白介素-4和白介素-13促进人肺成纤维细胞ADAM33基因的表达

目的探讨白介素-4(IL-4)和白介素-13(IL-13)对人肺成纤维细胞ADAM33(a disintegrin and a metal-loproteinase33,ADAM33)mRNA表达的影响。方法以不同浓度的IL-4或/和IL-13刺激培养的人肺成纤维细胞(MRC-5),然后用实时定量反转录多聚酶链反应(real-time RT-PCR)法测定ADAM33mRNA表达的变化。结果人肺成纤维细胞上存在着ADAM33mRNA的表达,当分别以10ng/mL的IL-4或IL-13刺激时,AD-AM33mRNA的表达增加呈现时间依赖性,至24h达到高峰。随着IL-4和IL-13刺激浓度的增加,ADAM33mRNA的表达也明显增加:以100ng/mL的IL-4和100ng/mL的IL-13刺激时,ADAM33mRNA的表达较未刺激细胞分别增加了(9.49±2.83)倍和(14.21±3.35)倍(P<0.01);而以10ng/mL的IL-4和10ng/mL的IL-13联合刺激时,ADAM33mRNA的表达较未刺激细胞增加了(15.06±4.57)倍(P<0.01)。结论IL-4和IL-13能明显促进肺成纤维细胞ADAM33mRNA的表达。

EB病毒编码潜伏膜蛋白1通过转录因子c-Jun和Ets1间信息交流调控鼻咽癌中基质金属蛋白酶9的表达

目的 探讨在EBV -LMP1作用下,基质金属蛋白酶9(MMP 9)启动子区相邻的AP 1( 5 33)和Ets( 5 4 0 )结合位点对其转录活化的影响,并确定LMP1可通过c -Jun和Ets1间信息交流(cross -talk)调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。方法 应用定点突变技术,在野生型MMP- 9 -CAT质粒的基础上,建立MMP- 9启动子区相邻Ets( 5 4 0 )结合位点和AP- 1 (- 5 33)结合位点单独突变体和共同突变体;在四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7中,比较LMP1对这些突变体报道基因活性的影响。通过针对c- Jun、Ets1的硫代反义寡核苷酸进行阻断,采用GelatinZymography观察c -Jun、Ets1及其cross- talk对LMP1介导的MMP 9表达的影响。结果 与野生型MMP -9 -CAT质粒比较,突变体的报道基因活性均降低(P <0 .0 1 ) ,以MMP- 9 -CATAP -1 ( 5 33) /Ets( 5 4 0 )mt降低最为显著;在c Jun和Ets1反义寡核苷酸单独或共同阻断后,LMP1介导的MMP -9活性均降低,以共同阻断的作用最为明显。结论 EBV -LMP1可以通过转录因子c -Jun和Ets1间cross talk调控鼻咽癌细胞中MMP 9的表达。

牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平的影响

目的:探讨牙周-正畸结合治疗对重度牙周炎患者龈沟液基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白介素-1β(IL-1β)、核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANKL/OPG)水平的影响。方法:选取2018年6月-2020年6月笔者医院诊治的重度牙周炎患者72例,以随机抽签法按1:1比例分为研究组和对照组,每组36例。对照组采取牙周组织再生术治疗,研究组采取牙周-正畸结合治疗。对比两组临床疗效、治疗前后牙周指标[牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)、临床附着丧失(CAL)]水平、牙齿松动度、邻接点至牙槽骨嵴间距离(BC-CP)、龈乳头高度(PH)、患牙前牙覆盖情况及龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平。结果:研究组总有效率(91.67%)高于对照组(72.22%),差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前相比,两组治疗后GI、PD、SBI、PLI、CAL水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后牙齿松动度均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后BC-CP、PH水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);与治疗前对比,两组治疗后前牙覆盖程度均得到明显改善,且研究组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后龈沟液MMP-2、IL-1β、RANKL/OPG水平均明显降低,且研究组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周-正畸结合治疗能显著改善重度牙周炎患者切牙区美学效果,且能进一步下调龈沟液MMP-2、IL-1β及RANKL/OPG水平,是治疗重度牙周炎的有效方法。

婴幼儿呼吸道合胞病毒感染性毛细支气管炎的易感性与MMP-3和MMP-9基因多态性

目的分析基质金属蛋白酶(MMP)-3和MMP-9启动子区基因多态性与婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)感染性毛细支气管炎的易感性。方法选取2015年1月-2019年12月海南省三亚市人民医院收治的295例RSV感染性毛细支气管炎患儿作为病例组,选取同期100名健康婴幼儿为对照组,对两组研究对象年龄、性别、早产情况、出生体质量、喂养方式、哮喘家族史、宠物接触史、被动吸烟史、过敏体质资料进行收集,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术对MMP-3启动子区基因11715A/6A和MMP-9启动子区基因1562 C/T的多态性进行检测。结果病例组患儿中早产、非母乳喂养、哮喘家族史、过敏体质的比例高于对照组(P<0.05)。两组研究对象MMP-3、MMP-9启动子区基因型频率及等位基因频率构成比的差异均有统计学意义(P<0.05),与对照组婴幼儿相比较,MMP-311715A/6A基因多态性及5A等位基因比例较高,MMP-311716A/6A基因多态性及6A等位基因比例较低,MMP-91562 C/C基因多态性及C等位基因比例较高,MMP-91562 C/T基因多态性、T/T基因多态性及T等位基因比例较低。结论RSV感染性毛细支气管炎易感性与MMP-3、MMP-9启动子区基因多态性有关,具有明显的遗传易感性倾向,临床医生应对于存在高危因素婴幼儿群体采取调节免疫功能、预防RSV感染等措施,降低毛细支气管炎风险。

SATB1及wnt/β-catenin信号通路相关分子在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的：探讨富含AT序列的特异性结合蛋白1（SATB1）及蛋白（wnt）/β连环蛋白（β-catenin）信号通路相关分子在调控滋养细胞侵袭以及在子痫前期发病中的作用。方法收集2013年3月-2014年3月在重庆医科大学附属第一医院行人工流产术的20例孕8-10周孕妇的绒毛组织（早孕组）；同期在妇产科住院行水囊引产的18例中孕期（孕18-20周）孕妇的胎盘组织（中孕组）；同期行择期剖宫产术的20例健康足月妊娠孕妇的胎盘组织（正常足月组）；同期住院行选择性剖宫产术分娩的20例子痫前期孕妇（孕33-38周）的胎盘组织（子痫前期组）。采用免疫组化SP法检测各组绒毛或胎盘组织中SATB1及β-catenin的蛋白表达定位；采用蛋白印迹法检测各组绒毛或胎盘组织中SATB1及β-catenin的蛋白表达水平；采用细胞免疫荧光法检测SATB1及β-catenin在滋养细胞株HTR8/SVneo细胞中的定位表达，并对细胞中SATB1及β-catenin蛋白表达水平进行检测；采用免疫共沉淀法检测子痫前期组胎盘组织和缺氧/复氧组HTR8/SVneo细胞中的SATB1与β-catenin的相互关系；采用明胶酶谱法检测子痫前期组和缺氧/复氧组细胞中基质金属蛋白酶（MMP）2、9的活性水平。结果（1）正常足月组胎盘组织合体滋养细胞结节和纤维素样坏死很少见，毛细血管数目丰富；子痫前期组胎盘组织可见合体滋养细胞胞核空泡化明显，有较多纤维素样坏死，绒毛内微血管数目减少。（2）各组绒毛或胎盘组织中均可见SATB1棕黄色染色颗粒，子痫前期组胎盘组织中SATB1阳性染色强度较正常足月组明显减弱。（3）各组绒毛或胎盘组织中均可见β-catenin蛋白的表达，子痫前期组胎盘组织中β-catenin阳性染色强度较正常足月组减弱。（4）早孕组、中孕组、正常足月组及子痫前期组中SATB1蛋白表达水平分别为0.300±0.009、0.271±0.015、0.238±0.018及0.153±0.007；β-catenin蛋白表达水平分别为0.743±0.041、0.648±0.021、0.549±0.069及0.269±0.047。子痫前期组SATB1及β-catenin蛋白表达水平均较早孕组、中孕组、正常足月组明显下降，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（5）常氧组及缺氧/复氧组SATB1蛋白定位于细胞滋养细胞的胞核中，缺氧/复氧组细胞的荧光强度较常氧组细胞明显减弱；常氧组及缺氧/复氧组β-catenin蛋白定位于细胞滋养细胞的胞核及胞质中，缺氧/复氧组细胞的荧光强度较常氧组细胞明显减弱。（6）常氧组细胞SATB1及β-catenin蛋白表达水平分别为0.213±0.005和0.797±0.081，而缺氧/复氧组分别为0.083±0.021和0.543±0.131。两组分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（7）子痫前期组胎盘组织中和缺氧/复氧组细胞中经SATB1抗体免疫共沉淀后的蛋白复合物中，均可检测到β-catenin蛋白的表达；同样，经β-catenin抗体免疫共沉淀后的蛋白复合物中，也均可检测到SATB1蛋白的表达。（8）子痫前期组胎盘组织中MMP-2、9活性水平分别为2.251±0.310、1.447±0.102，正常足月组分别为7.098±0.451、5.502±0.197，两组分别比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。缺氧/复氧组细胞中MMP-2、9活性水平分别为0.471±0.104、0.297±0.103，常氧组分别为0.842±0.209、0.595±0.100，缺氧/复氧组细胞明显低于常氧组，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中SATB1表达水平下降，可能是通过调控wnt/β-catenin信号通路而影响MMP-2、9的活性水平改变，使滋养细胞的侵袭力减弱，最终导致子痫前期的发生。