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题名吴茱萸次碱对棕榈酸诱导的脂质损伤肝细胞的影响
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作者
沈萍
李雯
赵燕
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机构
南昌市第九医院
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出处
《临床医药实践》
2021年第3期195-199,共5页
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基金
江西省卫生计生委2018年度科技计划项目(项目编号:20184026)。
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文摘
目的:研究吴茱萸次碱(Rut)对棕榈酸(PA)诱导的脂质损伤肝细胞(LO2)的细胞活力、活性氧(ROS)以及缝隙连接蛋白32(Cx32)和缝隙连接蛋白26(Cx26)表达水平的影响。方法:加入不同浓度的Rut溶液预处理LO2细胞20 min后,每个孔加入PA(0.2 mmol/L)溶液,共同孵育24 h,分别应用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧的表达、划痕负载实验检测缝隙连接细胞间通讯(GJIC)的功能变化及免疫印迹实验(Western blotting)检测缝隙连接蛋白Cx32和Cx26的表达水平。结果:CCK-8实验结果显示,Rut(0.1μmol/L,0.5μmol/L,1μmol/L)能抑制PA诱导的LO2细胞活力的下降;DCFH-DA荧光探针实验显示PA诱导细胞后ROS的表达增强,Rut预处理细胞后能够减少ROS的表达;划痕负载实验结果显示,PA诱导细胞后能够抑制细胞的GJIC功能,预先给予Rut处理能够改善GJIC的功能障碍;Western blotting显示PA诱导细胞后缝隙连接蛋白Cx32和Cx26的表达水平显著降低,给予Rut预处理后能够恢复Cx32和Cx26的表达。结论:PA能够诱导LO2细胞的脂质损伤,导致细胞活性降低、细胞内活性氧增加以及GJIC的功能障碍;Rut预处理LO2细胞后可减轻PA诱导的细胞损伤,并且恢复细胞的缝隙连接蛋白Cx32和Cx26的表达和GJIC的功能。
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关键词
吴茱萸次碱
棕榈酸
细胞增殖及毒性检测
划痕负载实验检测缝隙连接细胞间通讯
缝隙连接蛋白32
缝隙连接蛋白26
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Keywords
rutaecarpine
palmitic acid
cell proliferation and toxicity detection
gap junction intercellular communication
connexin 32
connexin 26
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分类号
R285.5
[医药卫生—中药学]
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