复配精油抑菌剂的制备及其对鲜切猪肉的抑菌作用

通过水蒸气蒸馏法提取肉桂精油(cinnamon essential oil,CEO)、紫苏精油(perilla essential oil,PEO)和牛至精油(oregano essential oil,OEO),采用微量二倍稀释法测定单一植物精油的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),用棋盘稀释法计算复配精油的分级抑菌浓度指数,并探究复配精油的抑菌效果及对鲜切猪肉的保鲜抑菌作用。结果表明,3种精油对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,抑菌能力的大小表现为肉桂精油>紫苏精油>牛至精油;精油复配后存在协同或相加现象,其中,肉桂-紫苏精油复配剂对2种供试菌种的抑菌效果显著优于肉桂-牛至精油复配剂和紫苏-牛至精油复配剂。肉桂-紫苏精油复配在一定程度上能有效抑制鲜切猪肉水分及蛋白质含量的损耗,抑制微生物生长并保持鲜猪肉的色泽,证明肉桂-紫苏精油复配剂对鲜切猪肉具有一定的保鲜抑菌作用。

迷迭香酸与抗菌药联合对含fosA3基因细菌抑菌效果的研究

试验旨在探讨迷迭香酸与抗菌药联合体外抗含fosA3耐药基因大肠杆菌的效果。本试验对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,用牛津杯法测定迷迭香酸的抑菌活性,平板涂布法测定迷迭香酸的杀菌活性,采用96孔反应板二倍微量稀释法分别检测迷迭香酸与抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),再用微量棋盘稀释法测定迷迭香酸与抗菌药联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,分离到含fosA3耐药基因大肠杆菌;迷迭香酸的MIC为640μg/mL,迷迭香酸与环丙沙星、左旋氧氟沙星、黏杆菌素、加替沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠联合应用后其FICI≤0.5,有协同作用;与头孢曲松钠、诺氟沙星、痢菌净联合应用后0.5<FICI≤1,有相加作用;与阿莫西林、磷霉素、氟苯尼考联合应用后1<FICI≤2,存在无关作用。结果表明,迷迭香酸对含fosA3基因大肠杆菌有一定的抑菌活性和杀菌活性,其与部分抗菌药联合应用后,抗菌药体外抗菌活性显著增强。

透骨草水提物与抗菌药对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外联合抑菌作用研究

为了探究透骨草水提物与抗菌药联合对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外抑菌作用。采用二倍微量肉汤稀释法与微量方阵棋盘法来测定各抗菌药与透骨草的最低抑菌浓度(MIC)及二者联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用后的FICI分别为0.75、0.75、1.00、0.75、0.53、0.51、0.75、4.5、4.5、4.5、4.5、2.5。结果表明,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平联合作用时有相加作用;与环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用时有颉颃作用。

磷霉素、多粘菌素B等抗菌药物对儿童感染NDM-1肺炎克雷伯菌的体外药敏研究

目的评价磷霉素、多粘菌素B、美罗培南和氨曲南四种抗菌药物对产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)肺炎克雷伯菌的作用。方法收集广东省妇幼保健院2019年的儿科PICU的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP),使用mCIM和eCIM初步筛查CRKP的类型,并PCR鉴定NDM基因序列。同时PCR检测NDM-KP携带磷霉素耐药基因Fos A。采用浓度梯度扩散法法测定磷霉素、多粘菌素B、美罗培南和氨曲南抗菌药物以及联合对NDM-KP的最低抑菌浓度(MIC),并计算分级抑菌浓度指数(FIC)。结果根据mCIM和eCIM初步筛查以及PCR结果,获得8株携带NDM的肺炎克雷伯菌株。以上8株NDM-KP对磷霉素或多粘菌素B均敏感,而氨曲南和美罗培南均耐药。磷霉素联合美罗培南存在协同作用,以及磷霉素联合多粘菌素B表现出部分协同作用,而其他联合方案对NDM-KP显示无相关作用。8株NDM-KP均未检测出磷霉素耐药基因Fos A。结论磷霉素或多粘菌素B,对NDM-KP有较好的抗菌效果;磷霉素联合美罗培南,以及磷霉素联合多粘菌素B对NDM-KP具有协同作用。

3种中药提取物联用对变形链球菌生长的影响

评价厚朴酚、木犀草素、甘草甜素及其两两混合物对变形链球菌的体外联合抗菌效应,为防龋与口腔清洁方案提高实验依据。采用微量肉汤稀释法、棋盘设计法及Heatmap分析测定厚朴酚、木犀草素、甘草甜素单用及联合应用对变形链球菌最小抑菌浓度(MIC),并计算抑菌浓度指数(Fractional inhibitory concentration index, FIC),判定联合效应:FIC≤0.5为协同作用,0.52.0为拮抗作用。各混合物联合应用的FIC指数均为1,具有相加作用。厚朴酚、木犀草素、甘草甜素分别联合应用能有效的抑制变形链球菌生长,且抑制作用优于单独应用。

32种食品添加剂对蜡样芽孢杆菌的协同抑菌作用

以常见食源性致病菌蜡样芽孢杆菌为研究对象,采用试管二倍稀释法测定常用的32种食品添加剂单用和复配对蜡样芽孢杆菌的最低抑菌浓度(MIC),筛选协同抑菌效果最好的组合,研究不同配比对蜡样芽孢杆菌的抑菌效果,以及在最佳抑菌组合条件下的杀菌动力学。结果表明:食品防腐剂和酸味剂对蜡样芽孢杆菌有较好的抑制效果,食品添加剂复配以壳聚糖季铵盐和ε-聚赖氨酸协同抑菌效果最好,分级抑菌浓度指数(FICI)达到0.03125。当壳聚糖季铵盐与ε-聚赖氨酸配比为1∶1复合时,协同抑菌效果最佳:作用4 h对蜡样芽孢杆菌的杀菌率为99.998%,作用96 h杀菌率达到100%。

黄芩苷对大肠杆菌AcrB外排泵的抑制作用及其机制

AcrAB-TolC外排泵系统是大肠杆菌产生多重耐药性(MDR)的重要生物学基础,内膜转运蛋白(AcrB)在该系统中起着决定性作用。为解决大肠杆菌的多重耐药问题,本试验以大肠杆菌AcrB为靶点通过虚拟筛选工具Autodock Vina进行筛选,得到与AcrB结合较好的中药单体抑制剂-黄芩苷,通过DS Visualizer分析黄芩苷与AcrB蛋白的相关作用力,应用联合抑菌试验验证黄芩苷与抗生素的联合抑菌作用,采用尼罗红外排试验验证黄芩苷对外排泵转运子AcrB的外排抑制作用,以实时荧光定量PCR方法检测黄芩苷对AcrB表达相关基因的影响,最后通过内膜质子梯度影响试验与外膜渗透稳定性试验验证黄芩苷抑制外排泵转运子AcrB的作用机制。结果显示,中药单体黄芩苷与AcrB蛋白结合位点形成氢键,并与对接位点多个氨基酸残基形成了疏水作用力,两者的结合作用力为44.7 kJ/mol;黄芩苷与磷霉素钠、头孢噻肟钠、氯霉素对大肠杆菌E320具有协同作用(FICI≤0.5);黄芩苷具有明显阻滞尼罗红外排作用的趋势且能够通过显著提高AcrB负调控蛋白AcrR、MarR、MppA、RpoS的mRNA表达从而降低AcrB蛋白的表达;0.625 g/L的黄芩苷对内膜质子梯度浓度与外膜渗透性均无明显影响。结果表明,黄芩苷具有成为多重耐药大肠杆菌外排泵抑制剂的潜质。

小分子Halicin抗金黄色葡萄球菌的初步研究

目的探讨Halicin对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。方法采用微量肉汤稀释法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;通过摇菌培养和稀释菌落计数法检测Halicin对金黄色葡萄球菌的时间-杀菌曲线;通过微量棋盘稀释法检测Halicin与常用抗菌药物的联合抗菌作用;通过结晶紫染色法测定Halicin对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制和清除作用;通过红细胞溶血试验初步检测Halicin对红细胞的毒性;最后,通过小鼠皮肤脓肿模型,取脓肿周围皮肤组织研磨稀释菌落计数。采用t检验比较Halicin的体内抗菌效果。结果Halicin对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用,其最低抑菌浓度为2~4 mg/L。Halicin 16 mg/L处理8 h后,金黄色葡萄球菌平均菌落数下降5.5×10^(6) CFU/ml(t=73,P<0.05),且呈现浓度依赖性。Halicin和氨苄西林联用时,表现为协同抗菌作用,其分级抑菌浓度指数为0.5。Halicin的浓度为4倍最低抑菌浓度时,可以有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成,使其生物膜总量(A_(570))从(2.89±0.09)减少到(1.35±0.17)(t=11.12,P<0.05),但对已形成的生物膜无显著清除效果。Halicin对红细胞几乎无溶血活性,即使当Halicin的浓度为128 mg/L,其溶血率仍低于10%。体内实验表明,20 mg/kg Halicin可使细菌数量下降3.0×10^(7) CFU/ml。结论Halicin对金黄色葡萄球具有较强的抑菌作用且无明显的溶血毒性。