限制性酶切片段差异显示及其应用

差异显示技术(DD)-PCR是一种研究基因表达差异的重要而应用广泛的方法,传统的差异显示法由于在PCR时采用Poly穴T雪引物和随机引物而导致较高的假阳性率和产物的近Poly穴A雪非编码区的大量扩增。改进后的限制性酶切片段差异显示技术(RFDD)-PCR采用TaqI酶切双链cDNA,连上特殊设计的接头,再用经特殊设计的特异性配对于接头的引物来扩增,因此能重点扩增编码区并能极大地消除假阳性率。由于扩增时引物就带有荧光或放射性核素标记,还使得差异显示条带的检测更为方便、灵敏。本文简要介绍了该法的原理、步骤、应用及其优缺点。

限制性酶切片段差异显示技术搜寻和克隆肝癌相关基因

目的:筛选新的肝癌相关基因并对其作用进行研究,探讨肝癌的发生机制,从而对肝癌的早期诊断和治疗提供新的思路。方法:应用限制性酶切片段差异显示技术对比研究手术切除的新鲜的原发性肝细胞癌组织及其周围相对正常的肝组织,通过放射自显影显示结果并筛选差异条带。对差异表达基因序列进行克隆、测序和GenBank同源性比对,进一步分析差异表达的基因片段。结果:筛选出18条表达有差异的条带,其中肝癌组织表达上调的基因有16条,肝癌组织低表达或缺失,正常组织高表达的基因有2条。二次PCR扩增出3条差异条带,进行克隆、鉴定和测序,并进行同源性比较。其中1条基因与已知基因无明显同源性,可能为新的基因;1条基因序列与编码人类核糖体蛋白基因的cDNA同源性较高(86%);另有1条基因序列与编码P选择蛋白的基因高度同源(98%)。结论:共克隆鉴定了3条肝癌相关基因,并初步探讨其功能,为进一步探讨肝癌的发生机理提供了理论依据。

骨关节炎滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞基因表达的差异(英文)

背景:近年来,发现一些基因的单核苷酸多态性可能与骨关节炎的易感性有关,以往研究主要集中于骨关节炎与类风湿性关节炎滑膜细胞基因表达差异,滑膜成纤维细胞与其他组织成纤维细胞基因表达差异与骨关节炎的关系有待研究。目的:观察骨关节炎滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞基因表达的差异。设计:观察对比分析。单位:深圳市人民医院。材料:骨关节炎患者(均符合1995年美国风湿病学会的骨关节炎诊断标准)滑膜及正常志愿者皮肤由深圳市人民医院骨科提供,所有提供皮肤者均对实验项目知情同意。RPMI 1640培养基、胎牛血清、TRIZOL试剂(美国Invitrogen Life Technologies公司),pGEM-T质粒系统(美国Progema公司),Display PROFILE-BASIC及Display PROFILEProbe试剂盒(美国Qbiogen公司)。方法:实验于2005-01/06在深圳市人民医院完成。选取骨关节炎患者滑膜,经原代培养获得滑膜成纤维细胞,采用正常志愿者原代培养皮肤成纤维细胞作为对照。采用限制性酶切片段差异展示技术分离骨关节炎患者滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞差异表达的基因,使用blast比对将所得序列与Genbank中所有序列进行比对分析。主要观察指标:关节炎患者滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞基因表达的差异。结果:骨关节炎患者滑膜成纤维细胞与正常志愿者皮肤成纤维细胞相比,超氧化物歧化酶、TFPI2、CXCL2、CXCL6、转化生长因子基因表达水平较高。结论:超氧化物歧化酶、TFPI2、CXCL2、CXCL6、转化生长因子基因在骨关节炎滑膜成纤维细胞表达水平高于皮肤成纤维细胞中相应基因表达水平,表明这些基因在骨关节炎疾病的发生过程中可能起到一定作用。

骨关节炎滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞差异性基因表达

目的比较骨关节炎滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞基因表达的差异,以进一步研究滑膜成纤维细胞在骨关节炎中的作用。方法选取骨关节炎患者滑膜,经原代培养获得滑膜成纤维细胞,采用正常志愿者原代培养皮肤成纤维细胞作为对照。使用限制性酶切片段差异展示技术分离滑膜成纤维细胞与皮肤成纤维细胞差异表达之基因。结果骨关节炎患者滑膜成纤维细胞与正常志愿者皮肤成纤维细胞相比,SOD、TFPI2、CXCL2、CXCL6、TGF-β基因表达水平较高。结论SOD、TFPI2、CXCL2、CXCL6、TGF-β基因在骨关节炎滑膜成纤维细胞表达水平高于皮肤成纤维细胞中相应基因的表达水平,表明这些基因在骨关节炎疾病的发生过程中可能起到一定的作用,为进一步研究骨关节炎以及治疗骨关节炎提供了新的对象。

一种强干扰背景下间歇采样转发干扰抑制算法

间歇采样转发干扰对雷达信号间歇性“欠采样”,以牺牲部分匹配特性为代价,可减小干扰机转发迟延,快速实现干扰效果。针对强干扰背景下的间歇采样转发干扰,分析了真实回波和干扰信号之间的切片差异,设计线性正则联合字典,将切片化回波细分为干扰能量点和真实回波能量点;然后基于中位数绝对偏差识别剔除干扰能量点,完成干扰信号的初步抑制,在此基础上,通过线性正则正交字典构造变换基,利用压缩感知算法重构真实回波。仿真结果验证了所提算法的可行性和有效性。

船岸一体轻量化数据传输技术研究与实现

介绍了一种在船岸之间进行轻量化数据传输的技术,该技术采用数据差异切片,大部分的数据在差异切片中的数值为0,对数据差异切片进行压缩可以极大提高压缩比率,减少数据传输量,降低数据传输的费用。此外,使用了密码技术,保障了数据的安全性。