三倍体芍药品种染色体制片优化和核型分析

为优化三倍体芍药品种染色体制片方法,本研究以三倍体芍药品种‘Fairy Princess’新生长的白色根尖为材料,通过常规染色体制片法,获得预处理试剂和预处理时间对芍药染色体制片影响的结果,并进行核型分析。结果表明,三倍体芍药最佳预处理试剂为0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液,最佳预处理时间为12~36 h;‘Fairy Princess’核型公式为2n=3x=15=10m+2sm+3st。核型分类为2A型。研究结果为三倍体芍药应用提供染色体信息,为野外取材长时间保存提供依据。

黄花芥蓝染色体制片优化及核型分析

以黄花芥蓝典型品种＂福州黄花＂为材料,对影响染色体制片效果的取材时间点、预处理时间和解离时间等条件进行优化,并进行核型分析。结果表明：上午9：00取材,分裂相细胞和中期分裂相细胞最多;0.002mol/L 8-羟基喹啉预处理5h染色体收缩性最好,形态最佳,分散性好;1mol/L HCl 60℃解离8min细胞分散,染色体着色良好而细胞质透明,对比度高。黄花芥蓝的染色体数目为2n=2x=18,染色体相对长度变化范围为9.66%-14.29%,染色体长度比为1.48,其染色体类型包括长染色体（large chromosomes,L）、中长染色体（middle chromosomes 2,M2）和中短染色体（middle chromosomes 1,M1）,染色体相对长度组成为2L＋2M2＋14M1,着丝粒指数变化范围为27.86%-48.19%,臂比值变化范围为1.08-2.59,其中第1、4、6、9对染色体为近中部着丝粒染色体（submetacentric chromosomes,sm）,其余5对为中部着丝粒染色体（metacentric chromosomes,m）,第6对染色体具有随体（satellites,SAT）,核型不对称系数为61.95%,核型分类标准属2A型。同时,本研究还比较了黄花芥蓝与已报道的白花芥蓝的核型结果,发现两者在核型公式、染色体长度比和相对长度范围等方面存在明显差异。研究结果丰富了对芥蓝遗传组成的认知,为芥蓝分类地位与种内亲缘关系研究提供细胞学证据。

黄果龙葵和龙葵染色体制片优化及核型分析

该实验以黄果龙葵和龙葵的根尖为实验材料,进行不同的预处理、固定和解离,确定出各种材料适合于核型分析的制片方法。结果表明:龙葵于15℃条件下经0.05%秋水仙素预处理2.5h,固定后用1mol/L HCl酸解后,染色观察,得到的染色体分散,易于染色体计数和形态观察。用此方法对黄果龙葵和龙葵进行核型分析,结果发现:黄果龙葵和龙葵都属于小型染色体,黄果龙葵为四倍体,核型公式为K(4n)=48=4sm+44m,核型不对称系数为56.22%,属于2B核型。龙葵为六倍体,核型公式为K(6n)=72=72m,核型不对称系数为55.89%,属于1B核型。

叶用甜菜染色体制片条件优化及核型分析

以叶用甜菜绿梗品种为材料,对影响染色体制片效果的解离时间、预处理时间和取材时间等条件进行优化,并进行核型分析。结果表明,1 mol·L^(-1)HCl 60℃解离12 min,染色体着色良好而且细胞质透明,对比度高;0.002 mol·L^(-1)8-羟基喹啉预处理9 h染色体收缩性最好,形态最佳,分散性好;上午9:00取材,分裂相细胞和中期分裂相细胞最多。叶用甜菜的染色体数目为2n=2x=18,核型公式为2n=2x=18=16m+2sm(2SAT),染色体长度比为1.52,染色体相对长度组成为8M2+10M1,染色体相对长度变化范围为8.75%~13.29%,着丝粒指数变化范围为36.67%~47.04%,臂比值变化范围为1.13~1.73,其中,第2对染色体为近中部着丝粒染色体(sm),且具有随体,其余均为中部着丝粒染色体(m),核型不对称系数为58.50%,核型分类标准属1A型。同时,该研究还比较了叶用甜菜与已报道的糖用甜菜的核型结果,发现两者在核型公式、核型分类、随体和核型不对称系数等方面存在明显差异。研究结果从细胞遗传学角度揭示叶用甜菜的核型特征,为今后进行不同类型叶用甜菜的核型比较提供理论依据。

白鹤芋染色体制片技术优化及核型分析

以白鹤芋(Spathiphyllum floribundum)‘Mojo’品种的组培苗根尖为试验材料,采用常规压片法,比较不同取材时间、预处理方法对染色体制片的影响,并对其进行核型分析。结果表明,于08:45-09:15取材,用0.002 mol·L-18-羟基喹啉或0.07mmol·L-1放线菌酮预处理4h所得的染色体制片效果最佳。白鹤芋的染色体数目为2n=2x=30,为二倍体,‘Mojo’品种有B染色体,核型公式为2n=2x=30=20m+6m(SAT)+2sm+2sm(SAT)(B染色体),其中3号和8号为近中部着丝粒染色体(sm),其余的染色体都是中部着丝粒染色体(m)。3号、4号、6号和9号的染色体具随体。最长染色体与最短染色体比为1.73;核型属2A型,核型不对称系数为56.37%。

两种五加科园林植物染色体制片优化与核型分析

以五加科的掌叶梁王茶和八角金盘未展开幼叶叶尖为试材,采用常规压片法制片,研究了优化染色体制片条件和核型分析,以期为供试物种的育种工作开展提供依据。结果表明:掌叶梁王茶的最佳预处液为0.002 mol·L-18-羟基喹啉和0.04%放线菌酮混合液,八角金盘则为0.001 mol·L-18-羟基喹啉。2个物种其余的最佳制片方法相同,具体为09:00-09:30取样、V无水乙醇:V冰醋酸=3:1卡诺固定液处理12~24 h、V无水乙醇:V浓盐酸=1:1解离液处理13 min、改良苯酚品红染色液处理10 min。掌叶梁王茶染色体核型为2n=48=28m+18sm+2st,不对称系数61%,2B核型;八角金盘为2n=48=34m+14sm,不对称系数60%,2A核型。与已报道的五加科植物核型进行比较,2个物种进化程度不高,研究结果丰富了对供试物种遗传组成的认知。

古蔺牛皮茶染色体制片条件优化及核型分析

利用常规压片法对古蔺牛皮茶进行染色体制片条件优化与核型分析,结果表明,与顶芽和嫩叶相比,古蔺牛皮茶根尖的分裂相及中期分裂相细胞比例最高,是最合适的取材部位;1 mol/L盐酸解离16分钟染色体形态及分散效果最好。核型分析结果显示,其染色体数目为30条,核型公式2 n=2 x=30=18 m(2SAT)+10 sm+2 st,染色体相对长度变化范围为4.87%~8.58%,其相对长度组成2L+6M2+6M1+1S,染色体着丝粒指数范围为24.83%~45.82%,最长染色体与最短染色体长度比为1.76,臂比>2的染色体比例为6.7%,平均臂比值为1.60,核型类型为2A,核型不对称系数为60.93%,在50种茶树中处于中等进化程度。本研究为古蔺牛皮茶的进化分类、遗传育种、种质资源鉴定等研究提供了细胞学依据。

假臭草(Praxelis clematidea)染色体制片条件优化及核型对光照环境变化的响应

本研究为验证假臭草(Praxelis clematidea)细胞核型特征与其生物入侵性之间的关系,以入侵海口的恶性杂草假臭草三种不同生境下获取种子所培养的根尖为实验材料,采用常规压片法进行体细胞制片,比较不同预处理时间和解离时间两个重要因素,筛选最优染色体制片条件。比较三种生境假臭草染色体数目和核型特征差异情况,探讨假臭草核型特征对光环境变化的响应。结果表明:先用2 mmol/L的8-羟基喹啉溶液预处理90 min,再用1 mol/L HCl:45%的醋酸解离液处理1 min是最优的染色体制片处理条件。显微镜观察假臭草体细胞的染色体数目为2n=28。在旷野、林缘和林中生境下的假臭草体细胞核型公式分别为2n=2x=28=28sm,2n=2x=28=24sm+4m和2n=2x=28=18sm+10m,类型分别对应为3A,2A和2A,核型不对称系数分别对应为69.02%,64.32%和65.28%,属不对称类型。研究表明,假臭草核型特征受光环境的影响,高(正常)光照生境下假臭草核型进化程度较高,低光照生境条件下,假臭草核型进化程度较低,意味着在高光照生境条件下,假臭草具有更高的入侵性。这为假臭草的防控提供了细胞学依据。