奶牛乳腺炎分离细菌裂解苗免疫试验

应用自奶牛乳房炎检测为阳性的牛乳汁中分离的4种优势G+菌,分别与葡聚糖、油佐剂和FIA3种佐剂制成细菌裂解苗免疫家兔。于免疫后第7天开始,每隔7d采集心脏血,分离血清,以试管凝集试验检测血清中抗体效价,以此评价所分离细菌的免疫原性和所用佐剂的免疫促进作用,筛选适宜的佐剂。结果显示,所分离的优势G+菌刺激家兔机体后可产生高效价的抗体,免疫后第7天,抗体效价开始明显上升,第28天左右达到峰值,并一直持续到试验结束(63d)。比较3种佐剂的免疫促进效果,以FIA效果最好,但3种疫苗间的免疫效果差异不显著,而与对照组相比,差异均达极显著(P<0.01)。

两种临床分离细菌对醋酸氯己定抗力测定

目的研究医院临床分离致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对醋酸氯己定的抗性力水平。方法采用肉汤稀释法测定两种16株临床分离细菌对醋酸氯己定抗力水平，并同相应标准菌株作平行比较。结果大肠杆菌临床株对醋酸氯己定的MIC为1～2mg／L，标准菌株对醋酸氯己定的MIC为2mg／L；有3株大肠杆菌的MIC低于标准菌株。金黄色葡萄球菌临床株对醋酸氯己定的MIC为0．98～1．95mg／L，标准株对醋酸氯己定的MIC为0．98mg／L；有2株临床株的MIC高于标准菌株。大肠杆菌临床株对醋酸氯己定的MBC为4～8mg／L，标准菌株对醋酸氯己定的MBC为2mg／L；大肠杆菌临床株的MBC均高于标准菌株。金黄色葡萄球菌临床株对醋酸氯己定的MBC为15．6～125mg／L，标准菌株的MBC为62．5mg／L；有3株金黄色葡萄球菌临床株MBC高于标准株。结论临床分离的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对醋酸氯己定抗力多数比标准株强，只有个别菌株低于标准株。

某医院2015年血培养分离细菌的分布特征及耐药性分析

目的分析血培养分离细菌的分布特征及耐药性,为临床合理选择抗生素药提供指导。方法细菌鉴定采用VITEK 2全自动细菌分析仪,采用K-B法进行药敏试验。结果在血培养阳性标本中,以革兰氏阴性杆菌和和革兰氏阳性球菌为主,所占比例分别为30.7%及64.2%,不同菌种间所占比率差异有统计学意义(P<0.05)。真菌占5.1%,革兰氏阳性球菌中凝固酶阴性葡萄球菌数居多,革兰氏阴性杆菌中主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等,但金黄色葡萄球菌均不耐万古霉素菌株,敏感率达到了100%;凝固酶阴性葡萄球菌对其他种抗菌药均存在不同程度耐药性。结论革兰氏阳性球及阴性杆菌作为医院感染的主要病原菌种,对数种抗菌药呈现出高度的耐药性,对临床医师合理应用抗菌药具有重要参考。

腹腔感染患者分离细菌的分布及耐药性分析

腹腔感染(IAIs)外科最常见,是导致患者死亡的重要病因。随着外科领域各种新技术的不断发展和抗菌药物的广泛应用,腹腔感染病原菌的种类及耐药性也在发生着变化[1]。对腹腔感染患者标本培养中常见分离细菌的种类分布和耐药性分析,能给临床经验治疗提供科学依据。本文对我院腹腔感染患者送检的标本分离细菌的菌种分布及耐药性进行分析研究,报告如下。

血培养分离细菌的耐药性分析

正常人血液是无菌的,当细菌侵入血流时,可引起菌血症或败血症.血培养检查的快速和准确性对于诊断和治疗均具有极其重要的意义.

固体平板磁泳分离细菌新方法

氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans）能够在胞内形成电子致密的磁性颗粒，它的这种特性使利用氧化亚铁硫杆菌合成生物纳米磁性材料有可能实现。为了筛选出合成磁性颗粒能力强的菌株，对原有的液体磁泳进行了改进，采用了新的固体平板磁泳方法来筛选纯化目的菌株。经过磁泳分离后，细菌中含磁性颗粒的细胞比例由原始菌群的30％上升到90％，胞内含有的磁颗粒数目也由1～2颗增加至2～5颗，筛选得到的细菌在人工磁场下会进行趋磁运动。实验结果表明，氧化亚铁硫杆菌具有较弱的趋磁性，在人工磁场下会进行趋磁运动，但仅在地磁场作用下不能定向运动，利用固体平板磁泳筛选纯化含有磁性颗粒的氧化亚铁硫杆菌的方法是切实可行的，磁泳分离技术的进一步完善和改进为传统的微生物菌种分离提供了新的途径，为研究纯氧化亚铁硫杆菌菌株胞内磁性颗粒的形成条件及机理提供了前提条件，也为今后从浸矿细菌中分离筛选更多的含有磁性颗粒的菌株打下基础。

我院2002年临床分离细菌的药敏试验结果分析

近几年来,国内外文献报道细菌的耐药性逐渐增高,并且多重耐药细菌比例增高.如产超广谱酶(ESBLS)的大肠埃烯菌,肺炎克雷伯菌.耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS).多重耐药的铜绿假单胞菌等多重耐药菌在院内感染中占有较大比例.给临床抗感染治疗带来困难,甚至使治疗失败.因此,对耐药菌监测已成为WHO的一项重要工作.whonet.5统计分析软件在全球广泛使用.我院为WHO中国网点的分点,应用whonet.5统计分析软件统计我院临床标本分离细菌的药敏结果,分析细菌耐药趋势,为临床经验用药提供实验室依据.

甘孜藏区某三甲医院分离细菌分布现状及对常用抗菌药物的耐药性分析

目的:回顾性调查甘孜藏区某三甲医院分离细菌分布现状并分析其对常用抗菌药物的耐药率。方法:选取甘孜藏区某三甲医院2017年至2020年临床分离菌株,分析标本来源、细菌检出情况、药敏结果。结果:分离非重复菌株2946株,主要来自ICU、胃肠外科、肝胆外科、创伤外科、泌尿外科;分离的病原菌中革兰阳性菌、革兰阴性菌分别占31.40%、68.60%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物高度敏感,多数菌属耐药率均<10%,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌对青霉素G耐药率最高,其次为红霉素,未检出对耐万古霉素、利奈唑胺金黄色葡萄球菌;检出超广谱β-内酰胺酶菌(ESBLs)1068株(36.25%)、耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)159株(5.40%)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)248株(8.42%)、耐万古霉素肠球菌(VRE)2株(0.07%);MRS及MRA均对青霉素G、苯唑西林完全耐药,对万古霉素、利奈唑胺、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶敏感。结论:甘孜藏区某三甲医院2017年至2020年分离的细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌等为主,ESBLs、MRS、MRSA、VRE均有一定检出率,且均有一定耐药性,应合理应用抗菌药物。

流产对母马阴道和肠道菌群多样性的影响及阴道细菌的分离鉴定

本试验旨在研究流产对母马阴道和肠道菌群结构的差异性,并对阴道致病菌进行分离鉴定,探讨造成马流产的阴道致病菌的生物学特性。分别采集流产母马和健康母马阴道分泌物和粪便样品,流产母马组10匹和健康组6匹,并对阴道和粪便样本进行16S rRNA V3~V4区高通量测序,比较两组之间阴道和肠道菌群差异,同时分离鉴定流产母马的阴道细菌。结果显示:与健康组相比,Alpha多样性显示,流产组阴道、肠道菌群丰富度及多样性有增高趋势。通过Binary jaccard及unweighted unifrac两种距离矩阵分析可知两组阴道、肠道菌群的相似性、分散性、丰度及进化关系均存在差异。在门水平上,与健康组相比,流产组阴道菌群中拟杆菌门和梭杆菌门丰度降低,而螺旋菌门和厚壁菌门丰度增加;流产组肠道菌群中厚壁菌门和拟杆菌门丰度降低,变形菌门和放线菌门丰度增加。LEfSe分析乳杆菌科、乳杆菌属、肠杆菌目、肠杆菌科、镰刀菌属为流产组阴道菌群优势菌种;放线菌属、放线菌门、放线菌纲、棒状杆菌科、棒状杆菌属、嗜肽菌属、嗜肽菌科是流产组的肠道优势菌种,这些细菌丰度的改变可能与疾病的发生发展以及预后相关。功能预测及相关性分析发现正常阴道细菌与健康相关微生物之间存在正相关。正常阴道微生物与流产相关病原菌呈负相关。流产母马肠道中代谢相关通路与阴道中疾病的发生相关通路有较高的相关性;肠道中免疫疾病相关通路与阴道中免疫系统的变化也存在正相关,提示肠道中代谢功能的紊乱可能会引发阴道某些疾病的发生。从流产母马阴道中分离并鉴定出4种主要致病菌,分别为沙门菌、马链球菌兽疫亚种、克雷伯菌和大肠杆菌。母马阴道及肠道菌群高度参与流产疾病的发生与免疫的过程,在妊娠时,菌群的代谢途径可能起沟通肠道与阴道菌群和宿主免疫的桥梁作用,阴道菌群中厚壁菌门和放线菌门及肠道菌群中Arcanobacterium hippocoleae和Streptococcus infantarius与流产相关的变形菌门呈负相关。沙门菌可能是造成马流产的主要致病菌,并且变形菌门、嗜胨菌属、弯曲杆菌属可能是发生流产的阴道菌群生物标志物。

湖南某规模奶牛场乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

为明确湖南某规模奶牛场临床型乳房炎病原菌种类及耐药情况,对32份临床型乳房炎患牛乳样进行传统细菌培养、生化试验、16S rDNA核苷酸序列检测和药敏试验。结果共分离鉴定大肠杆菌23株,乳房链球菌12株,肺炎克雷伯氏菌5株,样品检出率分别为71.9%(23/32)、37.5%(12/32)、15.6%(5/32);药敏试验显示,大部分大肠杆菌和乳房链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、庆大霉素、林可霉素耐药严重,耐药率达50%~86.9%,对亚胺培南、四环素及红霉素较敏感,敏感率达75%~82.6%;肺炎克雷伯氏菌对大部分抗生素耐药程度较低,对亚胺培南、阿米卡星、四环素、红霉素敏感率为100%。建议该养殖场抓好环境卫生、提高生物安全,建立科学、合理治疗方案。

新疆巴音布鲁克羊腐蹄病的细菌分离及鉴定

【目的】为了解新疆巴音布鲁克羊坏死杆菌致病性,【方法】2020-2022年采集和静县患病羊腐烂蹄肢部等病理组织样品60份进行病原菌分离鉴定,采用人工感染试验和细菌鉴定仪、高效液相质谱仪分别对其进行致病性检测和细菌鉴定。【结果】巴音布鲁克羊腐蹄病共分离到坏死杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌等3株致病菌,为混合感染。3株菌均可引起小鼠死亡,对小鼠的致死率为46.67%。【结论】新疆和静县巴音布鲁克羊羊群中腐蹄病流行较为普遍,做好圈舍卫生消毒工作,对控制腐蹄病有效。

黄唇鱼迟缓爱德华氏菌分离鉴定及药敏分析

2023年入夏以来,东莞市黄唇鱼(Bahaba taipingensis)自然保护区救护基地出现黄唇鱼发病和死亡病例,症状主要为食欲下降,体表发红、充血,眼球突出,角膜白浊溃烂,吻部溃烂;解剖后发现腹腔有大量腹水,肝肿大呈褐色。为确定其病因,针对性制定防治措施,采集死亡病鱼的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠、鳃丝等组织样品。从病死鱼体内分离到一株优势菌株,命名为DG230920,通过对菌株的形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列综合分析,鉴定该菌为迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)。病理组织学检测结果显示,心脏、肝脏、脾脏、肾脏和鳃均有明显的炎症反应,肠出血、黏膜上皮细胞脱落,脾淋巴细胞稀疏、内皮细胞变性坏死,肾小管变性坏死,鳃见鳃丝脱落、出血。对分离菌株进行药敏分析,结果为对环丙沙星、左氧氟沙星高度敏感,最低抑菌质量浓度仅≤0.25 mg·mL^(-1);其次是厄他培南,最低抑菌质量浓度≤0.5 mg·mL^(-1)。结果表明,黄唇鱼发病原因可能是迟缓爱德华氏菌感染,分离菌株遗传序列稳定,对临床使用的抗菌药物均为敏感。研究提示,应加强黄唇鱼迟缓爱德华氏菌感染的防治,选用敏感药物科学治疗。

南极中山站伯氏肩孔南极鱼体液和肠道微生物的分离鉴定及功能分析

为研究南极鱼体微生物的功能,对采自南极中山站附近海域的伯氏肩孔南极鱼(Trematomus bernacchii)体液和肠道内容物中的微生物进行筛选培养,挑选代表性菌株进行生理生化特性测定和次级代谢产物功能验证,并在活体上进行功能初探,观察在低温环境下其对宿主的影响。结果表明:分离获得的菌株主要分布在变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes),通过16S rDNA基因序列比对发现,菌株Ignatzschineria sp.LJ11可能是一株潜在新种;伊格纳茨氏菌属(Ignatzschineria)和芽孢杆菌属(Bacillus)菌的菌液粗提物对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ATCC 6633)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila ATCC 35654)及金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有明显的抑制作用;用菌株Ignatzschineria sp.LJ11和Bacillus sp.hb117饲喂的斑马鱼在低温下存活的时间较对照组更长;肠道微生物多样性分析显示,投喂Bacillus sp.hb117的斑马鱼肠道微生物中气单胞菌属(Aeromonas)细菌占比最高(超过60%),而投喂Ignatzschineria sp.LJ11的斑马鱼肠道微生物中弧菌属(Vibrio)为优势属。研究表明,在低温(18℃)条件下使用不同类型培养基从伯氏肩孔南极鱼体液和肠道内容物中分离出的多为变形菌门和厚壁菌门,这些菌株具有新型抗生素潜力,同时还有增强宿主耐寒的潜质,该发现为进一步探究极地细菌功能提供了新的思路。

产后健康母牛与子宫炎牛子宫内细菌分离与鉴定

[目的]为对产后健康母牛与子宫炎牛子宫内细菌进行分离与鉴定,深入了解产后母牛子宫内致病菌的种类,探讨母牛子宫炎的主要致病因素。[方法]对临沂沂水县某私人母牛养殖场正常分娩后母牛进行子宫炎检测,随机挑选无子宫炎母牛及子宫炎呈阳性患牛各30头,采集各试验母牛子宫内容物,接种于不同培养基,37℃、24~48 h分离培养,根据不同种类细菌染色镜检鉴定。[结果]培养得到171株菌株,主要有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、克雷伯氏杆菌和蜡状芽孢杆菌等。大肠杆菌占比最高,为23.98%,革兰氏染色结果显示阴性菌较多,多以混合感染方式存在。检出率结果显示,产后健康母牛子宫内大肠杆菌占比最高,为36.67%。整体检出情况显示,产后初期、中期、末期病原菌检出率分别为100%、87.5%、60%。子宫炎患病母牛子宫产后初期和中期占比最高的病原菌为大肠杆菌(100%和60%),产后末期占比最高的病原菌是蜡状芽孢杆菌(60%)。不论产后初期、中期、末期,病原菌检出率均为100%。[结论]母牛子宫发生炎症后,病原菌大量生长繁殖,加剧炎症反应,促进子宫内膜炎进程。

抗镉细菌分离鉴定及其对镉胁迫水稻幼苗生长的影响

目的:旨在分离筛选有利于水稻种植的抗镉菌种资源。方法:从水稻根际土壤分离纯化抗镉细菌,采用火焰原子吸收分光光度法测定菌株对镉的吸附去除率,利用水培法检测抗镉细菌对镉胁迫水稻幼苗生长的影响,运用16S rRNA基因序列分析来鉴定菌株的种属。结果:分离得到4株抗镉细菌Cdr-1~Cdr-4,其中菌株Cdr-2在含镉400 mg/L的培养液生长后,对镉离子吸附去除率为61.27%。菌株Cdr-2对无镉水稻营养液中培养的水稻幼苗具有促生长作用,但它对受10 mg/L镉离胁迫的水稻幼苗生长有加强毒害作用。经16S rRNA基因测序鉴定菌株Cdr-2为产气克雷伯氏菌。结论:从水稻根际土壤分离出一株兼有抗镉性和促生长性的产气克雷伯氏菌Cdr-2。意义:研究结果可为产气克雷伯氏菌Cdr-2在水稻种植上应用提供参考。

一株猪链球菌的分离鉴定及其对小鼠的致病性试验

旨在了解猪链球菌的致病性,明确其致病特征。采用常规方法分离细菌,对分离菌株进行形态学观察,革兰氏染色,GDH基因、毒力基因PCR扩增,小鼠致病性检测,试验小鼠肺脏和肝脏细菌分离鉴定。结果显示,从猪肺脏组织中分离到猪链球菌,革兰氏染色结果为阳性,成功扩增出GDH基因,毒力基因型为gdh+、orf+、Gapdh+和Fbps+。小鼠致病性试验显示试验小鼠表现出一定的临床症状,但未死亡,表明该菌株为弱毒株。本研究明确了广西地区猪链球菌弱毒株的致病特征,研究结果可为猪链球菌病的致病特征和防控提供参考,具有一定的公共卫生意义。

新疆牧区羊产气荚膜梭菌病分离及鉴定

【目的】旨在探究新疆牧区羊产气荚膜梭菌病流行情况。【方法】于2023年春、秋季期间对来自新疆不同地区牧区羊群中疑似梭菌感染死亡羊150余份病料进行病原菌分离鉴定。采用人工感染试验和细菌鉴定仪、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)分别对其进行致病性检测和细菌鉴定。【结果】共分离出羊产气荚膜梭菌病16株,动物试验显示,分离菌株可引起小鼠死亡,致死率达80%。【结论】羊产气荚膜梭菌病在新疆牧区时有发生,做好免疫接种及科学管理,对控制羊梭菌病行之有效。

鹅源大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解锦屏县某规模化鹅场致病菌的流行状况和耐药规律,采集15只病死雏鹅的不同组织样本,进行细菌分离培养、PCR检测、药敏试验和耐药基因筛查。结果分离得到13株大肠杆菌、6株沙门氏菌、4株鸭疫里默氏杆菌;12株大肠杆菌和6株沙门氏菌为多重耐药菌,对头孢噻肟、头孢唑啉等14种抗生素耐药;鸭疫里默氏杆菌对克林霉素、红霉素、多粘菌素B、环丙沙星的耐药率均为100%;floR基因检出率,大肠杆菌为76.92%,沙门氏菌和鸭疫里默氏杆菌为100%;大肠杆菌blaCTX-M-1G基因检出率为61.53%,沙门氏菌blaCTX-M-9G基因检出率为83.33%。综上所述,这些鹅源分离菌株大多为多重耐药菌。

黄唇鱼致病性哈维氏弧菌的分离与鉴定

2023年3—5月,广东省惠州市一方海(广东)海洋牧场有限公司所繁育的黄唇鱼(Bahaba taipingensis)出现发病和死亡的现象,症状主要为食欲下降,凸眼,尾鳍和背鳍出现出血,且腹腔有腹水,内脏部位附近出现充血,此外其他部位均正常,无其他明显病症。为确定其病因,采集死亡病鱼的心脏、脾脏、肝脏、头肾、中肾等组织样品,通过对分离纯化的优势菌株的形态特征、16S rRNA基因序列进行综合分析,大部分组织样品均发现哈维氏弧菌,由此初步确定此次引发黄唇鱼死亡的菌株为哈维氏弧菌。

临床标本细菌分离及细菌耐药性监测

目的 连续对临床标本细菌分离和耐药性的监测分析 ,了解细菌分布及变迁 ,常见致病菌耐药性变化趋势。方法 对 1992～ 2 0 0 1年从临床标本分离 73 86株细菌统计及对常见细菌耐药率分析。结果 历年分离细菌中均以革兰阴性杆菌为主 (70 .2 1% ) ,由高到低的排序为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属 ;近 3年克雷伯菌属分离率明显增加。革兰阳性球菌中凝固酶阴性葡萄球菌分离率最高 ,占革兰阳性球菌的 3 8.3 2 %。铜绿假单胞菌对庆大霉素、头孢噻肟、氨苄西林 /舒巴坦、头孢曲松耐药率 >60 % ;哌拉西林、头孢噻肟、环丙沙星的耐药率由初期使用低耐药率分别增高到 2 0 0 1年的 44 .9%、83 .6%、47.6% ;近年来 ,大肠埃希菌对氟喹诺酮类耐药率为5 0 %～ 60 % ;革兰阳性球菌对常用抗菌药物耐药率均较高 ,在 2 0 0 1年的统计中金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素耐药率已达 80 .5 %～ 82 .4% ;对苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药率是 72 .0 %。结论 临床医师要重视细菌耐药性监测工作 ,掌握细菌变迁及细菌耐药性变化动向 。