结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶(SapM)抑制小鼠巨噬细胞自噬

目的研究结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶(Sap M)对小鼠巨噬细胞自噬的影响。方法分别用Sap M、渥曼青霉素、饥饿处理GFP-LC3-Raw264.7细胞。荧光显微镜下观察自噬体的形成,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ水平;再用Sap M处理GFP-LC3-Raw264.7细胞后加氯喹,Western blot法检测LC3Ⅱ水平。结果 Sap M和饥饿均导致GFP-LC3斑点增多和LC3Ⅱ水平增高,在Sap M处理的细胞中加入氯喹并没有引起LC3Ⅱ的进一步升高。结论 Sap M可阻断自噬体与溶酶体的融合,从而抑制小鼠巨噬细胞自噬。

结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶检测对结核病诊断价值的Meta分析

目的系统评价结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶(TB-SA)检测对结核病的诊断价值。方法计算机检索CNKI、万方、维普、Medline、Embase、CochraneLibrary等数据库,筛选关于TB-SA检测对结核病诊断价值的中、英文文献并进行系统评价。对纳入的文献,采用诊断精确性研究的质量评估方法(QUADAS)进行质量评价,并用Meta-Disc1.4软件进行meta分析。结果共纳入符合要求的文献13篇,合并敏感度为0.70(95%CI:0.69～0.72),合并特异度为0.83(95%CI:0.82～0.85),合并阳性似然比为4.43(95%CI:3.32～5.92),合并阴性似然比为0.35(95%CI:0.30～0.42),合并诊断优势比为14.33(95%CI:9.17～22.37),汇总受试者工作特征曲结(SROC)下面积为0.8324。结论 TB-SA检测对结核病具有一定的诊断价值,可以辅助结核病的诊断。

供磷水平对纽荷尔脐橙幼树磷酸酶活性和磷素吸收利用效率的影响

为了探索柑橘对磷养分的吸收利用特性,为柑橘园土壤养分的诊断及施磷量的确定提供科学依据,以枳砧纽荷尔脐橙幼树为材料,采用盆栽试验研究了不同供磷水平对其磷酸酶活性和磷素吸收利用效率的影响。结果表明:在5～125 mg/kg 7个供磷水平处理中,纽荷尔脐橙幼树根系、叶片及土壤中的APase活性和根系的SAPase活性与供磷水平呈极显著负相关;在5 mg/kg供磷水平下,根系、叶片及土壤中的APase活性和根系的SAPase活性最大,整株幼树、地上部和根系对磷素的利用效率最高,但叶片表现出缺磷症状;在25 mg/kg供磷水平下,整株幼树、地上部、根系的生物量及磷素的吸收效率最高,植株生长良好,但磷素的利用效率低于供磷水平为5 mg/kg的处理;土壤的供磷水平超过65 mg/kg时,纽荷尔脐橙幼树的生长受到抑制,叶片扭曲、黄化、变小,根系、叶片及土壤的APase和根系SAPase的活性明显降低,磷素的吸收和利用效率明显减弱。因此,25～45 mg/kg的供磷水平对纽荷尔脐橙幼树的生长和磷素的吸收利用较为有利。

SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用

目的研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用。方法采用Rab7小干扰RNA(si Rab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平。m Cherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系。用3种SapM的突变体SapM△ARCA,SapM△FRED和SapM△CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系。结果 si Rab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用。结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用。