.301、8.765,P<0.05);血清CysC水平与ISR的发生呈正相关(r=0.587,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平与ISR的发生呈负相关(r=-0.609、-0.640,P<0.05)。观察组四种Mehran分型的患者CysC、TIMP-1、SFRP-5水平差异有统计学意义(F=10.759、8.326、19.764,P<0.05)。随着Mehran分型Ⅰ型到Ⅳ型的变化,CysC水平逐渐升高,TIMP-1、SFRP-5水平逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。血清CysC水平与ISR患者Mehran分型呈正相关关系(r=0.722,P<0.05),TIMP-1、SFRP-5水平与Mehran分型呈负相关关系(r=-0.799、-0.826,P<0.05)。血清CysC、TIMP-1、SFRP-5水平预测老年冠心病患者PCI术后1年内靶血管发生ISR的曲线下面积(AUC)分别为0.807(95%CI=0.729~0.871)、0.786(95%CI=0.706~0.853)、0.811(95%CI=0.733~0.874),联合预测的AUC最大,为0.943(95%CI=0.887~0.976)。结论老年冠心病PCI术后患者血清CysC水平升高,TIMP-1、SFRP-5水平降低与ISR的发生发展相关,术后早期检测各指标水平有助于预测靶血管发生ISR风险。

血清抗衰老因子、分泌型卷曲相关蛋白-1、C反应蛋白在糖尿病肾病患者检测中的临床价值

目的探讨血清抗衰老因子(Klotho)、分泌型卷曲相关蛋白-1(sfrp-1)、C反应蛋白(CRP)在糖尿病肾病(DN)患者检测中的临床价值。方法采用回顾性分析法,选取2020年11月至2022年11月九江市第一人民医院内分泌科收治的60例DN患者作为DN组,并纳入60例同期进行体检的健康者作为对照组,检测DN组和对照组血清中Klotho、sfrp-1以及CRP水平的变化,根据肾损伤情况,将DN组分为单纯糖尿病组[尿蛋白排泄率(UAER)<20μg/min]、早期DN组(200μg/min≥UAER≥20μg/min)和临床期DN组(UAER>200μg/min),比较各组患者血清Klotho、sfrp-1以及CRP水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Klotho、sfrp-1、CRP对肾损伤程度的诊断价值。结果DN组sfrp-1、CRP水平高于对照组,Klotho水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);临床期DN组Klotho水平低于早期DN组和单纯糖尿病组,且早期DN组Klotho水平低于单纯糖尿病组,临床期DN组sfrp-1、CRP水平高于早期DN组和单纯糖尿病组,且早期DN组sfrp-1、CRP水平高于单纯糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman分析结果显示,DN患者Klotho水平与肾损伤程度呈负相关,Psfrp-1、CRP水平与肾损伤程度成正相关(P<0.05);Klotho、sfrp-1、CRP三者联合诊断肾损伤程度的ROC曲线下面积(AUC)面积高于单独检测。结论DN患者肾损伤程度越高,血清sfrp-1、CRP水平越高,血清Klotho水平越低。

乳腺增生症的中西医认识及分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对发病机制的作用

乳腺增生病是一种由乳腺导管上皮细胞、乳腺腺泡及纤维结缔组织增生所致的疾病,该病多发于中年女性,但近年来具有年轻化的趋势,青年女性发病率逐年升高,同时乳腺增生及乳腺癌的总体病患数亦逐年提高,并有一定的癌变风险,被视为癌前病变。同时该病病因病机尚未完全明确,目前现代医学对于病因病机的研究主要分为两方面,一方面是激素,另一方面为信号通路,且激素与信号通路间存在相互调控影响的过程,病机较为复杂。因此,进一步明确乳腺增生的病因病机对该病进行积极防治十分重要。该文简述了乳腺增生病的症状,总结乳腺增生的病因病机及中西医对该病的认识,并论述分泌型卷曲相关蛋白1(Recombinant Secreted Frizzled Related Protein 1,SFRP1)对乳腺增生病的影响,对此进行综述探讨。

慢性阻塞性肺疾病患者急性加重影响因素及血清分泌型卷曲相关蛋白1和Clara细胞分泌蛋白对其预测价值

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重的影响因素,以及血清分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)和Clara细胞分泌蛋白(CC16)对急性加重慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)的预测价值。方法:选取COPD患者198例为研究对象,根据出院后3个月复诊是否发生AECOPD分为稳定期COPD组(102例)和AECOPD组(96例)。比较两组患者性别、年龄、体重指数(BMI)、是否吸烟、既往病史(糖尿病、高血压、肺心病和冠心病等)、病程等一般资料。比较两组患者C反应蛋白(CRP)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、血小板(PLT)、纤维蛋白原(FIB)、白蛋白(ALB)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、纤维蛋白原/白蛋白比值(FAR)、血清SFRP1和CC16水平。采用Logistic回归分析发生AECOPD的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SFRP1和CC16对AECOPD发生的预测价值。结果:两组患者性别、年龄、BMI、是否吸烟、既往病史(高血压、糖尿病、肺心病和冠心病)以及病程比较差异无统计学意义(均P>0.05)。AECOPD组CRP、WBC、NEU、LYM、PLT、ALB、FIB、NLR、PLR、FAR、SFRP1和CC16水平高于稳定期COPD组(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,NLR>3.53、PLR>120、FAR>3.5、SFRP1>4.8 ng/ml以及CC16>260 ng/ml是COPD患者发生AECOPD的独立危险因素(均P<0.05)。血清SFRP1和CC16对COPD患者发生AECOPD具有一定的预测价值,且两者联合的预测价值更高。结论:NLR、PLR、FAR、SFRP1及CC16是COPD患者发生AECOPD的独立影响因素。SFRP1联合CC16对COPD患者发生AECOPD的预测价值较高。

肺腺癌关键基因的筛选及分泌型磷酸蛋白1在肺腺癌中的表达

目的基于美国国家生物技术信息中心(NCBI)基因表达数据库(GEO)和美国国家癌症研究所(NCI)癌症基因组图谱(TCGA)联合生物学信息分析筛选肺腺癌关键基因(HUB)及相关信号通路、分泌型磷酸蛋白1(SPP1)表达及与肺腺癌患者临床特征的相关性。方法从GEO数据库下载包括肺腺癌与正常或癌旁肺组织基因表达2个数据集GSE10072、GSE43458,收集2020年1月至2021年3月于齐齐哈尔医学院附属第三医院行手术治疗且病理明确诊断为肺腺癌患者的癌组织和癌旁标本作为肺腺癌临床验证数据集(QY3F)并进行标准化及处理,筛选出肺腺癌与正常肺组织之间的差异基因,并进行基因本体(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;通过筛选出的差异基因构建蛋白质相互作用网络(PPI),分析并筛选HUB基因;通过TCGA数据集验证SPP1表达及与肺腺癌患者临床特征和预后的相关性;通过QY3F验证SPP1表达及与肺腺癌患者临床特征的相关性;通过TCGA数据库分析肺腺癌患者SPP1基因与相关通路的相关性。结果通过2个GEO数据集筛选出差异表达基因120个,上调表达23个,下调表达97个。GO功能富集分析结果显示,差异基因参与细胞外基质组织及细胞膜结构的形成和功能及调节细胞对生长因子刺激的反应、骨小梁形成、肽及糖胺聚糖绑定;KEGG通路富集分析结果显示,差异基因参与细胞外基质的黏附、蛋白质消化吸收及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路。筛选出前10的HUB基因分别为DNA拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、SPP1、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)、羟基类固醇17-β脱氢酶6(HSD17B6)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)、尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活因子(PLAU)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PBK)、周期蛋白依赖激酶抑制因子3(CDKN3)和人Ⅰ型胶原α1(COL1A1)。10个HUB基因中,除HSD17B6在TCGA数据库肺腺癌患者癌组织中的表达下降外,其他基因表达均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),其中SPP1上调表达差异最明显[癌旁正常组织(4.02±1.57)vs.肺腺癌组织(8.49±2.08)(P<0.05)];SPP1表达与性别、年龄、种族、肿瘤大小、肿瘤远处转移、病理分期无相关性,但与肿瘤淋巴结转移相关(P<0.05),与预后呈负相关(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,SPP1表达诊断肺腺癌的AUC为0.95。QY3F数据集分析结果显示,肺腺癌组织中SPP1表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。SPP1表达与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及病理分期无相关性。SPP1与上皮间质细胞转化(EMT)相关性最高(P<0.05)。结论SPP1在肺腺癌组织中呈明显高表达,与肿瘤淋巴转移相关,机制通路可能与EMT相关,且SPP1对肺腺癌诊断及预后判断具有一定价值,是肺腺癌发展的关键基因。

早期糖尿病肾病外周血分泌型卷曲相关蛋白1、血脂素、纤溶酶原激活物抑制物-1水平变化情况及临床检测意义

目的:探讨早期糖尿病肾病(Diabetes nephropathy,DN)外周血分泌型卷曲相关蛋白1(secreted curl associated protein 1,SFRP1)、血脂素(serum adiponectin,APN)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)水平变化情况及临床检测意义。方法:回顾性分析襄城县人民医院2019年6月—2021年2月收治的115例糖尿病患者的临床资料,分为糖尿病组54例和DN组61例,另选择同期体检健康者45例为正常对照组。分别采集3组受试者晨起空腹外周静脉血,检测血清SFRP1、APN、PAI-1、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbAle)、空腹胰岛素、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)及肌酐水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);分析血清SFRP1、APN、PAI-1水平与早期DN患者临床相关指标的相关性。结果:糖尿病组和DN组受试者的FPG、HbA1c、空腹胰岛素、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、肌酐水平均高于正常对照组,HDL-C水平低于正常对照组,差异有统计学意义(F=228.01、162.12、257.10、464.95、10.01、21.91、10.35、145.00、481.63,P<0.05)。糖尿病组受试者血清SFRP1、APN、PAI-1水平与正常对照组,DN组受试者血清SFRP1、PAI-1水平高于糖尿病组,而血清APN水平低于糖尿病组及正常对照组,差异有统计学意义(F=398.82、406.70、28.32,P<0.05)。DN患者血清SFRP1、APN、PAI-1水平与FPG、HbA1c、空腹胰岛素、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、肌酐呈正相关,与HDL-C呈负相关(P<0.05)。结论:早期DN患者血清SFRP1、PAI-1水平升高及APN水平降低,可能参与了疾病的发生及发展过程。

分泌型卷曲相关蛋白1与慢性牙周炎的相关分析

目的检测分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)在慢性牙周炎(CP)患者和牙周健康者的表达情况,探讨SFRP1在CP的发生与发展过程中的作用。方法选择CP患者28例为试验组,按临床附着丧失(CAL)程度分为轻、中、重度3组,另外选择牙周健康者10例为对照组。收集两组研究对象的龈沟液,采用酶联免疫吸附法测定龈沟液中SFRP1的质量浓度。取试验组中22例CP患者的病变牙龈组织标本,以及10例对照组的正常牙龈组织,进行SFRP1免疫组织化学染色,观察着色强度,分析SFRP1表达与不同程度CP的相关性。结果 1)试验组和对照组龈沟液中SFRP1的质量浓度分别为(281.07±33.37)和(245.30±35.69)ng·L-1,试验组明显高于对照组(P<0.05);龈沟液内SFRP1质量浓度与CAL呈明显正相关(r=0.651,P<0.001)。2)试验组SFRP1着色强度积分值(4.500±0.913)明显高于对照组(2.800±1.135)(P<0.001);试验组中,轻、中、重度CP组间的着色强度积分值无明显差异(P>0.05)。结论SFRP1在CP患者龈沟液及牙龈组织中的表达高于牙周健康者,SFRP1可能参与了CP的发生发展过程。

苓桂术甘汤对心梗后慢性心衰模型大鼠心肌纤维化及心肌组织Wnt1/β-catenin信号通路蛋白表达的影响

目的:观察苓桂术甘汤对心肌梗死后慢性心衰大鼠心肌纤维化及心肌组织Wnt/β-catenin通路相关分子表达的影响,探讨其抑制心肌纤维化的作用和可能机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎法复制心肌梗死后慢性心衰大鼠模型;造模24 h后,连续干预4 w。采用小动物彩色多普勒超声成像系统检测大鼠LVIDd、LVIDs、LVEF、LVFS;HE及Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化;ELISA法检测大鼠血清CK-MB、cTnT及心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ水平;Western Blot检测大鼠心肌组织Wnt1、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、α-SMA及细胞核β-catenin蛋白表达;RT-qPCR检测大鼠心肌组织β-catenin、MMP-9 mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠LVIDd、LVIDs水平显著升高,LVEF、LVFS水平显著降低(P<0.01),心肌组织出现明显的心肌细胞排列紊乱,心肌纤维部分断裂及间质纤维化等病理变化,血清CK-MB、cTnT和心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ含量及CollagenⅠ/CollagenⅢ比值显著升高,心肌组织细胞质GSK-3β蛋白表达显著降低,心肌组织α-SMA蛋白及细胞质Wnt1、β-catenin、p-GSK-3β蛋白和细胞核β-catenin表达显著升高,心肌组织β-catenin、MMP-9 mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,苓桂术甘汤干预4 w后,上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论:苓桂术甘汤能减轻心肌梗死后慢性心衰大鼠心肌损伤并抑制心肌纤维化,改善CHF大鼠心功能,其作用机制与其抑制心肌组织Wnt/β-catenin信号通路激活有关。

早期糖尿病肾病患者血清分泌型卷曲相关蛋白1的表达及其临床意义

目的探讨早期糖尿病肾病患者血清分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)的表达及其临床意义。方法选择2016年5月至2019年5月新乡医学院第一附属医院收治的117例2型糖尿病患者为研究对象,其中未并发糖尿病肾病患者54例(糖尿病组),并发糖尿病肾病患者63例(糖尿病肾病组);另选择同期体检健康者47例为正常对照组。分别采集3组受试者晨起空腹外周静脉血,检测血清SFRP1、超氧化物歧化酶(SOD)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)及肌酐水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);留过夜8、24 h尿,分别检测尿白蛋白排泄率和尿白蛋白/肌酐比值;分析血清SFRP1水平与早期糖尿病肾病患者临床相关指标的相关性。结果糖尿病组和糖尿病肾病组患者FPG、HbA1c、空腹胰岛素、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、肌酐、尿白蛋白排泄率、尿白蛋白/肌酐、TGF-β1水平高于正常对照组(P<0.05),HDL-C、SOD水平低于正常对照组(P<0.05)。糖尿病肾病组患者肌酐、尿白蛋白排泄率、尿白蛋白/肌酐、TGF-β1水平高于糖尿病组,SOD水平低于糖尿病组(P<0.05);糖尿病肾病组患者FPG、HbA1c、空腹胰岛素、HOMA-IR、TC、HDL-C、LDL-C、TG水平与糖尿病组比较差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病组患者血清SFRP1水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病肾病组患者血清SFRP1水平高于糖尿病组和正常对照组(P<0.05)。糖尿病肾病患者血清SFRP1水平与FPG、HbA1c、空腹胰岛素、HOMA-IR、TC、LDL-C、TG、肌酐、尿白蛋白排泄率、尿白蛋白/肌酐、TGF-β1水平呈正相关(r=0.553、0.601、0.532、0.638、0.599、0.405、0.542、0.467、0.573、0.592、0.589,P<0.05),与HDL-C、SOD水平呈负相关(r=-0.581、-0.417,P<0.05)。结论早期糖尿病肾病患者血清SFRP1水平上调,其可能参与了2型糖尿病肾病的发生、发展过程。

支气管肺泡灌洗液中β-联蛋白、转化生长因子β_1、Clara细胞分泌蛋白16、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6在支气管肺发育不良中的表达及意义

目的探讨β-联蛋白、转化生长因子β1(TGF-β1)、Clara细胞分泌蛋白16(cc16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(KL-6)在支气管肺发育不良(BPD)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中的表达及其意义。方法机械通气早产儿70例,其中40例诊断为BPD的患儿作为观察组,30例非BPD患儿作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测两组患儿机械通气1、24、48、72hBALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16、KL-6水平。结果观察组平均胎龄及出生体质量显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),吸氧时间及机械通气时间显著长于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。随机械通气时间的延长,观察组cc16水平呈逐渐降低趋势,而β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平呈逐渐升高趋势,且48、72h时均与1h时各指标水平差异有统计学意义(P<0.01)。对照组TGF-β1、cc16于机械通气72h时与1h时水平差异有统计学意义(P<0.01),而β-联蛋白、KL-6水平在各时间点的差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组机械通气各时间点β-联蛋白、TGF-β1水平均显著高于对照组各相应时间点指标水平,cc16显著低于对照组水平,差异有统计学意义(P<0.05),而KL-6在机械通气48、72h时高于对照组相应时间点,差异有统计学意义(P<0.05),余时间点差异无统计学意义(P>0.05)。各时间点比较,BPD中重度组β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平均显著高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),而cc16水平显著低于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元逐步回归分析结果显示,机械通气时间、吸氧时间的延长及低cc16水平是BPD发生的危险因素(P<0.01)。结论机械通气早产儿BPD的发生与机械通气、吸氧时间的延长及低cc16水平密切相关,通过监测早产儿初始机械通气BALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16水平可对早产儿BPD的发生提供预测依据。

1型糖尿病患者不同病程阶段T细胞亚群变化与糖化血红蛋白及胰岛素分泌指数的关系探讨

目的通过观察初诊1型糖尿病患者在初发期、蜜月期二个不同时期CD4/CD8、HbA1c、FINS/FBG等的改变,了解1型糖尿病患者中T细胞亚群的改变与糖化血红蛋白、胰岛素分泌指数之间的关系。方法正常对照组19例,1型糖尿病组20例(分为初发期、蜜月期二个不同阶段),均测定FINS/FBG、HbA1c、CD4、CD8、NK细胞活性。结果糖尿病组初发期NK细胞活性、CD4、CD4/CD8比值均高于对照组,P<0.01;CD8、FINS/FBG、FINS均低于对照组,P<0.01;而糖尿病组蜜月期有恢复,但与正常组对比仍有差异(P<0.05);糖尿病组初发期CD4/CD8比值、NK细胞活性与HbA1c呈正相关,而与FINS/FBG呈负相关。结论1型糖尿病患者NK细胞活性、CD4、CD4/CD8明显增高并由此加重β细胞损害、导致胰岛素分泌指数下降,1型糖尿病的发生和发展与免疫功能的改变是密切相关的。

降钙素对关节软骨细胞中β连环蛋白和分泌型frizzled相关蛋白1的影响

背景:研究表明降钙素具有抗骨吸收作用,对软骨有保护作用,但其具体机制尚不明确。目的:探讨降钙素是否通过Wnt/β信号通路对关节软骨细胞起保护作用。方法:分离培养雄性日本大耳白兔关节软骨细胞,随机分为对照组,白细胞介素1β组和降钙素组,后两组细胞于传代后的第2天加入白细胞介素1β(1×10-5g/L)模拟骨关节炎发生,降钙素组第4天换成含有降钙素的完全培养基。第6天采用免疫细胞化学法检测β连环蛋白的表达,以及实时荧光定量PCR法检测β连环蛋白与分泌型frizzled相关蛋白1mRNA的表达。结果与结论:降钙素组β连环蛋白和mRNA的表达显著低于白细胞介素1β组(P<0.05);白细胞介素1β组β连环蛋白和mRNA的表达显著高于对照组(P<0.05)。降钙素组分泌型frizzled相关蛋白1的mRNA表达显著高于白细胞介素1β组(P<0.05),白细胞介素1β组分泌型frizzled相关蛋白1mRNA表达显著低于对照组(P<0.05)。这些结果说明降钙素能抑制关节软骨细胞的进一步损伤,可能是通过Wnt/β连环蛋白信号通路对关节软骨细胞起保护作用。

分泌型卷曲相关蛋白1基因异常甲基化对食管鳞癌的影响

目的:研究分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled-related protein 1,SFRP1)基因启动子区与食管鳞癌的相关性.方法:选取食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者22例为实验组,另同期选取食管良性病变者22例为对照组,提取术前外周血DNA,利用甲基化特异性PCR法(MSP)检测SFRP1基因启动子区域甲基化状态,并分析其与临床病理参数的相关性.结果:在22例食管鳞癌患者中其甲基化阳性例数为8例,甲基化阳性率为36.4%,在22例食管良性病变者中其甲基化阳性例数为2例,甲基化阳性率为9.1%(P<0.05).SFRP1基因甲基化与患者临床病理参数及癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)水平无相关性(P>0.05).结论:血清SFRP1基因启动子区异常甲基化可能参与食管鳞癌的发生,有望成为食管鳞癌临床诊断的新型辅助指标.

分泌型卷曲相关蛋白1在慢性牙周炎患者中的检验结果分析

目的通过分析分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)在慢性牙周炎(CP)患者及正常健康者中的表达情况,研究SFRP1与CP的相关性。方法筛选30例CP患者作为研究组,并按照其附着丧失(CAL)的程度,将研究组患者分为轻、中、重3个等级,同时筛选12例健康者作为对照组。收集上述两组患者的龈沟液,通过酶联免疫吸附的方法检测龈沟液中的SFRP1含量,以分析SFRP1与CP的相关性。结果 1与对照组相比,研究组患者龈沟液的含量及SFRP1的浓度明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05);2与对照组比较,中、重CP组的SFRP1浓度均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且在3种不同患病程度的患者中,SFRP1浓度的两两组间比较均有统计学意义(P<0.05);3研究组患者CAL的程度越高,其龈沟液中SFRP1的浓度越高,且与CAL呈明显的正相关性(r=0.958,P<0.05)。结论 SFRP1在CP患者中的表达量要远远高于健康者,且龈沟液中SFRP1的含量越高,说明CAL的程度越重,表明SFRP1参与了CP的发生过程。

肾透明细胞癌中分泌型卷曲相关蛋白1基因甲基化及其表达与亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性的关系

目的探讨人肾透明细胞癌组织中分泌型卷曲相关蛋白1基因(SFRP 1)的甲基化状态及其mRNA表达与亚甲基四氢叶酸还原酶C677T(MTHFR C677T)基因多态性的关系。方法采用PCR-RFLP技术分别检测38例手术切除的肾透明细胞癌区和外周正常肾脏组织标本MTHFR基因677(C→T)多态,并分别以Real-time PCR和和甲基化特异性PCR(MSP)技术检测SFRP 1基因的表达和甲基化状态。结果 SFRP 1基因失表达和/或低表达的肾透明细胞癌组织其启动子区处于高甲基化状态,MTHFR 677CC基因型的肾透明细胞癌组织SFRP 1甲基化升高且其表达降低,SFRP 1的甲基化及其表达与MTHFRC677T基因多态性有明显相关性。结论 MTHFR基因多态性通过影响SFRP 1基因的甲基化状态而调控其表达,可能在肾癌的发生、发展中具有重要作用。

分泌型卷曲相关蛋白1及β-连环蛋白在慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达

目的检测分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)及β-连环蛋白(β-catenin)在慢性牙周炎(CP)患者牙龈组织中的表达及相关性,探讨经典Wnt/β-catenin信号通路在牙周炎发生发展中的作用。方法选取CP患者28例(CP组),其中中度CP16例,重度CP12例,健康对照者12例(正常组),收集牙龈组织并记录探诊深度、出血指数及临床附着丧失水平。采用免疫组织化学技术检测SFRP1及β-catenin的表达,双评分法评价阳性染色强度,SPSS 19.0软件进行统计分析。结果正常组SFRP1及β-catenin的着色强度积分值分别为2.16±0.65、1.12±0.51,CP组为3.57±0.45、2.36±0.49,其中中度CP组为3.61±0.40、2.30±0.44,重度CP组为3.52±0.52、2.45±0.55。CP组中SFRP1及β-catenin的表达较正常组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。进一步比较,正常组与中度、重度CP组间差异均有统计学意义(P<0.01),但中度与重度CP组间差异无统计学意义(P>0.05)。SFRP1与β-catenin着色强度的相关系数r=0.657(P<0.01)。两者的表达均与牙周临床指数相关,其中SFRP1与探诊深度的相关性最明显(r=0.723,P<0.01);β-catenin与出血指数的相关性最强(r=0.697,P<0.01)。结论 SFRP1及β-catenin在CP患者牙龈组织中的表达升高且与牙周破坏相关,两者的异常表达可能促进牙周炎的发生发展。

分泌型卷曲相关蛋白-1在糖尿病肾病小鼠肾组织中的表达及意义

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白(sfrp)-1在糖尿病(DM)肾病(DN)小鼠肾组织中的表达变化,探讨sfrp-1在DN肾脏纤维化发病过程中的作用。方法雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、DM组。成模10 w末处死,生化方法测小鼠血糖、肌酐、尿素氮、胆固醇、三酰甘油、24 h尿蛋白;免疫组化检测两组肾组织β-连环蛋白(β-catenin)、sfrp-1蛋白的表达;Western印迹检测小鼠肾组织wnt4、β-catenin、糖原合成酶激酶(GSK)-3β、p-GSK3β、sfrp-1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白(col-Ⅲ)等蛋白的表达变化;实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肾组织sfrp-1 mRNA表达。结果与正常对照组比较,DM组血糖和24 h尿蛋白、肌酐、三酰甘油、尿素氮均显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示正常对照组肾皮质肾小管细胞胞质内几乎没有β-catenin蛋白表达,而DN组β-catenin蛋白在胞质内大量集聚,并出现核转移;sfrp-1蛋白在正常对照组肾皮质肾小管细胞胞质内可见棕黄色阳性表达,而DN组阳性表达减少;Western印迹显示,DM组肾组织wnt4、p-GSK3β、β-catenin、α-SMA、col-Ⅲ表达较正常对照组明显增多(P<0.05),而E-cadherin、sfrp-1表达显著减少(P<0.05);Realtime-PCR结果显示,与正常对照组比较,DM组肾组织sfrp-1 mRNA表达显著减少(P<0.05)。结论 sfrp-1在DN小鼠肾组织表达降低可能导致对wnt4/β-catenin信号通路的抑制作用减弱从而促进DN肾纤维化进程。

类鼻疽杆菌Ⅵ型分泌系统蛋白Hcp1的重组表达及免疫学性质鉴定

目的重组表达类鼻疽杆菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulated protein 1,Hcp1),并对其免疫学性质进行鉴定。方法利用DNA重组技术以pET-28a表达系统在E.coli BL21(DE3)中重组表达Hcp1;通过亲和层析制备高纯度Hcp1蛋白;采用腹腔注射免疫小鼠制备抗Hcp1血清,ELISA检测抗体滴度,免疫印迹及免疫荧光分析抗体的免疫反应性。结果成功获得纯度达95%的重组Hcp1蛋白,该蛋白免疫小鼠后获得的抗血清具有较好的特异性和较高的抗体滴度(1∶512000),表现出良好的免疫原性和免疫反应性。结论成功制备了具有生物学活性的Hcp1重组蛋白及其抗血清。

分泌型卷曲相关蛋白1在人毛乳头中的表达及其转录机制研究

目的:探讨人分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1, SFRP1)基因在人毛乳头中的表达及其转录机制。方法:应用免疫组化观察SFRP1在雄激素性秃发(androgenetic alopecia, AGA)患者秃发区的毛囊与非AGA患者的正常毛囊毛乳头部位的表达情况。采用按基因组序列设计的引物,通过PCR克隆人SFRP1启动子片段,将之插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中,构建不同截短片段的重组质粒并瞬时转染毛乳头细胞,测定质粒在毛乳头细胞中的启动子活性,找到核心启动子区域,运用生物信息学方法预测其潜在的转录因子结合位点。结果:免疫组化结果显示AGA患者毛乳头中SFRP1表达量显著高于非AGA患者。经菌液PCR、双酶切、测序,成功构建了人SFRP1启动子及其截短片段重组质粒,并确定其启动子活性区域位于-100~+50bp区域内,且可能含有E2F3、HIF1A::ARNT、FOXC1、SP1等转录因子结合位点。结论:SFRP1在AGA患者毛乳头中表达呈阳性,人SFRP1启动子荧光素酶报告质粒构建成功,其转录因子结合位点初步确定,为进一步的研究奠定基础。