盐胁迫对于聚球藻PCC 7942大片段DNA删除突变株的生理效应

在对聚球藻PCC 7942开展基因组简化的过程中,发现一些非必需大片段的删除可导致耐盐胁迫能力降低。突变株ΔSynpcc7942_0233-0253和ΔSynpcc7942_2169-2187,其基因组中分别删除了18和14 kb的区域,在BG11培养液中的生长与野生型没有显著差异,但在含有0.4 mol/L NaCl的培养液中的生长相对于野生型被严重抑制。进一步分析发现,在盐胁迫下2个突变株的光合放氧速率比野生型显著下降,光系统Ⅰ和Ⅱ电子传递速率均低于野生型,呼吸耗氧速率与野生型相比却维持在较高水平。这些结果说明,蓝藻基因组中有些非必需基因实际上对于适应胁迫条件是需要的。

效应分子在致病性大肠杆菌感染细胞线粒功能障碍中的作用

目的:探讨致病性大肠杆菌(EPEC)效应分子在Hela细胞线粒体功能障碍中的作用.方法:用EPEC效应分子删除株、质粒互补株或染色质互补株感染Hela细胞,用线粒体膜电位(MMP)检测试剂盒(JC-1)染色细胞线粒体,通过多功能酶标仪检测MMP,蛋白印迹法检测效应分子的转位,免疫荧光法检测效应分子的定位,以此判断效应分子在EPEC致MMP下降中的作用.结果:与野生型组相比较,Δmap,ΔespF,Δeae,Δtir感染组单删除株降低细胞MMP功能显著减弱(P<0.05),但ΔespZ感染组删除株的功能却增强(P<0.05).与Δmap,ΔespF感染组单删除株相比较,ΔmapespF感染组双删除株功能进一步减弱(P<0.05).Δmap,ΔespF,Δeae感染组删除株的功能可被质粒表达相应蛋白所互补,EspFL16E定位于细胞质,也能互补ΔespF的功能.Δtir不能被质粒表达转位受体(Tir)互补,可以被染色质表达野生型Tir或突变TirY474S互补,但不能被突变TirS434A互补.结论:除Map,EspF外,EspZ,外膜蛋白intimin和其受体Tir也是参与细胞MMP下降的重要效应分子,TirS434在Tir引起MMP下降中起重要作用.