抑制分离缺陷基因3表达的宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力观察

目的观察抑制分离缺陷基因3(PARD 3)表达的宫颈癌细胞系SiHa增殖、凋亡、侵袭及迁移能力变化,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期SiHa细胞分为siRNC组、siRNA1组及siRNA2组,分别用骨架质粒、PARD 3siRNA1(抑制PARD3基因表达)、PARD 3siRNA2(抑制PARD3基因表达)腺病毒真核载体转染。采用qRTPCR法检测三组转染后细胞PARD3、JAK2 mRNA。培养24、48 h时采用WesternBlotting法检测三组PARD3蛋白,培养48 h时检测三组细胞JAK2、p-JAK2蛋白。采用CCK-8法观察三组细胞增殖情况,细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况。培养48 h时取各组细胞,采用Transwell小室观察细胞迁移、侵袭情况。结果与siRNC组比较,siR⁃NA1组、siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P均<0.05);与siRNA1组比较,siRNA2组PARD3 mRNA相对表达量低(P<0.05)。与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组p-JAK2蛋白相对表达量均增加(P均<0.05)。与siRNC组比较,培养24、48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞的OD450值增加(P均<0.05)。与siRNC组比较,siRNA2组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与siRNC组比较,培养48 h时siRNA1组、siRNA2组细胞迁移数、侵袭数增加(P均<0.05)。结论抑制PARD3表达的SiHa细胞细胞增殖能力升高、细胞凋亡能力降低、侵袭迁移能力增强。PARD3可能通过上调p-JAK2表达促进SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移,抑制细胞凋亡。

沉默Pard3基因对宫颈癌细胞系SiHa迁移、侵袭的影响及其机制

目的观察沉默分离缺陷基因3(Pard3)对宫颈癌细胞系SiHa迁移、侵袭的影响,并探讨其机制。方法将SiHa细胞分为siRNA1组、siRNA2组、siRNC组,siRNA1组转染Pard3小干扰RNA1(siRNA1),siRNA2组转染Pard3小干扰RNA2(siRNA2),siRNC组转染空白载体,转染后继续孵育48 h。采用Transwell迁移和侵袭试验观察三组细胞迁移和侵袭能力,分别以细胞迁移相对数量和细胞侵袭相对数量表示。采用实时定量PCR法检测三组细胞中Pard3、JAK2、STAT3、E-cadherin、Vimentin mRNA。采用Western blotting法检测三组细胞中Pard3、JAK2、STAT3、E-cadherin、Vimentin、p-JAK2、p-STAT3蛋白。结果siRNA1组、siRNA2组细胞迁移相对数量和细胞侵袭相对数量均高于siRNC组(P均<0.05)。siRNA1组、siRNA2组细胞中Pard3、E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均低于siRNC组(P均<0.05),siRNA1组、siRNA2组细胞中VimentinmRNA、Vimentin蛋白、p-JAK2蛋白、p-STAT3蛋白相对表达量均高于siRNC组(P均<0.05)。结论沉默Pard3基因可促进SiHa细胞的迁移和侵袭,其机制可能与调节JAK2/STAT3磷酸化信号转导通路有关。

PAR6基因在肿瘤发生发展中的作用及机制

细胞极性是多种不同种类细胞的共同特征，对细胞的正常分化和功能是必须的。分离缺陷基因6（PAR6）编码的 PAR6蛋白对于细胞的不对称分裂和细胞极化生长至关重要。PAR6蛋白是PAR6极性复合体的重要组成部分，其影响细胞中心体的合成及中心体蛋白的补给。细胞中心体数目异常、细胞极性的丧失，最终可能导致肿瘤的发生。