银离子络合法提取纯化大西洋鲑鱼中二十二碳六烯酸(DHA)用于特定位点碳同位素分析(PSIA-C)

尽管DHA(全顺式4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸)在许多人类生物过程中被证明具有重要作用,但关于这种全顺式长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)的来源和代谢仍然存在一定争议.作为利用核磁共振(NMR)测定分子内特定位点碳同位素分析(PSIA-C)进而解决人体DHA来源问题的第一步,本文报道了从大西洋鲑鱼(人类膳食DHA的主要来源之一)提取大量(>200 mg)高纯度(>95%)DHA的银离子络合法.采用有机溶剂提取鱼肉中的脂肪酸,用BF 3-CH 3OH进行甲基酯化,将甲基酯化脂肪酸混合物(脂肪酸甲酯,FAMEs)经硝酸银硅胶柱层析,按极性依次洗脱分离混合脂肪酸,获得高纯度的DHA.基于GC/MS和GC分析表明,采用银化硅胶柱层析法,AgNO 3和硅胶的重量比为1∶9,二氯甲烷和乙酸乙酯体积比3∶1洗脱,DHA纯度达到95%.