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FACSAria Ⅱ分选人肺腺癌A549细胞SP亚群的方法优化
被引量:
3
1
作者
田烨
赵犇鹏
+2 位作者
符蓉
杨洁
尹荟菁
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1594-1598,共5页
目的·通过优化流式分选人肺癌A549细胞SP亚群方法,提高SP亚群分选纯度并缩短分选时间,以提高分选活率。方法·制备单细胞悬液,不同终浓度维拉帕米孵育及Hoechst33342标记染色,经PI标记检测SP细胞比例。选择最佳染色浓度,100μ...
目的·通过优化流式分选人肺癌A549细胞SP亚群方法,提高SP亚群分选纯度并缩短分选时间,以提高分选活率。方法·制备单细胞悬液,不同终浓度维拉帕米孵育及Hoechst33342标记染色,经PI标记检测SP细胞比例。选择最佳染色浓度,100μm喷嘴,分选速度10μL/min,用一次分选法(纯度模式)和二次分选法(富集+纯度模式)分选SP细胞和MP细胞,比较分选后纯度和分选用时。通过二次分选法获得SP细胞和MP细胞,分别行Lyso-Tracker Red/Hoechst 33342染色共聚焦观察和成瘤实验。结果·经二次分选法,SP细胞纯度达到99%以上,1×10~8个细胞分选时间〈5.2 h。共聚焦镜下观察到SP细胞大小与MP细胞无明显差异,MP细胞的溶酶体数量较SP细胞显著增多。Hoechst 33342均能染色,细胞活率不受影响。在小鼠成瘤实验中,SP细胞成瘤体积较MP细胞显著增大。结论·A549肺癌细胞Hoechst33342染色终质量浓度宜用6μg/mL;采用FACSAriaⅡ对其SP细胞进行二次分选,不仅显著提高SP细胞分选纯度,还大大缩短分选时间,细胞活率不受影响。
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关键词
侧群细胞
细胞
分选
肿瘤干细胞
分选
纯度
分选活率
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题名
FACSAria Ⅱ分选人肺腺癌A549细胞SP亚群的方法优化
被引量:
3
1
作者
田烨
赵犇鹏
符蓉
杨洁
尹荟菁
机构
上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系公共平台流式实验室
复旦大学附属肿瘤医院/肿瘤研究所复旦大学上海医学院肿瘤学系
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期1594-1598,共5页
文摘
目的·通过优化流式分选人肺癌A549细胞SP亚群方法,提高SP亚群分选纯度并缩短分选时间,以提高分选活率。方法·制备单细胞悬液,不同终浓度维拉帕米孵育及Hoechst33342标记染色,经PI标记检测SP细胞比例。选择最佳染色浓度,100μm喷嘴,分选速度10μL/min,用一次分选法(纯度模式)和二次分选法(富集+纯度模式)分选SP细胞和MP细胞,比较分选后纯度和分选用时。通过二次分选法获得SP细胞和MP细胞,分别行Lyso-Tracker Red/Hoechst 33342染色共聚焦观察和成瘤实验。结果·经二次分选法,SP细胞纯度达到99%以上,1×10~8个细胞分选时间〈5.2 h。共聚焦镜下观察到SP细胞大小与MP细胞无明显差异,MP细胞的溶酶体数量较SP细胞显著增多。Hoechst 33342均能染色,细胞活率不受影响。在小鼠成瘤实验中,SP细胞成瘤体积较MP细胞显著增大。结论·A549肺癌细胞Hoechst33342染色终质量浓度宜用6μg/mL;采用FACSAriaⅡ对其SP细胞进行二次分选,不仅显著提高SP细胞分选纯度,还大大缩短分选时间,细胞活率不受影响。
关键词
侧群细胞
细胞
分选
肿瘤干细胞
分选
纯度
分选活率
Keywords
SP cells
cell sorting
cancer stem cells
sorting purity
sorting viability
分类号
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
FACSAria Ⅱ分选人肺腺癌A549细胞SP亚群的方法优化
田烨
赵犇鹏
符蓉
杨洁
尹荟菁
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
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