用RT-PCR对新城疫病毒分离株毒力的快速鉴定

根据新城疫病毒NDV强、弱毒株在F蛋白裂解位点氨基酸组成的序列上的差异,参照有关文献,设计了三对引物A+B,A+C,A+D。引物A+B能从Lasoa,B1,I系和强毒F48E8的含毒尿囊液中扩增出362bp的核酸片段,引物A+C仅能从强毒F48E8的含毒尿囊液中扩增出254bp的片段,引物A+D仅能从Lasota,B1,I系的含毒尿囊液扩增出254bp片段。三对引物均不能从IB,IBD,AI的含毒尿囊液和正常鸡胚尿液中扩增出特异片段。从发病鸡群中分离到3株NDV毒株中均被A+C引物扩出,它们的鸡胚平均死亡时间MDT分别为51.8h、53.2h、52.6h,1日龄雏鸡脑内接种指数ICPI为1.65、1.63、1.60,证明是NDV强毒。利用RT-PCR对NDV人工感染鸡最早可于攻毒后第二天从病鸡气管中检测到NDV,其次为泄殖腔和脾、肾。利用RT-PCR对NDV毒力的鉴定与传统生物学试验对强弱毒的测定结果完全吻合。但前者可在24小时内直接对组织匀浆进行诊断,具有快速简便和敏感的特点。

我国新分离乙型脑炎病毒株毒力特征研究

将分离自不同年代的17株乙脑毒株在小鼠脑内传代,然后将病毒在BHK21细胞单层上观察不同毒株的空斑形成大小形态,小鼠脑内和皮下途径接种观察病毒的毒力,结果显示不同毒株在BHK21细胞上形成的噬斑大小不尽相同,减毒株形成的噬斑最小。所有毒株对小鼠的脑内毒力都很强,病毒滴度高达lg8.0/mL以上,毒株间无明显差异。毒株对9～11g小日龄小鼠的皮下毒力有一定差异但不明显,但对14～16g较大日龄小鼠则差别明显。PFU/LD50的对数值差异除一株(M47株)为8.44外,其余各株差别在3.94～0.45间。本研究结果证明自然界乙脑毒株存在明显的神经外毒力差异,毒力差异与分离年代和病毒基因型无关,但从人体分离到的毒株毒力表现较强。

6种鸡艾美耳球虫野外分离株毒力研究

对6种鸡艾美耳球虫野外分离株进行毒力测定,为各野外分离株动物感染相关实验的攻虫剂量提供依据。结果显示:柔嫩艾美耳球虫梅州株(TMZ)、毒害艾美耳球虫贺州株(NHZ)的孑包子化卵囊感染剂量为5×10^4个/只时,10/10的鸡相应病变部位盲肠、小肠中段病变记分M+3.0分,当高剂量10.0×10^4个/只感染时鸡只死亡率达20%;当剂量为10.0×10^4个/只感染巨型艾美耳球虫莱阳株(MLY)、布氏艾美耳球虫保定株(BBD)、和缓艾美耳球虫保定株(MiBD)以及堆型艾美耳球虫河源株(AHY),感染组出现水样粪便、饲料粪等球虫病临床症状,鸡只体重明显减轻,与空白对照组相比,巨型、布氏、堆型艾美耳球虫感染组相对增重率均低于60%,和缓艾美耳球虫感染组相对增重率低于70%。结果表明:柔嫩艾美耳球虫梅州株(TMZ)、毒害艾美耳球虫贺州株(NHZ)具有较强的致病力,感染后剖检肠道可见明显的特征性病变;巨型艾美耳球虫莱阳株、布氏艾美耳球虫保定株、和缓艾美耳球虫保定株,以及堆型艾美耳球虫河源株的致病性主要体现为粪便变稀和体重减轻。