利福喷丁聚乳酸缓释微球对兔脊柱结核局部治疗作用的药效评价

目的探讨不同剂量利福喷丁聚乳酸缓释微球对兔脊柱结核局部治疗的效果。方法选取75只造模成功、感染程度近似的新西兰大白兔,随机分为A、B、C、D、E组,每组15只,行病灶清除术后在每组病灶清除部位放入不同剂量(A组3 mg、B组6 mg、C组12 mg、D组空白微球、E组15 mg)含有利福喷丁聚乳酸缓释微球的异体冻干松质骨,充分填塞缺损处。在术后不同时间段行大体肉眼观察、影像学、组织病理学、细菌学等检查。结果75只新西兰大白兔中6只术后发生下肢截瘫,75只均完成实验。X线检查示术后15、30 d各组均无明显的腰4、5椎体破坏及椎间隙改变。术后60 d时A组4只(30.7%)、B组4只(30.7%)、C组2只(14.2%)、D组5只(35.7%)腰5椎体上部有骨质破坏及腰4、5椎间隙改变。E组15只至术后8 w无明显影像学改变。病理及组织学检查示:A、B、C、D组中感染复发的新西兰大白兔椎体、椎旁软组织切片苏木素-伊红(HE)染色示有脓细胞、类上皮样细胞或坏死灶等形成,脓液培养显示有结核分枝杆菌生长。E组新西兰大白兔椎体及软组织HE染色可见较多成纤维细胞和淋巴细胞,椎旁软组织培养无结核杆菌生长。A、B、C、D组与E组新西兰大白兔X线检查与组织学检查感染复发差异有统计学意义(P<0.05)。结论 15 mg利福喷丁聚乳酸缓释微球为兔脊柱结核短期体内局部预防复发的最低有效治疗剂量。

利福喷丁聚乳酸缓释微球对兔脂肪干细胞生长及增殖的影响

目的探讨不同浓度的利福喷丁聚乳酸缓释微球对兔脂肪干细胞生长及增殖的影响。方法取健康新西兰大白兔双侧腹股沟脂肪组织,经过消化、洗涤处理,接种于培养瓶中培养。隔日换液,观察细胞贴壁、生长、增殖情况以及细胞形态,每日计数并绘制生长曲线。用优化复乳法制得利福喷丁聚乳酸缓释微球,取第3代兔脂肪干细胞,分为5组,分别加入含有不同浓度的利福喷丁聚乳酸缓释微球的培养液进行培养（浓度梯度：97.6、121.9、146.3、170.7、195.1μg/m L）,采用CCK-8比色方法隔日检测细胞的增殖活性。结果兔脂肪干细胞在最初3~4 d生长较慢,之后进入快速增殖期,第8天到达峰值,呈漩涡状排列。经过成骨诱导15 d后,茜红素染色可见类圆形红染、均质、不透明的矿化结节。含利福喷丁药物浓度分别为40、50、60、70、80μg/m L的利福喷丁聚乳酸缓释微球溶液对兔脂肪干细胞生长、增殖的影响较小,各浓度间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论利福喷丁聚乳酸缓释微球对兔脂肪干细胞生长、增殖的影响较小。

聚乳酸利福喷丁微球的制备及其小鼠体内肺靶向性研究

目的制备聚乳酸利福喷丁微球,评价其体外释药特性及其在小鼠体内的肺靶向性。方法采用溶剂挥发法制备聚乳酸利福喷丁微球,动态透析法考察其体外释药性能。实验动物静脉注射后,测定其各组织的药物浓度,研究其体内相对分布百分率及其肺靶向性。结果制得的聚乳酸利福喷丁微球在7-30μm粒轻范围的占聚乳酸利福喷丁微球总数的81.6%,平均粒径为（14.2±3.1）μm,包封率为78.39%,载药量为（39.6±3.6）%（n=5）,体外释药T50为68 min,较对照组延长了4.5倍。小鼠实验表明,制得聚乳酸利福喷丁微球后,药物在肺组织中的相对分布百分率明显高于其他组织与血液,并较对照组提高了3.3倍。结论该法制得的聚乳酸利福喷丁微球具有明显的缓释性及肺靶向性。

聚乳酸-羟基乙酸载利福喷丁微球的体外释放机制研究

目的:探讨聚乳酸-羟基乙酸载利福喷丁微球体外释放机制。方法:采用乳化-溶剂挥发法制备不同载药量的聚乳酸-羟基乙酸载利福喷丁微球,于PBS缓冲溶液(0.2 mol/L,pH7.4)中测定微球体外释放量,对释放曲线进行零级方程拟合、一级方程拟合和Higuchi方程拟合。结果:聚乳酸-羟基乙酸载利福喷丁微球的载药量分别为(8.04±0.29)%、(17.16±0.40)%和(23.93±0.48)%,差异有统计学意义(F=1 195.325,P=0.000)。微球呈球形,分散性良好,药物均匀地分布于载体基质中。载药微球在前2 d释放药物较快,累计释放药物量分别为(9.07±0.11)%、(13.33±0.04)%和(15.5±0.09)%,差异有统计学意义(F=4 414.474,P=0.000)。从第3天开始,释放药物速率减缓,总累计释放量分别为(72.10±0.26)%、(80.22±0.56)%和(78.60±0.63)%,差异有统计学意义(F=212.916,P=0.000)。在3种拟合方程中,均以Higuchi方程的相关系数更接近于1。结论:聚乳酸-羟基乙酸载利福喷丁微球体外释放呈突释和缓释两相释放,释放曲线更符合Higuchi方程释放规律。

利福平/聚乳酸-聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性

背景:虽然国内外有很多制备利福平/聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(poly lactic acid-glycolic acid copolymer,PLGA)微球的报道,但这些微球粒径多在10μm左右,不适合与磷酸钙骨水泥复合制备成具有良好降解性的抗结核修复材料。目的:制备大粒径利福平/PLGA缓释微球,观察其理化特性和体外缓释特性。方法:以PLGA为载体,将利福平分散于PLGA的有机溶剂中,采用复乳溶剂挥发法制备利福平/PLGA缓释微球。光镜和扫描电镜下观察微球的形态特征,测定微球平均直径和跨距,高效液相色谱法测定载药量和包封率,以溶出法和高效液相色谱法观察其体外释药特性,并拟合药物体外释放曲线建立曲线方程。结果与结论:利福平/PLGA微球电镜观察呈圆球形,分散性好,粘连少,粒径分布集中,平均粒径(80.0±9.4)μm。载药量、包封率分别为(33.18±1.36)%,(54.79±1.13)%。体外缓释试验显示突释期内微球释放度为(14.66±0.18)%,前3d累计释放度(18.09±0.45)%,到42d体外累积释放度达到(92.17±1.23)%。提示利福平/PLGA微球具有良好的缓释效果,是一种较为理想的抗结核药物的载体材料和释放系统;PLGA是良好的药物缓释载体,可以用来制备载药缓释微球。

聚乙二醇对利福平-聚乳酸-羟基乙酸聚合物缓释微球性能的影响

背景:聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球具有良好的生物相容性,是优良的药物缓释载体,但缓释微球的突释问题严重影响了其临床应用。目的:观察聚乙二醇对利福平-聚乳酸-羟基乙酸聚合物缓释微球特征、载药率、包封率、体外释放规律及突释的影响。方法:以高分子材料聚乳酸-羟基乙酸共聚物作为载体,采用复乳化-溶剂挥发法制备聚乙二醇-利福平-聚乳酸-羟基乙酸聚合物微球(实验组)和利福平-聚乳酸-羟基乙酸聚合物微球(对照组)。扫描电子显微镜观察两组聚合物缓释微球特征,高效液相色谱法检测两组微球在不同时段模拟体液中的利福平药物浓度及累计释放量,计算两组微球的载药量、包封率。结果与结论:与对照组比较,实验组微球表面光滑、粒径减小、分散良好,包封率和载药量明显提高。实验组微球3 h内药物释放量最大,1 d左右药物释放趋于平稳稳定状态,1 d药物累计释放量小于20%;对照组微球3 h内药物释放量最大,约为实验组的1.5倍,1 d左右药物释放也趋于平稳状态。表明聚乙二醇可改善利福平-聚乳酸-羟基乙酸聚合物缓释微球的成球率,减小其粒径,增加其载药量和包封率,控制其突释现象。

复合三联抗结核药聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的制备及体外释药特性

目的 :制备复合异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)的聚乳酸-羟基乙酸(HRZ/PLGA)缓释微球,观察其理化性质和体外缓释特性。方法:以PLGA(450mg)为载体,避光条件下称取H(40mg)、R(60mg)、Z(125mg),采用复乳-溶剂挥发法制备HRZ/PLGA缓释微球,应用扫描电镜观察微球的形态特征;应用高效液相色谱法(HPLC)测定其载药量、包封率;采用溶出法、HPLC于3h、6h、12h、1d、2d、3d、6d、9d、12d、15d、20d、25d、30d、40d、50d测定H、R、Z三种药物的浓度,观察其是否均大于10倍最低抑菌浓度(MIC),计算其日均释药率、累计释药率。结果:HRZ/PLGA微球在电镜下观察呈圆球形,平均粒径为10.3±4.7μm;H、R、Z三种药物的载药量分别为(18.02±0.36)%、(22.46±0.24)%、(21.68±0.37)%,包封率分别为(54.79±1.13)%、(72.35±0.39)%、(67.21±0.68)%;体外缓释试验显示微球缓释前12d左右,三种药物的累计缓释度均超过了50%,日均释药率分别为5.05%、4.89%、6.86%;第12天后三药的缓释基本趋于稳定,日均释药率分别为0.17%、0.26%、0.16%;三种药物缓释到50d时均大于10倍MIC。结论:HRZ/PLGA微球具有优良的载药及药物缓释效果,是一种理想的复合抗结核药物缓释系统。

利福平/乳酸-乙醇酸共聚物缓释微球制备与体外释药性能研究

目的制备利福平/聚乳酸-羟基乙酸缓释微球,观察聚合物缓释微球的理化性质,探索利福平(rifampicin,RFP)体外释放规律。方法以高分子材料乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)作为载体,采用复乳-溶剂挥发法(W-O-W)制备RFP/PLGA缓释微球;光学显微镜及扫描电子显微镜观察RFP/PLGA微球特征;高效液相色谱法(HPLC)检测并计算RFP/PLGA微球的载药量、包封率;HPLC检测RFP/PLGA缓释微球在磷酸盐缓冲液(PBS)中不同时段释放量及其累计释放度,拟合缓释曲线。结果 RFP/PLGA微球缓释微球呈圆形或椭圆形,表面有微孔且凹凸不平,微球间无粘连;微球平均粒径为(7.19±0.4)μm;载药量为(11.54±0.15)%,包封率为(72.35±0.46)%;突释期内累计释放度达42%,到12d时累计释放度达62%。结论 RFP/PLGA微球具有一定的缓释效果,是一种适宜的抗结核药物运载系统。

聚己内酯载药微球的制备及释药性能研究

首次以利福喷丁为模型药物、聚己内酯为载体材料,制备了用于长效抑制骨结核生长的利福喷丁聚己内酯缓释微球,观察其理化特性和体外释放性能。采用O/W乳化溶剂挥发法制备载利福喷丁聚己内酯微球,系统考察了投药量、聚乙烯醇的浓度、乳化速度对微球形貌、粒径、载药量和包封率的影响。通过对制备工艺的优化,得到最佳制备条件是乳化速度300r·min-1,投药量20mg,聚乙烯醇的浓度2%。所制备的载利福喷丁聚己内酯微球圆整,表面有微孔,大小分布均匀,粒径分布较窄,平均粒径为(27.249±0.256)μm、载药量(3.098±0.011)%、包封率(34.078±0.123)%。实验结果表明:聚己内酯是负载利福喷丁的一种理想控释材料。

新型利福喷丁-对氨甲基苯甲酸／海藻酸钙微球的制备与体外性能评价

目的制备利福喷丁-对氨甲基苯甲酸/海藻酸钙微球,并对其进行性能表征和评价。方法使用高压静电液滴发生装置制备微球,测定其粒径、溶胀率、载药量、包封率以及药物累计释放率。结果利福喷丁-对氨甲基苯甲酸/海藻酸钙微球平均粒径163.12μm,载药量为51.5%,包封率为89.3%,在生理盐水中70 h后溶胀率为19,120 h后药物累积释放率达75%。结论对氨甲基苯甲酸的引入减缓了海藻酸钙微球在生理盐水中的溶蚀,药物释放平稳,无明显突释现象。

体外构建新型骨组织工程三维复合体

体外实现兔脂肪干细胞(r ADSCs)、利福喷丁聚乳酸缓释微球及羟基磷灰石/β-磷酸三钙(HA/β-TCP)的三维复合,构建既能抗结核又能填补、促进骨缺损的新型骨组织工程复合体。以HA/β-TCP为支架材料,通过缓慢滴加细胞型方式,将复乳-溶媒挥发法制备的利福喷丁聚乳和定性分化诱导的r ADSCs(茜红染色表征)体外制得新型骨组织工程三维复合体,并对其进行显微结构及药物缓释表征。结果表明,载药利福喷丁聚乳酸缓释微球大部分分布在18~28μm,载药利福喷丁聚乳酸缓释微球在一定浓度下不影响r ADSCs的分化诱导,层状膜形分布的成骨诱导后r ADSCs牢固包绕利福喷丁聚乳酸缓释微球,分布在HA/β-TCP上,载药支架材料有着良好的药物缓释,体外维持最低抑菌浓度长达46 d。新型骨组织工程的三维骨组织工程复合体具有缓慢、持续的释药特性,且具有具有成骨活性。