刺参酸性黏多糖对宫颈癌HeLa细胞凋亡及Bax、Bcl-2基因表达的影响

目的:研究刺参酸性黏多糖(SJAMP)对人宫颈癌HeLa细胞的诱导凋亡作用并探讨其对凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响。方法:体外培养HeLa细胞;采用Hoechst33258荧光染色检测SJAMP作用前后的细胞凋亡情况;流式细胞仪检测SJAMP作用HeLa细胞后线粒体膜电位(ΔΨm)的变化,Western Blot检测SJAMP对HeLa细胞作用后凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的表达。结果:荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学改变;与对照组比,各SJAMP浓度组均能降低HeLa细胞的线粒体膜电位;随着SJAMP作用浓度的增加,Bcl-2的表达减少,而Bax基因的表达增加。结论:SJAMP在体外可诱导HeLa细胞凋亡,其凋亡分子机制可能是因为对Bax、Bcl-2表达调控,改变线粒体跨膜电位诱导其凋亡。

刺参酸性黏多糖对DEN诱导大鼠肝癌形成抑制作用

目的观察刺参酸性黏多糖(SJAMP)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌形成的抑制作用,为SJAMP的应用提供依据。方法将50只雄性Wistar大鼠按体质量随机区组为正常对照组、肝癌模型组及SJAMP高、中、低剂量(70、35、15mg/kg体质量)组,每组10只。SJAMP各干预组在建立肝癌模型的同时,给予SJAMP灌胃,16周后停药,处死大鼠。比较各组大鼠体质量变化及肿瘤发生情况,并进行病理组织学观察。结果实验第16周时,肝癌模型组及SJAMP各干预组大鼠体质量与正常对照组相比差异均有显著性(F=8.29,q=3.53～7.02,P<0.05),SJAMP高剂量组大鼠体质量与肝癌模型组比较差异亦有统计学意义(q=3.81,P<0.05)。除了SJAMP高剂量组大鼠有1只未发生肝癌外,其余各组大鼠均发生肝癌,且肝癌模型组大鼠的肝脏瘤结节数最多,SJAMP高剂量组大鼠肝脏瘤结节数最少,SJAMP各干预组瘤体积均明显小于肝癌模型组(F=23.00,q=6.90～11.00,P<0.01),SJAMP高剂量组的瘤体积明显小于SJAMP低剂量组(q=4.10,P<0.05)。结论SJAMP对DEN诱导大鼠肝癌形成有抑制作用。

刺参酸性黏多糖对人肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的了解刺参酸性黏多糖(SJAMP)对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法体外培养HepG2细胞,MTT法检测SJAMP对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期,免疫细胞化学法检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达,以正常肝细胞(张氏细胞)作为对照。结果 SJAMP能抑制HepG2细胞增殖,且随着干预剂量(0、0.5、2.0、8.0mg/L)和干预时间(12、24、48h)延长其抑制作用增强(F=68.430～596.680,q=3.714～55.029,P<0.05);不同浓度SJAMP作用对张氏细胞增殖无明显的抑制作用(P<0.05)。随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞停留在G1期比例增加,S期、G2期的细胞减少(F=4.483～18.791,q=1.921～9.876,P<0.05);对于张氏细胞,SJAMP作用后其细胞周期未发生显著改变(P>0.05)。SJAMP作用后HepG2细胞的PCNA表达降低,且随着SJAMP作用剂量的增加而降低(F=2 688.640,q=55.365～156.296,P<0.05);张氏细胞PC-NA表达未发生显著变化(P>0.05)。结论 SJAMP通过诱导HepG2细胞发生细胞周期G1期阻滞并抑制其PCNA表达,从而抑制HepG2细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。

海洋刺参多糖对宫颈癌细胞周期的影响及其机制

目的研究海洋刺参多糖（SJAMP）对人宫颈癌细胞系HeLa细胞周期影响并探讨其作用机制。方法实验分为对照组（不用SJAMP）及1.6、3.26、.4 g/L不同剂量SJAMP组。应用免疫细胞化学法分别检测各组SJAMP对增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期抑制蛋白Mdm2表达的影响;流式细胞仪检测不同浓度SJAMP对HeLa细胞周期的影响。结果与对照组相比较,1.6、3.2和6.4 g/L SJAMP组均能抑制PCNA和Mdm2的表达（F=209.02~951.11,q=18.97~74.55,P〈0.05）,且具有一定的浓度依赖和时间依赖关系。经SJAMP处理的HeLa细胞发生G1期阻滞,对照组及1.6、3.2、6.4 g/L SJAMP组细胞的凋亡率分别为0.25%、4.32%、11.36%和30.04%,差异有显著性（F=26.95~259.21,q=3.34~36.36,P〈0.05）。结论 SJAMP对HeLa细胞的生长具有明显的抑制作用。其机制可能是SJAMP降低PCNA和Mdm2蛋白的异常表达,使细胞周期发生G1期阻滞,从而起到抑制细胞增殖的作用。

刺参酸性黏多糖对人肝癌HepG2细胞线粒体膜电位及钙离子浓度的影响

目的观察刺参酸性黏多糖(SJAMP)体外诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的情况,探讨SJAMP对HepG2细胞线粒体凋亡途径相关膜电位作用机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,用不同浓度的SJAMP(0.25、1.00、4.00mg/L)对其进行干预,应用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位改变,Fura-2荧光显微镜检测细胞钙离子浓度改变。在相同条件下干预人正常肝细胞(张氏细胞)以观察其对正常细胞的影响。结果随着SJAMP剂量的增加,HepG2细胞内钙离子浓度及线粒体膜电位均降低,各干预组与空白对照组比较、各干预组间比较差异均有显著性(F=183.36、264.24,q=3.26～35.67,P<0.05);而张氏细胞各干预组钙离子浓度及线粒体膜电位(除0.25mg/L SJAMP作用组线粒体膜电位高于其他组外)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SJAMP可能通过降低细胞内钙离子浓度和细胞线粒体膜电位,诱导线粒体通透性的改变,启动细胞凋亡途径。

刺参酸性黏多糖对小鼠H22肝癌移植瘤Bcl-2和Bax基因表达影响

目的探讨刺参酸性黏多糖（SJAMP）对小鼠H22肝癌移植瘤细胞凋亡的作用及其机制。方法接种H22肝癌细胞于昆明种小鼠右前肢腋部皮下,建立H22肝癌模型。将小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组及SJAMP高、中、低剂量组。无菌条件下取肿瘤组织,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构;Real-time PCR及免疫组织化学方法分别检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax mRNA及蛋白的表达水平。结果 SJAMP各剂量组肿瘤质量均小于阴性对照组,差异有统计学意义（F=40.56,q=2.36～10.02,P〈0.05）。SJAMP各剂量组肿瘤细胞均出现不同程度的凋亡形态学特征。随着SJAMP剂量增加,Bcl-2表达下调,Bax表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值显著降低,呈现一定的剂量依赖关系（F=184.94～8 775.24,q=3.77～225.69,P〈0.05）。结论 SJAMP可以通过促进细胞凋亡达到抑制肿瘤生长的目的,其作用机制可能与下调Bcl-2的表达,同时上调Bax的表达,使Bcl-2/Bax比值下调有关。