proBDNF对大鼠后足切割疼痛的影响

目的研究大鼠后足切割后proBDNF在脊髓和背根神经节的表达及注射proBDNF后大鼠的行为学变化。方法①16只大鼠随机分为切割组和对照组,切割组建立后足切割模型,取2组大鼠的脊髓和背根神经节行免疫荧光实验;②48只大鼠随机分为6组,每组8只,proBDNF腹腔注射大(Ⅰ组)、中(Ⅱ组)、小剂量组(Ⅲ组),鞘内注射组(Ⅳ组),足底注射组(Ⅴ组)和对照组(Ⅵ组)。各组大鼠建立后足切割模型,均行缩足阈值测定。结果①切割后1h大鼠背根神经节proBDNF的表达增强,脊髓proBDNF的表达没有明显变化;②Ⅰ组、Ⅱ组大鼠切割后大鼠右后足的机械痛阈明显高于Ⅲ组和Ⅵ组;Ⅳ组和Ⅴ组大鼠切割后大鼠右后足的机械痛阈与Ⅵ组相比无统计学意义。结论proBDNF在转运至脊髓之前已经转变为成体BDNF或者与其受体结合,腹腔注射proBDNF具有明显的止痛效果,并且其止痛作用有封顶效应。

脊髓细胞外调节激酶1/2在大鼠后足切割痛中的表达和作用

目的:探讨大鼠后足切割后脊髓ERK的表达情况。方法:以大鼠右后足切割作为急性疼痛模型;用免疫组织化学法测试脊髓磷酸化ERK(pERK)表达情况。ERK抑制剂U0126(1μg)在切割前20min或切割后20min鞘内注射。用von Frey纤维测试大鼠机械性痛敏。结果:大鼠后足切割后1min,在切割侧L4-L5脊髓浅层背侧角(板层Ⅰ和板层Ⅱ)ERK被迅速地激活,并在5min达到峰值,随后恢复到基础值。切割前鞘内给予U0126能显著减轻机械性痛敏,然而,切割后鞘内给予U0126对机械性痛敏的作用并不明显。结论:脊髓ERK在大鼠后足切割痛中产生机械性痛敏发挥了重要的作用。

后足切割痛大鼠脊髓及下丘脑室旁核内缩宫素及其受体表达变化

【目的】观察大鼠后足切割后中枢神经系统内缩宫素(oxytocin,OT)及其受体(oxytocin receptor,OTR)的变化规律。【方法】雄性SD大鼠随机分为切割痛组(n=70)和对照组(n=20),切割痛组大鼠在切割后的30 min、1、3、6、24 h取脊髓腰膨大和下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN),检测OT、OTR阳性细胞表达,及OT、OTR转录和蛋白表达变化。【结果】与对照组大鼠相比,切割痛大鼠PVN内的OT阳性细胞数量及OT蛋白总量在切割后30 min^6 h明显下降,而m RNA却在切割后30min^1 h内升高;脊髓背角内OT阳性细胞数和蛋白表达量在切割后30 min^6 h上升,而OT m RNA无表达;切割前后PVN内均未见OTR的表达,而脊髓腰膨大背角Ⅰ、Ⅱ板层内OTR在切割后30 min^12 h表达上升。【结论】切割痛大鼠PVN内合成的OT可转运至脊髓发挥痛觉调制作用。

Atosiban及纳洛酮对缩宫素镇痛作用的影响

目的观察atosiban和纳洛酮对缩宫素(oxytocin,OT)中枢痛觉调制作用的影响。方法雄性SD大鼠随机分为鞘内注射组和侧脑室注射组2个大组。每个大组又分为7个剂量组:生理盐水+OT组(C组);atosiban+OT高、中、低剂量组;纳洛酮+OT高、中、低剂量组。各组大鼠在切割给药后的10 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h进行机械性痛阈测定,检测其变化情况。结果鞘内和侧脑室内预注射atosiban大鼠在注射OT后各时间点痛阈均低于C组(P<0.05);预注射纳洛酮大鼠注射中、低剂量OT后痛阈较C组大鼠降低(P<0.05);预注射纳洛酮大鼠注射0.25 nmol OT后其痛阈与C组差异无统计学意义(P>0.05)。结论鞘内和侧脑室内预注射atosiban可以阻断OT的镇痛作用,纳洛酮部分阻断OT镇痛效应。

脑源性神经营养因子在大鼠后足切割疼痛中的作用

目的:观察脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠后足切割疼痛的影响。方法:采用纵行切割大鼠后足作为疼痛模型,运用免疫组织化学与免疫荧光双标记方法,观察大鼠后足切割后不同时间点(1-72hr)BDNF在相应节段背根神经节与脊髓内表达的变化。腹腔或鞘内注射BDNF抗体中和内源性BDNF后,以Von Frey尼龙纤维刺激后足行机械痛敏评价。结果:大鼠后足切割后1-24hr内,BDNF在切割侧L42-L5脊髓后角表达明增加,BDNF主要位于后角神经元内与神经末梢,星形胶质细胞与小胶质细胞内未见明显表达;在L42-L5背根神经节,BNDF免疫阳性细胞百分比在切割后1-24hr内也明显增加,增加的主要为大直经神经元;鞘内给予BDNF抗体可明显增加大鼠后足切割后的缩足阈值,而腹腔给予BDNF抗体对大鼠的缩足阈值影响较小。结论:BDNF参与了大鼠后足切割后机械痛敏的过程。