转木霉菌激发子基因的链霉工程菌株构建及检测

里氏木霉菌Trichoderma reesei QM 6a蛋白激发子基因xyn2及绿木霉菌蛋白激发子基因sm1通过调节植物乙烯、茉莉酸等信号途径激发其诱导抗性,提高其免疫力。本研究根据天蓝色链霉菌偏爱密码子人工合成了这两个基因,将其单价连接到链霉菌表达载体pIB139中。通过酶切鉴定的阳性质粒pIB139-xyn2(sm1)转化入ET12567(pUZ8002)中间菌株,利用接合转移技术定点整合到利迪链霉菌A01基因组中,采用PCR技术鉴定工程菌株A01-xyn2(sm1)。随后构建A01-xyn2+sm1双价链霉菌工程菌株并验证。实验结果表明:利用接合转移技术已成功获得含xyn2,sm1,xyn2+sm1的链霉菌工程菌株,将实现抗生与诱抗的协同作用,提高防治植物病害的效果。

转燕麦噬酸菌蛋白激发子基因flagellin的链霉工程菌株构建及鉴定

利迪链霉菌A01可以产生大量的抗生素——纳他霉素,其通过结合病原真菌细胞膜上的甾醇分子而起到抑制病原菌生长的作用。燕麦噬酸菌的鞭毛蛋白组分FLAGELLIN可以诱导植物抗性,激发活性氧及水杨酸防御反应途径。本研究将燕麦噬酸菌蛋白激发子基因flagellin克隆,接合转移入利迪链霉菌A01中,使工程菌增加诱导植物抗性的功能。PCR验证表明:成功获得了含flagellin基因的阳性工程菌株,证明通过链霉工程菌构建可实现抗生与诱抗的协同作用,预计会提高防治植物病害的效果。