肺癌纤维支气管镜刷落细胞中p16基因外显子2丢失的研究

目的 :探讨 p16基因外显子 2丢失与原发性肺癌发生发展之间的相关性 ,以及纤维支气管镜刷落细胞中检测 p16基因外显子 2丢失代替手术标本检测的可行性。方法 :在纤维支气管镜毛刷脱落细胞中采用 PCR-电泳-紫外成像条带密度扫描法 ,以β- actin基因为内对照 ,检测及分析病理证实的原发性肺癌患者病灶侧与其相对正常侧 p16基因外显子 2丢失的情况。结果 :p16基因外显子 2丢失率在肺癌患者相对正常侧毛刷脱落细胞中为 0 ( 0 /19 ) ,在病灶侧毛刷脱落细胞中为 35.5% ( 11/31) ,两者比较有统计学显著差异 ( P<0 .0 1)。小细胞肺癌 ( SCLC)标本中丢失率为 0 ( 0 /7) ,非小细胞肺癌 ( N SCLC)标本中丢失率为 50 % ( 11/2 2 ) ,两者比较有统计学显著差异 ( P<0 .0 5)。结论 :p16基因外显子 2丢失可能与 N SCLC的发生发展相关。纤维支气管镜直视下病灶处毛刷脱落细胞检测 p16基因外显子 2丢失率可代替手术标本以协助术前诊断与治疗。

从纤支镜刷落细胞提取微量RNA并检测Foxp3基因表达

目的建立纤维支气管镜刷落细胞提取微量核糖核酸(RNA)的方法,检测分析调节性T细胞(Treg)Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。方法以磁珠吸附法提取154例肺癌及肺良性疾病患者纤支镜刷脱细胞的微量RNA,以实时荧光定量RT-PCR的方法检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。结果平均总RNA提取量为5.08μgRNA/例,最低为3.20μg,最高为15.25μg。肺癌患者组中Foxp3 mRNA的表达水平(0.0000～13682.0805,四分位数间距0.0011)显著高于肺良性疾病组(0.0000～0.0061,四分位数间距0.0000)(Z=-3.508,P<0.01),肺癌患者组中Foxp3的阳性率(29.34%,27/92)亦明显高于肺良性疾病组(3.23%,2/62)(χ2=16.535,P<0.01)。结论利用纤支镜毛刷刷取病灶部位涂片后毛刷中的剩余细胞,采用磁珠吸附的方法可以提取微量RNA,并用于基因表达水平的检测。

肺癌刷落细胞、活检组织及痰液细胞端粒酶的活性研究

目的探讨支气管镜下肺刷落细胞、活检细胞及痰液细胞的端粒酶活性检测对诊断肺癌的价值。方法采用TPAP结合银染色定性法 ,对 46例肺部疾病患者支气管镜下肺刷落细胞、活检组织及其新鲜痰液细胞的端粒酶活性进行分析。结果32例肺癌患者 ,其活检组织、肺刷落细胞及痰液细胞端粒酶阳性率分别为 90 .6 %、87.5 %、5 3 .1% ,显著高于肺炎性、良性增生组 ;与病理学检查结果相比 ,肺刷落细胞及痰液细胞的端粒酶阳性率明显高于其细胞涂片中的癌细胞检出阳性率。结论痰液细胞及支气管镜下肺刷落细胞、活检组织的端粒酶活性检测 ,可作为肺癌诊断的有效而灵敏的指标 ,能提高肺癌的检出率。

细胞学联合端粒酶检测对贲门癌诊断价值的探讨

目的 探讨胃镜直视下刷取贲门粘膜脱落细胞中端粒酶活性及细胞学对贲门癌的诊断价值。方法 采用TRAP PCR银染定性法及TRAP PCR ELISA定量法对 72例贲门粘膜刷落细胞进行端粒酶活性分析 ,同时进行细胞学诊断及病理学诊断。结果 贲门癌组端粒酶活性 (1 5 2 1± 0 192 ,OD值 )明显高于贲门炎组 (0 0 65±0 0 14,OD值 ) ,端粒酶在贲门癌组阳性率 (88 89% )明显高于贲门炎组 (11 11% )。端粒酶在贲门癌组的阳性率明显高于贲门粘膜脱落细胞学的阳性率 (77 78% )。端粒酶联合细胞学诊断可使贲门癌的诊断率提高到93 33%。结论 贲门粘膜脱落细胞学诊断联合端粒酶活性测定可作为诊断贲门癌特异而敏感的方法 。