聚酰胺色谱法联合中压液相制备色谱法提取分离镰形棘豆中活性黄酮类成分

目的:对藏药镰形棘豆中黄酮类成分进行提取分离,并将得到的黄酮化合物进行抗人肺腺癌A549细胞的活性筛选。方法:镰形棘豆药材浸提液经乙酸乙酯萃取,该萃取部位通过聚酰胺柱色谱梯度洗脱,结合中压液相制备色谱法进一步纯化分离,获得单一黄酮化合物,通过高效液相色谱法(HPLC)、质谱法(MS)及核磁共振波谱法(NMR)对化合物进行分析、鉴定;采用CCK-8法,检测黄酮化合物对人肺腺癌A549细胞的抑制作用。结果:从镰形棘豆的乙酸乙酯部位分离得到2个黄酮类单体,鉴定为7-羟基二氢黄酮及2',4'-二羟基二氢查尔酮,HPLC分析两者纯度均大于98%; CCK-8法结果显示,7-羟基二氢黄酮及2',4'-二羟基二氢查尔酮均能显著抑制A549细胞活力,并呈量效关系,48 h的IC50值分别为137. 6μg/m L和63. 83μg/m L。结论:分离得到的2个黄酮成分对A549细胞均有良好的抑制作用,为后期抗肺癌机制研究提供了实验基础。聚酰胺柱色谱法具有富集黄酮的作用,适用于分离黄酮类成分,聚酰胺色谱法联合中压制备液相色谱法,提取分离镰形棘豆中黄酮类成分,简便易行,为分离黄酮类成分提供参考。

制备液相色谱法在辅酶Q10分离纯化中的应用研究

目的 :旨在探究制备液相色谱法在辅酶Q10(Coenzyme Q10,简称CoQ10)的分离纯化过程中的应用,以提高其纯度和产率,为辅酶Q10的工业化生产提供新的思路和技术支持。方法 :我们采用了一种新颖的技术方法,旨在除去5-脱甲氧基辅酶Q10杂质,从而改善CoQ10的质量。首先,我们准备了辅酶Q10的混合样品,包括目标产物和杂质。接下来,我们运用液相色谱法,利用某特定参数,如流速、柱温和检测波长,以分离目标产物和杂质。该方法的关键在于对色谱条件的优化,以确保高效、精确地分离出CoQ10。结果 :实验结果表明,采用液相色谱法成功实现了对辅酶Q10的分离纯化。通过优化色谱条件,我们有效地去除了5-脱甲氧基辅酶Q10杂质,提高了CoQ10的纯度。同时,该方法也显著提高了CoQ10的产率,使其更具商业化价值。结论 :本研究验证了制备液相色谱法在辅酶Q10生产中的可行性和效果。该方法为提高CoQ10的质量和产量提供了可行途径,并为其工业化生产提供了新的思路。因此,液相色谱法可成为辅酶Q10分离纯化过程中的有力工具,有望推动辅酶Q10的广泛应用和市场推广。

反相高效制备液相色谱法制备洋川芎内酯H和I

从川芎中分离制备洋川芎内酯H和洋川芎内酯I对照品.用8倍量80%乙醇回流提取川芎药材,得到川芎浸膏经D-101大孔吸附树脂、硅胶柱色谱及反相高效制备液相色谱分离,获得两个化合物单体.经核磁共振波谱分析,确定其分别为洋川芎内酯H和洋川芎内酯I,两者纯度均高于98%,可作为对照品进行定量分析.该方法操作简单,重现性好,上样量大,能够同时获得大量的高纯度的目标成分,为洋川芎内酯H和洋川芎内酯I单体的制备研究提供了一种新的方法.

反相高效液相色谱法制备纯化大豆异黄酮糖苷

利用制备高效液相色谱法从大豆总异黄酮提取物中制备出了3种大豆异黄酮糖苷。在N ova-Pak HR C18色谱柱(100mm×25mm i.d.,6μm)上,以甲醇-体积分数为0.1%的乙酸水溶液(体积比为23∶77)为流动相,流速为20m L/m in,采用等度洗脱方式,制备了3种大豆异黄酮糖苷,经质谱分析,确认它们分别为大豆苷、黄豆苷和染料木苷。高效液相色谱分析表明,所制备的3种化合物的纯度均达到了99%以上。

高效制备液相色谱法从荷叶中分离制备黄酮类化合物

采用高效制备液相色谱法从荷叶(N elum bo nucifera G aertn)中分离制备荷叶黄酮类化合物。用60%乙醇回流提取荷叶,粗提液浓缩后经D-101柱及聚酰胺柱色谱分离,再在Symm etry P repTMC18柱上分离,以水-乙腈为流动相进行梯度洗脱(流速为5.0m L/m in),得到了3种黄酮类化合物。经紫外光谱、红外光谱、核磁共振及质谱分析,确定该3种物质分别为金丝桃苷、异槲皮苷和紫云英苷。所制备的3种化合物的纯度都在97%以上,其中紫云英苷为首次从荷叶中分离得到。

制备高效液相色谱法分离纯化大黄酚和大黄素甲醚

目的建立制备高效液相色谱分离纯化大黄酚和大黄素甲醚的方法。方法用稀硫酸将脱脂后的大黄中总蒽醌苷水解成苷元,再用热三氯甲烷提取苷元,依次用一定浓度的不同碱溶液将三氯甲烷提取液中的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等杂质除去,氢氧化钠沉淀三氯甲烷溶液中的大黄酚和大黄素甲醚,盐酸调pH值,析出沉淀,沉淀物经真空干燥,得大黄酚和大黄素甲醚混合物粗品,所得粗品甲醇溶解,用制备高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(21.2mm×250mm,7μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),体积流量为20mL/min,检测波长为254 nm,柱温为28℃,进样量为8 mL,基于峰,分别收集大黄酚和大黄素甲醚馏分,馏分经真空冷冻干燥得大黄酚和大黄素甲醚单体。结果大黄酚和大黄素甲醚纯度用面积归一化法和外标法定量,大黄酚纯度达到98.8%,大黄素甲醚纯度98.7%。1H-NMR鉴定结构,与文献数据一致。结论制备高效液相色谱法制备高纯度大黄酚和大黄素甲醚,操作简单,适于实验室大规模制备。

反相高效液相色谱法制备松果菊苷标准品

利用反相制备高效液相色谱结合溶剂萃取、大孔吸附树脂柱色谱和葡聚糖凝胶LH 2 0柱色谱方法 ,从管花肉苁蓉的乙醇提取物中纯化制备了苯乙醇苷类化合物松果菊苷的标准品 ,纯度达到 98%以上。方法操作简便 ,重现性好 。

制备型高效液相色谱法制备纯化3种辣椒素单体

利用制备型反相高效液相色谱法从辣椒素类物质中制备了3种辣椒素单体。在PRC-ODS色谱柱(250mm×21.5mm,13μm)上,以甲醇-水(体积比为70∶30)为流动相,流速为15mL/min,采用等度洗脱方式,从80%的辣椒素类物质中制备了3种辣椒素单体。经核磁共振氢谱(1H NMR)及电子轰击离子源质谱(EI-MS)分析,确认它们分别为降二氢辣椒素、辣椒素和二氢辣椒素,收率分别为60.1%,58.9%和72.3%。高效液相色谱分析表明所制备的3种化合物的纯度分别达到了98.12%,99.93%及100.7%。

半制备高效液相色谱法同时分离制备肉桂中5种苯丙素类化合物及其免疫抑制活性考察

目的:建立一种从肉桂中同时分离5种苯丙素类化合物的制备分析方法,并对化合物的免疫抑制活性进行了评价。方法:肉桂经乙醇提取后,取乙酸乙酯部位经高效液相色谱仪分离制备化合物,制备色谱条件:采用Ultimate XB-C18(250 mm×10 mm,5μm)半制备柱,流动相为乙腈-水,进行梯度洗脱,检测波长为330 nm,柱温为30℃,流速为2.5 ml·min-1,进样量为0.3 ml。采用MS及NMR对化合物进行结构鉴定。采用CCK-8法对分离出的化合物进行免疫抑制活性考察。结果:同时分离得到5种苯丙素类化合物,分别为赤式-愈创木甘油、(7R,8S)-syringoylglycerol、(7S,8S)-syringoylglycerol、3-甲氧基苯基-丙烯醛、邻甲氧基肉桂醛。CCK-8法证明化合物3在浓度800μmol·L-1时对T细胞及B细胞的抑制率均大于20%,有一定免疫抑制作用。结论:苯丙素分离方法简便,分离效果好,能同时制备肉桂中5种苯丙素类化合物,其中化合物3有一定的免疫抑制活性。

反相高效液相色谱法制备延胡索乙素

目的:利用反相高效液相色谱制备延胡索乙素。方法:结合溶剂萃取法,从延胡索的乙醇提取物中纯化制备延胡索乙素。结果:纯度不低于99%。方法具有进样量大,一次制备量多的优点,一次可进样800μL,几次进样就可制备mg级样品。结论:方法操作简便,重现性好,可用于实验中延胡索乙素的制备。

制备型高效液相色谱法从积雪草提取物中分离纯化积雪草甙和羟基积雪草甙对照品

积雪草甙和羟基积雪草甙是积雪草及其相关制品质量控制的两个指标成分,本研究利用制备型高效液相色谱从积雪草提取物中同时分离纯化得到这两个成分。对制备色谱的流动相组成、流速、进样量和检测波长等制备参数进行了优化。采用的色谱柱为C18柱(50mm×200mm,5μm);流动相为甲醇-水(体积比为60∶40),流速100mL/min;二极管阵列检测器在220nm检测;进样体积为1.5mL。在20min的运行时间内,积雪草甙和羟基积雪草甙与干扰成分得到很好的分离,产品纯度达到98%以上。此方法具有快速高效、产品纯度高的特点,可以用于制备积雪草甙和羟基积雪草甙对照品。

半制备高效液相色谱-离子色谱法检测婴幼儿配方食品中低聚半乳糖的含量

目的优化并建立半制备高效液相色谱法-离子色谱法测定婴幼儿配方食品中低聚半乳糖含量的方法。方法以乳粉、特殊医学配方奶粉和液态奶为实验对象,利用半制备高效液相色谱法分别收集婴幼儿配方食品中的二糖和三糖及聚合度(degree of polymerization,DP)3以上的糖,再利用β-半乳糖苷酶水解收集聚合度3及3以上的糖组分,利用离子色谱法测定酶解后的半乳糖和葡萄糖的含量,通过计算得到样品中低聚半乳糖的含量。结果异乳糖、葡萄糖、半乳糖、1,6-β-D-半乳二糖和1,3(4)-β-D-半乳二糖在1.0~30.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9985~0.9999,回收率为82.80%~87.67%,相对标准偏差≤5%。结论该方法结果准确,能够满足检测要求,且前处理操作简单,便于大批量样品的检测。

制备型高效液相色谱法制备和厚朴酚与厚朴酚

目的:厚朴中酚类化合物进行分离制备与定性。方法:厚朴提取物经硅胶柱层析得到淡黄色油状单体化合物,以及和厚朴酚与厚朴酚混合物,将混合物再进行HPLC制备色谱分离,以甲醇-水-冰醋酸(80∶20∶0.10,V/V/V)为流动相,收集相应馏分浓缩至干。结果:该法所得产品用面积归一化法与外标法定量,纯度大于98%,核磁共振确定结构,与文献数据基本一致。结论:本法简便快捷。

用加速溶剂萃取及制备型高效液相色谱法从烟梗中制取多酚对照品

提出用加速溶剂萃取及制备型高效液相色谱方法从烟梗中提取、制备多酚对照品的方法。样品粉碎后以乙醇(80+20)溶液为萃取溶剂经加速溶剂萃取仪在110℃静态萃取10min,提取液氮气吹扫60s后过MCI树脂和Sephadex LH 20凝胶净化,流出液用丙酮定容后,先通过制备型高效液相色谱初步分离,再通过半制备高效液相色谱进一步分离,得到5个多酚类化合物,经核磁共振波谱法鉴定分别为芸香苷、绿原酸、槲皮素、柚皮素和咖啡酸甲酯。5个多酚类化合物的纯度均大于99%,故可用作多酚对照品。

超临界流体色谱法制备EPA-EE和DHA-EE

以二氧化碳作流动相 ,C18柱为固定相 ,用超临界流体色谱法制备二十碳五烯酸乙酯 (EPA EE)和二十二碳六烯酸乙酯 (DHA EE) .考察了流速、温度、压力、上载量以及进样浓度对制备分离的影响 .结果表明 ,在实验范围内 ,流速对分离效果影响不大 .对于 5 C18,2 5 0mm× 4 6mm色谱柱 ,其最适制备条件是柱前压12MPa ,温度 5 5℃ ,通常流速下的压降约为 1MPa ,鱼油的最大上载量大于 2 0 μl.而对于 8 C18,2 5 0mm× 10mm色谱柱 ,其相应的最适制备条件是柱前压 11MPa ,温度 5 5℃ ,通常流速下的压降约为 0 5MPa,鱼油的最大上载量约为 10 0 μl.实验表明 ,鱼油无需溶解于其他溶剂而可直接进样 .

半制备高效液相色谱法分离制备香鳞毛蕨中间苯三酚类衍生物

目的:采用半制备液相色谱法从香鳞毛蕨中分离制备间苯三酚类衍生物的对照品。方法:用石油醚回流提取香鳞毛蕨,提取液浓缩后经硅胶柱色谱分离,再用半制备高效液相制备,以纯乙腈为流动相进行等度洗脱(3 ml·min-1),进样量为0.5 ml,得到2个间苯三酚类衍生物。结果:2个化合物结构分别为绵马素BB和绵马素PB,经超高效液相色谱法(UPLC)测定纯度,分别为绵马素BB(98.81%)、绵马素PB(98.57%)。结论:该方法制备的绵马素BB和绵马素PB纯度较高都在98%以上,简单,快速,可用于对照品的制备。

蒙药大栀子中化学成分的制备高效液相色谱法分离纯化

目的采用制备高效液相色谱法,从蒙药大栀子中分离纯化其主要化学成分环烯醚萜苷类和西红花苷类,建立其纯化工艺。方法大栀子醇提物采用柱色谱分离,然后采用制备色谱系统,收集对应峰的流出液,并对产品进行了纯度检测。经理化常数测定,结合现代波谱学技术确定其结构。结果经过分离鉴定,得到两大类化合物,即环烯醚萜苷类与西红花苷类,6个单体化合物:栀子苷、去乙酰车叶草苷酸甲酯、鸡矢藤次苷甲酯、京尼平-1-β-龙胆苷,西红花苷-1、西红花苷-2。除栀子苷外,其它5种化合物均为首次从大栀子中分离得到。结论利用制备色谱技术进行蒙药大栀子化学成分的分离和纯化,具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点。

超声提取-高压液相色谱法制备高纯度獐牙菜苦苷

目的:建立一种从青叶胆(Swertia mileensis)中快速、高效分离制备獐牙菜苦苷的方法。方法 :首先对青叶胆原料进行前处理,然后采用超声波提取法制备青叶胆提取物,再使用高压制备液相色谱法(HPPLC)对所得的青叶胆提取物进行分离纯化,将所得富含獐牙菜苦苷的流分冷冻干燥后,用高效液相色谱法(HPLC)进行纯度分析。结果:前处理方式为去根茎取花叶;最佳超声提取工艺:20倍量75%乙醇,超声提取3次,每次10 min;高压制备液相色谱纯化工艺:反相C18填料,压力10 MPa,以30%甲醇-水为流动相洗脱,所得獐牙菜苦苷纯度经HPLC法分析质量分数为98.17%(峰面积归一化法)。结论:该方法制备獐牙菜苦苷简便、快捷,所得产物的纯度高,适合青叶胆中獐牙菜苦苷的快速制备,同时工艺放大验证其也适用于工业生产。

制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用

本文介绍了制备型高效液相色谱法的研究概况,制备型高效液相色谱的特点,影响制备型高效液相色谱分离纯化的因素,及其在中药研究中的实际应用,并对制备型高效液相色谱的研究现状与发展方向做了总结。

半制备反相高效液相色谱法分离珍珠菜中木脂素类成分

对珍珠菜(Lysimachia clethroideDuby)中的木脂素类化学成分,采用Sephadex LH-20和半制备反相高效液相色谱法联用分离化合物,从中分离并鉴定了两个化合物,通过波谱技术鉴定其化合物的结构分别是:(+)-Isolar-ic iresinol-9′-β-D-glucopyranoside(1).Urolignoside(2).化合物1和2均为首次从该属植物中分离得到.