期刊文献+
共找到24篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
华支睾吸虫分泌-排泄抗原在血清学诊断中的意义 被引量:9
1
作者 崔香淑 金元哲 李顺玉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1857-1858,共2页
目的评价华支睾吸虫分泌-排泄抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中的价值,应用ELISA技术对华支睾吸虫的成虫粗抗原和分泌-排泄抗原的敏感性和特异性进行比较。方法制备华支睾吸虫的粗抗原和分泌-排泄抗原,以ELISA方法对华支睾吸虫感染患者50... 目的评价华支睾吸虫分泌-排泄抗原在华支睾吸虫病血清学诊断中的价值,应用ELISA技术对华支睾吸虫的成虫粗抗原和分泌-排泄抗原的敏感性和特异性进行比较。方法制备华支睾吸虫的粗抗原和分泌-排泄抗原,以ELISA方法对华支睾吸虫感染患者509人、麝猫后睾吸虫感染者47人、卫氏并殖吸虫感染者20人、日本血吸虫感染者14人以及健康人血清163人,检测血清特异性IgG。结果比较华支睾吸虫分泌-排泄抗原的诊断的敏感性高于粗抗原,分泌-排泄抗原的特异性反应明显高于粗抗原。结论分泌-排泄抗原用于诊断感染华支睾吸虫病有较高的敏感性和特异性,是一种有效的诊断抗原。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 分泌-排泄抗原 酶连免疫吸附法 诊断
下载PDF
弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的脾与肠相关淋巴组织细胞免疫效应及动态变化 被引量:8
2
作者 刘娟娟 殷国荣 +2 位作者 张建红 孟晓丽 陈洁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第8期580-583,共4页
目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫... 目的观察弓形虫与Vero细胞共培养提取的排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的脾及肠相关淋巴组织(GALT)细胞免疫效应及动态变化。方法84只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组以ESA(20μg/只)为抗原,对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液(20μl/只),鼻内免疫2次,间隔2周。末次滴鼻后第1、2、3、4、5、6、7周处死小鼠,分离脾、派伊尔结(PP)及小肠上皮内淋巴细胞(IEL)并计数。结果实验组小鼠脾淋巴细胞第3周达高峰,第1、2、3周明显高于对照组;PP淋巴细胞明显增生,第3周达高峰,第1、2、3、4、5周显著高于对照组;IEL第2周增生达高峰,第1~3周显著高于对照组。结论弓形虫ESA鼻内免疫BALB/c小鼠可有效诱导不同黏膜部位及系统特异性的细胞免疫应答,且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 细胞免疫应答
下载PDF
弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导体液免疫应答的动态观察 被引量:6
3
作者 殷国荣 周永安 +2 位作者 刘娟娟 孟晓丽 刘红丽 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2007年第3期135-140,共6页
观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原(Excreted-secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化,为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB/c小鼠84只随机分为实验组和对照组,实... 观察从Vero细胞与弓形虫速殖子共培养液分离的排泄-分泌抗原(Excreted-secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠诱导的体液免疫应答及动态变化,为弓形虫复合黏膜疫苗候选抗原提供实验依据。BALB/c小鼠84只随机分为实验组和对照组,实验组以ESA为抗原(20μg/只),对照组用未接种弓形虫的细胞培养上清液20μL(μg/只),滴鼻免疫2次(间隔2周)。分别于2次免疫后第1、2、3、4、5、6、7周颈椎脱位处死小鼠。ELISA法测定血清IgG、IgA,粪便sIgA及肠液sIgA。结果表明,免疫组小鼠血清IgG、IgA和粪便sIgA及肠液sIgA均增高。血清IgG、IgA水平分别第5周、第4周达高峰,免疫后第1~7周(P〈0.05)显著高于对照组。粪便sIgA第4周即达高峰,之后逐渐降低,至第7周仍(P〈0.05)显著高于对照组。肠液sIgA第4周达高峰,第2、3、4周(P〈0.05)高于对照组。可见,弓形虫ESA鼻内免疫BALB/c小鼠可有效诱导体液免疫应答,特异性抗体生成明显且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原 鼻内免疫 黏膜免疫 IgA
下载PDF
Vero细胞无血清培养制备弓形虫排泄-分泌抗原适宜条件的筛选 被引量:2
4
作者 吴静 刘娟娟 +3 位作者 殷国荣 孟晓丽 刘红丽 王海龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期903-905,共3页
目的筛选Vero细胞无血清培养制备弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)的适宜条件。方法采用拉丁方析因设计。第一部分:在血清浓度为0.5%、1.0%、2.0%、4.0%的培养基中,共培养Vero细胞与弓形虫速殖子,分别于培养3、6、12、24h时,改为无血清培养基,... 目的筛选Vero细胞无血清培养制备弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)的适宜条件。方法采用拉丁方析因设计。第一部分:在血清浓度为0.5%、1.0%、2.0%、4.0%的培养基中,共培养Vero细胞与弓形虫速殖子,分别于培养3、6、12、24h时,改为无血清培养基,继续培养至第7天,收集培养上清液,制备ESA,并检测蛋白含量。第二部分:在含1.0%血清培养基中共培养Vero细胞与弓形虫速殖子,分别于培养12、24、48、72h时,改为无血清培养基,继续培养至第7、9、11、13天,收集培养上清液,制备ESA,并检测蛋白含量。结果Vero细胞与弓形虫速殖子在1.0%血清浓度培养基中培养12或24h时,无血清培养基继续培养7d,制备的ESA蛋白含量显著高于其他血清浓度(0.5%、2.0%、4.0%)及含血清培养时间(3、6h)。Vero细胞与弓形虫速殖子在含1.0%血清培养基中共培养12、24h,无血清培养基继续培养至第13天,制备的ESA蛋白含量显著高于其他培养时间(48、72h)和无血清培养基继续培养时间(7、9、11d)。结论培养基的血清浓度以及含血清和无血清培养时间是影响体外制备ESA的重要因素。Vero细胞与弓形虫速殖子在1.0%血清浓度培养基中培养12h,无血清培养基继续培养13d,为制备ESA的适宜条件。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 VERO细胞 无血清培养
下载PDF
华支睾吸虫成虫虫体与排泄-分泌物抗原在ELISA检测中的评价 被引量:6
5
作者 叶春艳 王峰 +6 位作者 吴秀萍 李玉香 杨秀云 于申业 邓洪宽 刘相叶 刘明远 《实用诊断与治疗杂志》 2008年第4期241-243,共3页
目的:探讨华支睾吸虫成虫可溶性抗原和排泄-分泌物抗原ELISA检测的临床诊断价值。方法:分别以虫体可溶性抗原和排泄-分泌物抗原作为诊断抗原,采用间接ELISA检测方法检测感染者(来自流行区,粪便虫卵检测阳性)血清107份和健康人(来自非流... 目的:探讨华支睾吸虫成虫可溶性抗原和排泄-分泌物抗原ELISA检测的临床诊断价值。方法:分别以虫体可溶性抗原和排泄-分泌物抗原作为诊断抗原,采用间接ELISA检测方法检测感染者(来自流行区,粪便虫卵检测阳性)血清107份和健康人(来自非流行区,粪便虫卵检测阴性)血清50份,计算其敏感性、特异性和符合率,并进行两种诊断抗原间的统计学比较与评价。结果:可溶性抗原的敏感性为58.88%,特异性为98%,符合率为71.34%;排泄-分泌物抗原的敏感性为87.85%,特异性为100%,符合率为91.72%。经统计学分析,两者敏感性和符合率差异具有统计学意义(P<0.05)。特异性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:作为诊断抗原,排泄-分泌物抗原优于可溶性抗原。排泄-分泌物抗原具有较高的敏感性与特异性,对于华支睾吸虫感染具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 可溶性抗原 排泄-分泌抗原 ELISA
下载PDF
旋毛虫排泄-分泌抗原的制备及在免疫学诊断中的应用研究 被引量:3
6
作者 苑淑贤 任科研 +2 位作者 杨金生 董冬梅 姚新华 《农业与技术》 2006年第4期70-73,共4页
目的:将排泄-分泌抗原用于Dot-ELISA免疫学诊断试验,检测其抗原特异性和敏感性。方法经培养24h、48h、72 h排泄-分泌抗原ES1、ES2、ES3,对38头份猪旋毛虫病阳性猪血清、98头猪旋毛虫阴性血清、26头猪囊虫阳性血清、35头猪蛔虫阳性血清... 目的:将排泄-分泌抗原用于Dot-ELISA免疫学诊断试验,检测其抗原特异性和敏感性。方法经培养24h、48h、72 h排泄-分泌抗原ES1、ES2、ES3,对38头份猪旋毛虫病阳性猪血清、98头猪旋毛虫阴性血清、26头猪囊虫阳性血清、35头猪蛔虫阳性血清和21头猪细颈囊尾蚴阳性血清进行了Dt-ELISA免疫学方法检测并于粗抗原进行比较。结果排泄-分泌抗原的特异性为ES1(99.44%)、ES2(96.11%)、ES3(92.77%),敏感性ES1(97.36%)、ES2(92.11%)、ES3(84.21%)。结论排泄-分泌抗原ES1(培养24小时)抗原特异性强,敏感性高,重复性好,用于旋毛虫病的免疫诊断有重要作用。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄-分泌抗原(ES) 斑点免疫试验(Dot-ELISA)
下载PDF
弓形虫速殖子细胞质、细胞膜、排泄-分泌抗原蛋白分子测定及特异性免疫反应的试验分析 被引量:9
7
作者 王世海 熊美华 +1 位作者 王秀珍 刘露霞 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2003年第3期144-146,共3页
目的 研究弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分 ,主要蛋白分子的抗原性和用于血清学诊断的价值。 方法 用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分和主要蛋白分子 ,用免疫印渍技术以弓形虫患者血清识别弓形虫各类抗原的免... 目的 研究弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分 ,主要蛋白分子的抗原性和用于血清学诊断的价值。 方法 用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分和主要蛋白分子 ,用免疫印渍技术以弓形虫患者血清识别弓形虫各类抗原的免疫反应靶位。 结果 弓形虫速殖子细胞质抗原、细胞膜抗原和分泌代谢抗原的主要蛋白分子分别为 85、5 2、38ku;4 8、35、16、14 ku和 15 8、95、2 7、15、13ku及弓形虫患者特异性血清识别速殖子各类抗原的免疫反应靶位分别是 32、4 0和 2 7ku。 结论 弓形虫速殖子各类抗原间存在各自独特的抗原决定簇和可被特异性记忆抗体识别的免疫反应受体。此对于提高弓形虫感染的免疫学诊断及免疫学预防均具有一定的实用价值。 展开更多
关键词 弓形虫 速殖子 细胞质 细胞膜 排泄-分泌抗原蛋白 分子测定 特异性免疫反应 试验
下载PDF
旋毛虫排泄分泌抗原p49基因的克隆 被引量:14
8
作者 宋思扬 郑忠辉 +3 位作者 黄耀坚 张伟光 蔡海松 苏文金 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期117-120,共4页
应用DNA重组技术将编码旋毛虫肌幼虫49KDa抗原的基因克隆于大肠杆菌中.设计特异的PCR引物,用PT-PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫总RNA中反转录并扩增出约1.1Kb的靶DNA.用BamHI和EcoRI酶解后将其克... 应用DNA重组技术将编码旋毛虫肌幼虫49KDa抗原的基因克隆于大肠杆菌中.设计特异的PCR引物,用PT-PCR技术直接从旋毛虫肌幼虫总RNA中反转录并扩增出约1.1Kb的靶DNA.用BamHI和EcoRI酶解后将其克隆到质粒载体pUC19中,用X-gal培养基筛选重组子.该重组子经相同的核酸内切酶水解获得约2.7Kb和1.1Kb两个片段,分别与pUC19和目的基因的大小相同,目的基因经序列分析并与文献报道的序列比较发现具有97.8%的同源性. 展开更多
关键词 旋毛虫 p49基因 RT-PCR 克隆 排泄-分泌抗原
下载PDF
小鼠腹水中弓形虫排泄分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的免疫应答 被引量:6
9
作者 刘娟娟 殷国荣 +3 位作者 管志玉 石蓉 张宇斌 孟晓丽 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第2期110-114,共5页
目的观察弓形虫感染小鼠腹水中分离的排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠对不同粘膜部位和系统的免疫效应。方法将5~6周龄BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,实验组分别用从感染弓形虫后24、48、72 h小鼠腹... 目的观察弓形虫感染小鼠腹水中分离的排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)鼻内免疫小鼠对不同粘膜部位和系统的免疫效应。方法将5~6周龄BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只,实验组分别用从感染弓形虫后24、48、72 h小鼠腹水中提取的ESA 20μg/只鼻内免疫小鼠2次,间隔2周;对照组用20μl/只PBS滴鼻。观察小鼠健康和死亡情况,记录体重。末次免疫后第3周处死小鼠,计数PP(Peyer’s patches)个数;分离PP淋巴细胞、脾淋巴细胞、小肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocyte,IEL)及肠系膜淋巴结细胞(mesenteric lymph node lympho-cyte,MLNL)并计数。眼眶采血和收集直肠内粪便,ELISA检测血清特异性IgG水平及粪便sIgA。结果72 h ESA组小鼠免疫后健康状况较差,体重逐渐降低,死亡4只;其他组小鼠体重仍呈增高趋势。各实验组小鼠IEL、MLNL、脾淋巴细胞以及PP淋巴细胞的增殖活性均高于对照组(P〈0.05),72 h和48 h ESA组高于24 h ESA组(P〈0.01)。免疫后第3周,各实验组小鼠血清IgG、粪便sIgA水平均高于对照组(P〈0.05),72 h和48 h ESA组高于24 h ESA组(P〈0.01)。结论感染后不同时间提取的腹水弓形虫ESA鼻内免疫小鼠均可诱导不同粘膜部位及系统特异性的免疫应答,48 h ESA的免疫效果最好。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄-分泌抗原(ESA) 粘膜免疫 鼻内免疫 粘膜疫苗
下载PDF
霍乱毒素联合弓形虫排泄-分泌抗原鼻内免疫小鼠诱导的GALT和NALT黏膜免疫应答 被引量:2
10
作者 李润花 殷丽天 +3 位作者 孟晓丽 刘红丽 王海龙 殷国荣 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第4期265-268,259,共5页
目的观察霍乱毒素(CT)联合弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠诱导的肠相关淋巴组织(GALT)和鼻相关淋巴组织(NALT)黏膜部位的免疫应答。方法将48只5~6周龄BABL/c小鼠随机均分为3组,分别用PBS、ESA和CT+ESA滴鼻免疫小鼠2... 目的观察霍乱毒素(CT)联合弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)鼻内免疫小鼠诱导的肠相关淋巴组织(GALT)和鼻相关淋巴组织(NALT)黏膜部位的免疫应答。方法将48只5~6周龄BABL/c小鼠随机均分为3组,分别用PBS、ESA和CT+ESA滴鼻免疫小鼠2次,间隔2周。末次免疫后14d,处死小鼠,ELISA测定小鼠粪便和鼻咽冲洗液sIgA抗体水平;计数派伊尔淋巴集结(PP)、肠上皮淋巴细胞(IEL)、NALT和鼻通道(NC)淋巴细胞数,免疫细胞化学法检测CD4^+、CD8^+T细胞亚群水平。结果免疫后14d,CT+ESA组小鼠鼻咽冲洗液和粪便sIgA水平显著高于ESA组和PBS组(P〈0.01);CT+ESA和ESA组小鼠GALT部位的PP淋巴细胞显著增生,主要以CD4^+T细胞为主;而IEL以CD8^+T细胞增生为主,CD4^+/CD8^+比值降低(P〈0.05)。CT+ESA NALT内淋巴细胞明显增生。CT+ESA组NC淋巴细胞显著升高(P〈0.01),以CD4^+T细胞增生为主。结论CT佐剂联合ESA滴鼻免疫BALB/c小鼠可诱导GALT和NALT黏膜部位免疫应答。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 霍乱毒素 排泄-分泌抗原 黏膜免疫 肠相关淋巴组织 鼻相关淋巴组织
原文传递
旋毛虫相对分子质量53000抗原蛋白基因克隆载体的构建 被引量:1
11
作者 卫海燕 崔晶 王中全 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第3期465-468,共4页
目的:构建编码旋毛虫相对分子质量53000抗原蛋白基因(Ts53)的克隆载体并进行序列分析。方法:应用RT—PCR方法从河南省猪源旋毛虫肌幼虫总RNA中扩增目的基因Ts53,将PCR产物克隆入pUC18载体中构建重组质粒pUC18-Ts53,进行测序及同... 目的:构建编码旋毛虫相对分子质量53000抗原蛋白基因(Ts53)的克隆载体并进行序列分析。方法:应用RT—PCR方法从河南省猪源旋毛虫肌幼虫总RNA中扩增目的基因Ts53,将PCR产物克隆入pUC18载体中构建重组质粒pUC18-Ts53,进行测序及同源性分析。结果:克隆了旋毛虫肌幼虫的Ts53基因,所获基因的核苷酸序列与GenBank所登录的旋毛虫Ts53蛋白基因序列的同源性为99.06%。应用Kyte—Doolittle方法进行氨基酸的亲水性分析表明,53000蛋白抗原性最强的部位可能位于220~230氨基酸残基处。结论:成功构建了旋毛虫相对分子质量53000蛋白抗原基因的克隆载体pUC18-Ts53,为Ts53基因的表达奠定了基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄-分泌抗原 基因克隆
下载PDF
弓形虫排泄-分泌抗原和可溶性速殖子抗原免疫原性的观察 被引量:1
12
作者 刘娟娟 吴静 +3 位作者 殷国荣 孟晓丽 刘红丽 刘转转 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第1期16-19,23,共5页
目的观察弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为4组,分别用PBS 20μl/只、体外排泄-分泌抗原(excreted/secre... 目的观察弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为4组,分别用PBS 20μl/只、体外排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigenin vitro,ESAv)、腹腔排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen in mice,ESAm)和STAg各20μg/只鼻内免疫2次,间隔14 d。分别于末次免疫后14 d和44 d每组处死8只小鼠,计数肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,iIEL)和脾淋巴细胞,ELISA法检测血清IgG和小肠冲洗液sIgA抗体水平。结果实验期间,ESAm组小鼠于二次免疫后状态欠佳,其他各组小鼠健康状况良好。末次免疫后14 d,各抗原组脾淋巴细胞及iIEL均增殖活跃,细胞数与PBS组比较,差异具统计学意义(P<0.05或P<0.01);至免疫后44 d,两种ESA组脾淋巴细胞及iIEL数与PBS组比较差异具统计学意义(P<0.05)。各抗原组血清IgG水平在免疫后14 d和44 d均明显增高,与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫后14 d肠液sIgA水平ESAv、ES-Am和STAg组与PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),ESAm和STAg组与ESAv组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),两种ESA组在免疫后44 d与PBS组比较差异仍具统计学意义(P<0.05)。结论ESAv、ESAm和STAg鼻内免疫均可诱导粘膜及系统的细胞和体液免疫应答,有较强的免疫原性。但ESAm可能对机体有毒副作用,不适宜直接鼻内免疫。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 可溶性速殖子抗原 鼻内免疫 免疫原性
原文传递
利用弓形虫病人血清筛选弓形虫速殖子特异性抗原 被引量:1
13
作者 张影 张瑾 +3 位作者 杨英超 薄淑英 辛晓芳 王国治 《中国药事》 CAS 2011年第6期550-553,共4页
目的筛选能引起人体免疫反应的弓形虫抗原标记。方法利用实验室保存的9份弓形虫病人血清标准品、6份阴性血清标准品,以及2份弓形虫病人血清国际标准品作为一抗,分别与刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株的可溶性速殖子抗原(soluble tach... 目的筛选能引起人体免疫反应的弓形虫抗原标记。方法利用实验室保存的9份弓形虫病人血清标准品、6份阴性血清标准品,以及2份弓形虫病人血清国际标准品作为一抗,分别与刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株的可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigens,ESA)进行免疫印迹反应。结果发现STAg中有10条蛋白带与所用阳性血清均发生免疫反应;ESA中有4条蛋白带能与所有阳性血清发生免疫反应,这些蛋白与阴性血清均不发生免疫反应。其中分子量为30、35、49、50、54kDa的STAg抗原以及分子量为23、24、28kDa的ESA抗原能与所用阳性血清发生较强免疫反应。结论本实验结果将有助于寻找在弓形虫病人体内能够引起免疫反应的弓形虫诊断抗原和免疫保护性抗原,为弓形虫诊断试剂以及疫苗开发奠定初步基础。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 可溶性速殖子抗原 排泄-分泌抗原 血清标准品 免疫印迹
下载PDF
弓形虫排泄-分泌抗原含糖组分对小鼠调节性T细胞的影响
14
作者 唐叶 焦玉萌 +4 位作者 章黎 梁越进 孙新娟 刘亚平 王勇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期324-328,共5页
目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)含糖组分对小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法采用刀豆蛋白A(ConA)琼脂糖凝胶亲和层析技术提取ESA中的含糖组分,经硫酸-苯酚法测定提取物糖含量,并采用BCA法进行蛋白定量测定。将20只雌性C57BL/... 目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(ESA)含糖组分对小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法采用刀豆蛋白A(ConA)琼脂糖凝胶亲和层析技术提取ESA中的含糖组分,经硫酸-苯酚法测定提取物糖含量,并采用BCA法进行蛋白定量测定。将20只雌性C57BL/6小鼠随机分为5组,分别对各组小鼠腹腔注射ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA、完全RPMI-1640和甘露糖各100μl。4d后处死,流式细胞仪检测各组脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例。结果采用ConA琼脂糖凝胶亲和层析法成功提取弓形虫ESA中含糖成分。与对照组相比(RPMI-1640组和甘露糖组),ESA、ConA结合ESA、ConA未结合ESA注射组小鼠的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例均明显下降(P均<0.01)。结论弓形虫ESA中含糖组分和蛋白组分均能引起小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占脾细胞的比例下降。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 调节性T细胞 亲和层析
原文传递
刚地弓形虫排泄-分泌抗原和可溶性速殖子抗原免疫原性的观察
15
作者 刘娟娟 殷国荣 +1 位作者 刘红丽 孟晓丽 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2011年第1期1-6,共6页
目的观察刚地弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别用PBS20μl/只、ESA和STAg... 目的观察刚地弓形虫速殖子排泄-分泌抗原(excreted/secreted antigen,ESA)和可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)鼻内免疫小鼠的免疫原性。方法BALB/c小鼠随机分为3组,每组10只,分别用PBS20μl/只、ESA和STAg各20μg/只鼻内免疫2次,间隔14d。分别于末次免疫后14d每组处死小鼠,计数肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,iIEL)和脾淋巴细胞,ELISA法检测血清IgG和小肠冲洗液IgA抗体水平。结果实验期间,末次免疫后14d,各抗原组脾淋巴细胞及iIEL均增殖活跃,细胞数与PBS组比较,差异具有统计学意义(P〈0.05)。各抗原组血清IgG水平在免疫后14d明显增高,与PBS组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。免疫后14d肠液IgA水平ESA和STAg组与PBS组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论ESA和STAg鼻内免疫均可诱导黏膜及系统的细胞和体液免疫应答,有较强的免疫原性。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 可溶性速殖子抗原 鼻内免疫 免疫原性
原文传递
刚地弓形虫排泄-分泌抗原体外诱导的IFN-γ促CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡作用 被引量:3
16
作者 葛可 仇晓艳 +4 位作者 王丽娟 陈慧 张璐彦 邱竞帆 王勇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期183-188,共6页
目的研究刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株和Tg Ctwh3株排泄-分泌抗原(ESA)体外诱导小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡和IFN-γ分泌方面的差异。方法分别制备刚地弓形虫RH株和Tg Ctwh3株的ESA。将分离的野生型C57BL/6小鼠脾单个核细胞... 目的研究刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株和Tg Ctwh3株排泄-分泌抗原(ESA)体外诱导小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡和IFN-γ分泌方面的差异。方法分别制备刚地弓形虫RH株和Tg Ctwh3株的ESA。将分离的野生型C57BL/6小鼠脾单个核细胞随机分为3组(每孔2×10~6细胞),分别加入RH株ESA、Tg Ctwh3株ESA(均为10μg/ml)和鸡卵清蛋白(OVA)进行诱导刺激,流式细胞术检测各组诱导刺激48 h和72 h的CD4^+CD25^+调节性T细胞的早期凋亡情况,ELISA检测各组诱导刺激72 h细胞培养上清中的γ干扰素(IFN-γ)分泌水平。另外,将分离的野生型C57BL/6小鼠脾单个核细胞随机分为2大组(每孔2×10~6细胞),其中一大组在分别加入两株ESA(10μg/ml)和OVA的同时加入抗IFN-γ中和抗体(10μg/ml)进行诱导刺激72 h,流式细胞术检测各组CD4^+CD25^+调节性T细胞早期凋亡情况。用两虫株ESA(10μg/ml)及OVA分别诱导刺激IFN-γ基因敲除型和野生型C57BL/6小鼠的脾单个核细胞(每孔2×10~6细胞)72 h后,流式细胞术检测各组CD4^+CD25^+调节性T细胞早期凋亡情况。结果制备的刚地弓形虫RH株和Tg Ctwh3株ESA抗原蛋白浓度分别为0.54 mg/ml和2.14 mg/ml。流式细胞术检测结果显示,RH株和Tg Ctwh3株ESA组诱导刺激48 h后,CD4^+CD25^+调节性T细胞的早期凋亡率分别为(12.90±1.26)%和(9.71±1.04)%,均显著高于OVA对照组(4.48±0.48)%(P<0.01);诱导刺激72 h后,RH株ESA组诱导CD4^+CD25^+调节性T细胞的凋亡率为(15.21±1.11)%,仍明显高于Tg Ctwh3株ESA组(11.02±0.92)%(P<0.05)和OVA对照组(10.10±1.49)%(P<0.01)。ELISA检测结果显示,RH株和Tg Ctwh3株ESA组诱导刺激脾单个核细胞72 h的培养上清中分泌的IFN-γ水平分别为(4 764.0±118.7)pg/ml和(3 629.0±33.6)pg/ml(P<0.01),均显著高于OVA对照组的(679.4±30.6)pg/ml(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,RH株ESA加抗IFN-γ中和抗体组诱导CD4^+CD25^+调节性T细胞的早期凋亡率为(10.44±1.44)%,明显低于未加抗IFN-γ中和抗体组(14.96±0.83)%(P<0.05);但Tg Ctwh3株ESA加抗IFN-γ中和抗体与否诱导CD4^+CD25^+调节性T细胞的早期凋亡率变化不大(P>0.05)。RH株ESA诱导IFN-γ基因敲除小鼠的CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡率为(10.64±0.55)%,明显低于野生型小鼠的(15.21±1.11)%(P<0.01);Tg Ctwh3株ESA诱导两组小鼠的CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论刚地弓形虫RH株ESA在体外诱导CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡及促IFN-γ分泌强于Tg Ctwh3株ESA。弓形虫ESA诱导机体产生IFN-γ可通过介导调节性T细胞凋亡来促进弓形虫感染早期抗感染免疫力的形成。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄-分泌抗原 CD4^+CD25^+调节性T细胞 细胞凋亡 Γ-干扰素
原文传递
四个旋毛虫地理株肌幼虫虫体抗原和排泄—分泌抗原的免疫学分析
17
作者 简莎娜 艾琳 +6 位作者 陈韶红 蔡玉春 卢艳 陈木新 吴秀萍 田利光 陈家旭 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2015年第3期137-141,共5页
目的 分析4个旋毛虫地理株肌幼虫的虫体抗原、排泄-分泌抗原的蛋白组成和免疫学特性。 方法 昆明小鼠16只,每只感染旋毛虫肌幼虫300条,45 d后人工消化法收集旋毛虫肌幼虫制备虫体抗原,幼虫体外培养获得排泄-分泌抗原。用聚丙烯酰胺... 目的 分析4个旋毛虫地理株肌幼虫的虫体抗原、排泄-分泌抗原的蛋白组成和免疫学特性。 方法 昆明小鼠16只,每只感染旋毛虫肌幼虫300条,45 d后人工消化法收集旋毛虫肌幼虫制备虫体抗原,幼虫体外培养获得排泄-分泌抗原。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)分析虫体抗原和排泄-分泌抗原的组分,并用感染小鼠血清和旋毛虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、棘球蚴虫病、裂头蚴病、鞭虫病、卫氏并殖吸虫病、囊尾蚴病、钩虫病患者血清与抗原进行免疫印迹反应,观察阳性反应抗原条带。 结果 经SDS-PAGE分析,4个旋毛虫地理株虫体可溶性抗原和排泄-分泌抗原均有8条主带,相对分子质量(Mr)分别为100 000、66 000、49 000、45 000、43 000、30 000、18 000、12 000和Mr 66 000、53 000、49 000、43 000、36 000、34 000、30 000、16 000。免疫印迹结果显示,旋毛虫肌幼虫虫体可溶性抗原与旋毛虫病患者和感染小鼠血清的反应条带以Mr 95 000、72 000、53 000、49 000、43 000为主,排泄-分泌抗原反应条带以Mr 53 000、49 000、43 000、40 000为主。 结论 各地理株不同抗原的组分和免疫学反应存在一定的差异,其中虫体可溶性抗原的Mr 95 000、72 000成分和排泄-分泌抗原的Mr 40 000成分是进一步研究的重点。 展开更多
关键词 旋毛虫 地理株 幼虫虫体抗原 幼虫排泄-分泌抗原
原文传递
刚地弓形虫蛋白质组学研究进展 被引量:6
18
作者 邱竞帆 葛可 王勇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期214-218,221,共6页
近10年,蛋白质组学技术广泛应用于刚地弓形虫研究中,研究结果为全面深入揭示该虫体的生命活动本质奠定了基础。目前,关于刚地弓形虫的整体蛋白质组学研究仅限于速殖子和卵囊阶段的蛋白质组学;亚蛋白质组学研究包括一些重要抗原,如可溶... 近10年,蛋白质组学技术广泛应用于刚地弓形虫研究中,研究结果为全面深入揭示该虫体的生命活动本质奠定了基础。目前,关于刚地弓形虫的整体蛋白质组学研究仅限于速殖子和卵囊阶段的蛋白质组学;亚蛋白质组学研究包括一些重要抗原,如可溶性速殖子抗原、糖蛋白和免疫蛋白质组学研究等;差异蛋白质组学研究着眼于阐明不同虫株或不同虫种的差异蛋白。本文综述了弓形虫蛋白质组学的研究现状,详细阐述了弓形虫整体蛋白质组学、亚蛋白质组学和差异蛋白质组学的主要研究进展。此外,本文还概述了弓形虫蛋白质组学的生物信息学平台,并对弓形虫蛋白质组学的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 蛋白质组学 排泄-分泌抗原 可溶性速殖子抗原
下载PDF
弓形虫ESA鼻内免疫小鼠诱导的黏膜及系统免疫应答
19
作者 管志玉 孟晓丽 +2 位作者 殷国荣 刘红丽 王海龙 《山西医科大学学报》 CAS 2007年第10期868-871,共4页
目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果。方法将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只。实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔... 目的观察弓形虫排泄-分泌抗原(excreted-secreted antigen,ESA)鼻内免疫小鼠诱导黏膜和系统免疫应答的效果。方法将64只BALB/c小鼠随机分为8个组,每组8只。实验组小鼠分别用腹腔感染弓形虫小鼠第0,6,12,24,36,48和60小时无菌收集的腹腔液中获取的ESA 20μg/只滴鼻免疫小鼠2次,间隔14 d,以PBS 20μl/只滴鼻为对照。逐日观察小鼠状况,于末次免疫后第14天颈椎脱位处死小鼠,检测血清特异性IgG、小肠冲洗液sIgA水平,分离肠上皮内淋巴细胞(intesti-nal intraepithelial lymphocytes,iIEL)及肠系膜淋巴结淋巴细胞(mesenteric lymph node lymphocytes,MLNL)并计数。结果60 h组小鼠初次免疫后第8-11天,有倦怠、饮水及采食量减少等表现,体重增长较其他组缓慢(P<0.05),其他组小鼠健康状况良好。不同时相ESA鼻内免疫小鼠后特异性抗体水平升高,MLNLi、IEL发生增殖性应答。48 h组和60 h组各项指标均明显高于0 h组(P<0.01)及PBS组(P<0.05)。结论48 h和60 h弓形虫ESA均能诱导黏膜及系统免疫应答,但60h ESA可能对机体有毒副作用,不适宜直接滴鼻免疫,48 h ESA可作为弓形虫黏膜疫苗的候选抗原。 展开更多
关键词 弓形虫 免疫 黏膜 排泄-分泌抗原 鼻内免疫
下载PDF
猪旋毛虫病胶体金检测试纸条的制备 被引量:2
20
作者 苑淑贤 姚新华 +6 位作者 任科研 李萌 杨金生 苑冬梅 李煜洁 常军亮 杨淑苹 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第8期957-958,963,共3页
目的制备猪旋毛虫病胶体金检测试纸条,并进行验证。方法采用免疫胶体金技术标记猪旋毛虫排泄-分泌(Excretory-secretory,ES)抗原,在AE98NC膜上点上兔抗猪IgG作为检测带,抗ES抗原抗体作为对照带,将NC印膜、胶体金抗原玻璃棉、吸水纸和支... 目的制备猪旋毛虫病胶体金检测试纸条,并进行验证。方法采用免疫胶体金技术标记猪旋毛虫排泄-分泌(Excretory-secretory,ES)抗原,在AE98NC膜上点上兔抗猪IgG作为检测带,抗ES抗原抗体作为对照带,将NC印膜、胶体金抗原玻璃棉、吸水纸和支持板用胶膜组成试纸条,进行敏感性、特异性和重复性验证,并与ELISA检测方法进行对比。结果试纸条检测38头份猪旋毛虫阳性血清的敏感性为97.37%;检测33头份猪蛔虫阳性血清、26头份猪囊虫阳性血清、21头份猪细颈囊尾蚴阳性血清和98头份猪旋毛虫阴性血清的特异性为98.88%;重复性好;与ELISA检测方法的敏感性和特异性差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论已制备猪旋毛虫病胶体金检测试纸条,该试纸条敏感、特异、简便、快速,可用于猪旋毛虫病的检疫及流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫病 排泄-分泌抗原 胶体金 试纸条
原文传递
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部