利什曼原虫实时荧光定量PCR方法的建立

以利什曼原虫的小环状动基体DNA(Leishmaniak DNA)为靶基因,建立实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法。根据GenBank报道的利什曼原虫小环状动基体DNA保守序列设计合成特异性引物,经PCR扩增后与pMD18-T载体连接,转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑选阳性克隆重组质粒经鉴定正确后,作为模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线。结果构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.996,而且特异性强,重复性好。本研究成功建立了实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法,该方法可用于利氏曼原虫病的诊断、流行病学监测和科学研究。

利什曼病继发噬血细胞综合征1例报道

利什曼病是利什曼原虫引起的感染,不同种的利什曼原虫引起不同的临床综合征。噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)是一种多种因素介导的、免疫相关的全身炎性反应综合征。本文报道江苏无锡地区医院接诊的1例外院拟诊“不明原因发热、结缔组织病”而治疗无效的男性患者,经临床表现分析、西部山区务工史问询,予以病原学及基因检查,最终确诊为利什曼病继发HPS患者。采用葡萄糖酸锑钠治疗利什曼病,根据HPS治疗1994方案(HLH-94),患者病情好转后出院。利什曼病继发HPS时,病情发展快,临床上不常见,容易漏诊。本次报道1例东部平原地区接诊的患者,值得临床工作者注意。

实时定量PCR技术在寄生虫学中的应用

寄生虫计数所用的标准方法一般耗时、困难 ,准确率低。近来在寄生虫学特别是疟原虫、弓形虫、利氏曼原虫及新孢子虫等检测时使用了实时定量PCR反应 ,此技术定量准确、快速、扩增后不需要进行数据后处理。此外 ,在估算基因组容量和基因表达水平的研究方面也能应用这种方法。本文讨论目前常用的此类检测系统的优势及其局限性。

黑热病一例报告

黑热病是由杜氏利氏曼原虫引起,以白蛉为媒介传播的地方性传染病。临床特征为长期不规则发热,消瘦,进行性肝脾肿大和全血细胞减少。解放后该病在绝大多数地区已基本消灭,但在西北少数地区仍有散发。现将我科1988年收治的一例报道如下。患者,男性,33岁,蒙古族。住新疆巴音郭楞蒙古自治州和静县巴音布鲁克区三户红旗牧场。自1987年10月份开始不规则发烧,