刺平面细胞极性蛋白1基因参与骨性Ⅲ类错[牙合]畸形形成的机制研究

目的探究刺平面细胞极性蛋白1(prickle planar cell polarity protein 1,PRICKLE1)基因变异参与骨性Ⅲ类错[牙合]畸形发生的分子机制。方法收集2021年10月于南京医科大学附属口腔医院正畸科就诊的骨性Ⅲ类错[牙合]畸形伴上颌骨发育不足家系1个,提取该家系成员基因组DNA进行全外显子组测序,筛选致病基因及突变位点,Sanger测序验证突变序列。收集2021年10月至2022年12月于南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科就诊的正颌患者手术过程中切除的颌骨组织,提取并培养人颌骨骨髓间充质干细胞,转染过表达慢病毒(过表达目的基因的慢病毒为野生组,过表达突变位点的慢病毒为突变组)和敲降慢病毒(分为敲降1组和2组,以干扰阴性慢病毒为对照组),开展实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)实验、蛋白质印迹法实验、增殖实验、Transwell实验、碱性磷酸酶和茜素红染色。构建斑马鱼模型,注射吗啉代寡聚核苷酸(morpholino oligonucleotide,MO),在斑马鱼体内敲低prickle1a和prickle1b的表达(共敲组),对照组注射标准化MO作为参照。对2组斑马鱼颅面部组织进行转录组测序、富集分析和共表达分析。结果该家系2例患者均携带PRICKLE1 c.113C>T突变。转染实验显示,相比野生组(PRICKLE1相对表达量为21.97±0.60),突变组人颌骨骨髓间充质干细胞PRICKLE1相对表达量(5.05±0.05)显著降低(P<0.05),细胞增殖能力和迁移能力显著增强(P<0.05),成骨分化能力显著减弱(P<0.05);相比对照组,2个敲降组细胞的增殖能力和迁移能力均显著增强(P<0.05),成骨分化能力均显著减弱(P<0.05)。斑马鱼模型实验显示,与对照组(338.80±24.92)相比,共敲组斑马鱼筛板宽度显著减小(282.50±61.77)(t=5.29,P<0.001)。转录组测序富集分析结果显示,共敲组和对照组的差异基因在丝裂原活化蛋白激酶信号通路上富集明显。结论PRICKLE1 c.113C>T突变下调丝裂原活化蛋白激酶信号通路,抑制颌骨骨髓间充质干细胞的成骨分化能力,进而参与骨性Ⅲ类错[牙合]畸形的发生发展。

针刺对脑心综合征大鼠脑组织细胞凋亡、炎症因子及丝裂原活化蛋白激酶/核因子-κB/激活蛋白-1信号通路的影响

目的探讨针刺对脑心综合征大鼠脑组织细胞凋亡、炎症因子及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)信号通路的影响。方法将36只SD大鼠随机分为针刺组、模型组和对照组,各12只。采用胶原酶加肝素联合注射大鼠尾状核制备脑心综合征大鼠模型,对照组给予等剂量生理盐水向大鼠尾状核注入,手术操作过程同模型组。模型组和假手术组均不予针刺;针刺组选心俞穴、内关穴、风府穴和水沟穴,每日针刺1次,连续3天。采用原位末端凋亡(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)法测定脑组织细胞凋亡情况;神经功能采用Zea-Longa法评估;运用酶联免疫法测定白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平;采用Western Blot法测定MAPK、NF-κB、AP-1蛋白表达。结果模型组和针刺组大鼠脑组织细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)高于假手术组(P<0.05);针刺组大鼠脑组织AI低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠神经行为评分高于假手术组(P<0.05);针刺组大鼠神经行为评分低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠IL-1β、IL-6和TNF-α水平高于假手术组(P<0.05);针刺组大鼠IL-1β、IL-6和TNF-α水平低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠MAPK蛋白灰度值、NF-κB蛋白灰度值和AP-1蛋白灰度值高于假手术组(P<0.05);针刺组大鼠MAPK蛋白灰度值、NF-κB蛋白灰度值和AP-1蛋白灰度值低于模型组(P<0.05)。结论脑心综合征大鼠采用针刺可减轻大鼠脑组织细胞凋亡,减轻大鼠炎症因子,且可下调MAPK/NF-κB/AP-1信号通路表达。

刺芒柄花素通过促进解偶联蛋白1(UCP1)表达刺激棕色脂肪细胞产热

目的探讨刺芒柄花素(formononetin)通过解偶联蛋白1(UCP1)调控棕色脂肪细胞产热的机制。方法分离来源于C57BL/6J小鼠的脂肪组织的前体细胞,体外诱导为成熟的棕色脂肪细胞,利用实时定量PCR检测脂肪细胞标志基因脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、脂连蛋白(Adiponectin)的表达确定其脂肪细胞的特性;利用实时定量PCR及Western blot法检测formononetin是否促进棕色脂肪细胞产热基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ共刺激因子1α(PGC-1α)、碘甲腺原氨酸脱碘酶2(Dio2)、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ)及解偶联蛋白1(UCP1)的表达;分离来自UCP1敲除小鼠的棕色脂肪前体细胞,并诱导分化至成熟的脂肪细胞并检测分化效率。上述细胞的对照为来自野生型C57BL/6J小鼠分化成熟脂肪细胞;利用XF24细胞能量代谢仪检测formononetin对野生型及UCP1敲除棕色脂肪细胞呼吸的影响。结果野生型和UCP1敲除的棕色脂肪前体细胞均能诱导分化至成熟脂肪细胞;Formononetin能促进野生型棕色脂肪细胞产热基因PGC-1α、Dio2、PPARγ及UCP1的表达,也能促进UCP1敲除棕色脂肪细胞中UCP1上游产热基因PGC-1α、Dio2的表达;UCP1的缺失抑制formononetin诱导棕色脂肪细胞呼吸的氧耗量。结论Formononetin通过促进UCP1的表达从而激活棕色脂肪细胞的产热及氧耗量。

刺五加对颈性眩晕患者多巴胺D2受体基因CpG岛甲基化及体外小胶质细胞的M1/M2极性的影响

目的研究刺五加对颈性眩晕(CV)患者多巴胺D2受体(DRD2)基因CpG岛甲基化及体外小胶质细胞hmc-3的M1/M2极性的影响。方法收集30例未经治疗的CV患者、30例经刺五加治疗的CV患者、30例健康者的血液,样本分别分为CV组、治疗组、健康组。培养hmc-3小胶质细胞,分别应用20μg、40μg、80μg刺五加处理hmc-3细胞,分为对照组和刺五加组。提取血液全基因组DNA,提取血液或小胶质细胞中的总RNA。RT-qPCR检测DRD2、M1表型标志物CD16、CD32、CD86和M2表型标志物Arginase 1、CD206的mRNA水平。应用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测CV组、治疗组、健康组、对照组及刺五加组的DRD2甲基化。CCK-8法检测hmc-3细胞的增殖率变化。蛋白免疫印迹法检测DRD2、CD16、CD32、CD86、Arginase 1、CD206的蛋白水平。细胞免疫荧光法检测hmc-3细胞中的DRD2表达。结果与健康组比较,CV组DRD2的mRNA表达下调且甲基化率上调(P<0.05),但与CV组比较,治疗组的mRNA表达上调且甲基化率下调(P<0.05)。40μg、80μg的刺五加上调小胶质细胞hmc-3的增殖率和DRD2表达(P<0.05)。与对照组比较,刺五加下调M1表型CD16、CD32、CD86的mRNA和蛋白水平(P<0.05),但上调M2表型Arginase 1、CD206的表达(P<0.05)。结论刺五加抑制CV患者DRD2基因CpG岛的甲基化率,促进体外小胶质细胞的M2极性表型。

土威除痹汤联合针刺疗法对急性痛风性关节炎的临床效果及对CRP、IL-1β的影响

目的:探究土威除痹汤联合针刺疗法对急性痛风性关节炎的临床效果及对C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法:选取2018年1月~2019年1月我院收治的痛风性关节炎患者80例,分为单药治疗组(n=40)使用土威除痹汤治疗,联合治疗组(n=40)使用土威除痹汤联合针刺疗法治疗,评价患者CRP、SUA、ESR、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平、湿热痹阻评分、中医证候疗效评分变化。结果:联合治疗组CRP、SUA、ESR低于单药治疗组(P<0.05);联合治疗组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8低于单药治疗组(P<0.05)联合治疗组功能障碍、VAS评分低于单药治疗组(P<0.05);联合治疗组中医证候疗效积分低于单药治疗组(P<0.05);联合治疗组治疗总有效率高于单药治疗组(P<0.05)。结论:土威除痹汤联合针刺疗法改善患者急性痛风关节炎临床症状,缓解疼痛,降低CRP、IL-1β水平,效果显著。

“三部针刺法”对类风湿关节炎模型大鼠血清中白细胞介素-17、基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1含量影响

目的:观察类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)模型大鼠在"三部针刺法"的干预下,血清中白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)9及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(Tissue Inhibitor of Matrix Metalloproteinase-1,TIMP-1)含量的变化,探讨针灸通过调控细胞因子等发挥改善RA病症的作用。方法:将SPF级雄性大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组及针刺组,每组10只。除空白组外于右后足跖皮内注射0.15 mL弗氏完全佐剂(Freund’s Complete Adjuvant,FCA)诱发RA大鼠模型,空白组注射0.15 mL的0.9%NaCl溶液。针刺、艾灸组干预方法选用"三部针刺法",针刺组治疗每次20 min,7 d为一个疗程,间隔1天后再行第2个疗程,艾灸组艾灸时间、疗程同针刺组。治疗结束后观察大鼠体质量、右后足跖度肿胀度的变化,酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量。结果:与空白组比较,三组大鼠血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量皆上升(P<0.05)。与模型组比较,两干预组干预1周、2周后,血清中IL-17、MMP9、TIMP-1含量均下降(P<0.05)。与艾灸组比较,针刺组干预1周、2周后,血清中IL-17含量与艾灸组相当,血清中MMP9、TIMP-1含量均下降更明显(P<0.05)。结论:"三部针刺法"通过影响血清中IL-17、MMP9及TIMP-1的含量,来改善RA大鼠的关节炎性反应。

针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织基质金属蛋白酶、细胞间黏附分子表达的影响

目的探讨针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤区组织基质金属蛋白酶(MMP-9)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法以大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型,采用随机区组设计将大鼠分为电针、针刺、药物、针药结合、模型、假手术等6个大组,其中电针、模型、假手术组又分12、24、48、72、96和144 h 6个时间点以,另设空白对照组7只。HE染色检测损伤区组织形态学变化;免疫组化法检测MMP-9和ICAM-1积分吸光度值。结果 HE染色显示,梗死核心区病理损伤高峰时间出现在48 h;72 h后间质水肿减轻,大量小胶质细胞和胶原纤维增生,出现大量新生血管。免疫组化结果显示,MMP-9和ICAM-1在血管内皮细胞和炎性细胞及少数神经元广泛表达,缺血区明显高于自身对照区;组内比较显示表达呈48 h和144 h双峰形;组间比较显示,在48、72和96 h,电针组与其他实验组结果有显著差异。结论电针可能通过上调损伤-修复网络功能,促进梗死区神经功能的恢复。

IRE1-XBP1通路调控肝巨噬细胞极性的机制研究

目的分离、培养LEWIS大鼠肝脏肝巨噬细胞(KCs),观察肌醇酶1-X盒连接蛋白1(IRE1-XBP1)通路活性改变对KCs功能的调控的作用机制。方法 (1)采取Ⅳ型胶原酶消化肝脏联合非连续梯度离心法分离Lewis大鼠KCs;(2)鉴定后的KCs分为4组:XBP1沉默组(XBP1-shRNA组)、错义序列沉默对照组(Ctrl-shRNA组);Adv-XBP1过表达组(AdV-XBP1组)、错义序列过表达对照组(Ctrl-AdV组);(3)实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组KCs中XBP1、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17转录水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK1、JAK2、STAT1及STAT3的蛋白表达水平;(4)流式细胞术(FCM)及激光共聚焦检测各组KCs表型的变化情况;(5)分离大鼠脾脏淋巴细胞,尼龙毛柱过滤纯化T细胞,与上述各组KCs共培养,Brdu渗入法检测T细胞增殖情况;(6)Annexin V/PI法FCM观察T淋巴细胞凋亡情况;(7)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测上清液中IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17及IL-10水平。结果 (1)RT-PCR结果显示,XBP1-shRNA组中XBP1的表达量较对照组显著降低,而在AdvXBP1组则明显上调(P<0.05);(2)FCM发现,XBP1-shRNA组中MHC-Ⅱ、CD86、CD40的表达明显低于对照组,而CD204和CD206的表达则显著高于对照组;而在Adv-XBP1组,则呈相反趋势;(3)Western blot检测发现XBP1-shRNA组中JAK1、JAK2、STAT1和STAT3的蛋白表达及其磷酸化水平均受到抑制,而在Adv-XBP1组则上述蛋白的表达及磷酸化水平得到显著增强;(4)Brdu发现抑制KCs中IRE1-XBP1活性后T细胞增殖受到明显抑制,凋亡增加,促炎细胞因子分泌减少,抗炎细胞因子分泌增加(P<0.05),而上调KCs中IRE1-XBP1活性后T细胞增殖则明显增强,凋亡明显减少,促炎细胞因子分泌增加,抗炎细胞因子分泌减少(P<0.05)。结论 KCs中IRE1-XBP1通路活性变化可以转化KCs的极性状态,并通过调节JAK-STAT家族成员表达,调控KCs自分泌细胞因子的组成成分;KCs中IRE1-XBP1通路活性变化可以影响共培养初始T淋巴细胞的增殖分化、凋亡及相关细胞因子的分泌。

冠心病患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1及磷酸化c-Jun蛋白表达改变与冠状动脉病变特征的相关性

目的结合冠状动脉造影结果,探讨冠心病患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1和磷酸化c-Jun蛋白表达水平改变与冠状动脉病变特征的关系。方法40例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者分为急性冠状动脉综合征组(n=24)和稳定型心绞痛组(n=16),另选取同期经冠状动脉造影证实无冠状动脉病变患者15例为对照组。采用免疫印迹法分别检测外周血单个核细胞基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1和磷酸化c-Jun蛋白表达水平,计算基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1比值,并结合Gensini冠状动脉病变积分标准评价其与冠状动脉管腔病变程度的线性关系及其在反映冠状动脉粥样硬化斑块稳定性中的作用。结果①急性冠状动脉综合征组基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、磷酸化c-Jun蛋白表达水平及基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1比值较稳定型心绞痛组和对照组明显增高(均P<0.001)。②基质金属蛋白酶9、磷酸化c-Jun及基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1比值与Gensini冠状动脉病变积分呈正相关(r分别为0.433、0.476和0.457,均P<0.01);组织型金属蛋白酶抑制剂1蛋白表达水平与Gensini冠状动脉病变积分无相关性。③磷酸化c-Jun与基质金属蛋白酶9蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.839,P<0.001)。结论①急性冠状动脉综合征患者基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1蛋白表达水平较稳定型心绞痛患者明显增高,其比例严重失调,反映了急性冠状动脉综合征患者冠状动脉管腔病变程度更为复杂且血管壁具有更多易损斑块;②核转录因子c-Jun活化可能参与了动脉粥样硬化中基质金属蛋白酶9表达的调控。

肝X受体激动剂对高脂载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉壁一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原和纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响

目的研究肝X受体激动剂3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317对高脂载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉壁一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原、纤溶酶原激活物抑制剂1表达的影响。方法以高脂饲养载脂蛋白E基因缺陷小鼠为动脉粥样硬化模型,分为无药对照组、3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯干预组[10 mg/(kg.d)]和T-0901317干预组[10 mg/(kg.d)],每组6只小鼠,灌胃6周。用免疫组织化学SP法检测主动脉壁中诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶、增殖细胞核抗原、纤溶酶原激活物抑制剂1蛋白的表达。结果药物干预的两组主动脉壁中诱导型一氧化氮合酶的表达均显著低于对照组(P<0.01),而血管内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶的表达均显著高于对照组(P<0.01)。各组增殖细胞核抗原和纤溶酶原激活物抑制剂1的表达无显著性差异(P>0.05)。结论肝X受体激动剂3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317均可促进血管内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶的表达,抑制动脉壁中诱导型一氧化氮合酶的表达。提示肝X受体激动剂还可通过调脂以外的其它途径,如抑制炎症反应和保护内皮功能等方面,发挥其抗动脉粥样硬化作用。

载脂蛋白A1诱导骨髓源性巨噬细胞向抗炎性M2型极化的作用

目的观察载脂蛋白A1对骨髓源性巨噬细胞极性的影响,探讨高密度脂蛋白抗炎的细胞机制。方法体外培养小鼠骨髓源性巨噬细胞,分别用5、10、15 mg/L浓度的载脂蛋白A1孵育细胞24 h后,应用流式细胞术检测膜分子CD16/32、CD206的表达;用酶联免疫吸附法检测白细胞介素10和白细胞介素12的分泌;用实时荧光定量聚合酶链反应检测Toll样受体4、髓样分化因子88、干扰素调节因子5 mRNA的表达。结果经载脂蛋白A1干预后的巨噬细胞,CD16/32、白细胞介素12表达明显下降,CD206、白细胞介素10表达明显升高,并伴有Toll样受体4、髓样分化因子88、干扰素调节因子5 mRNA表达的下降,呈剂量依赖性。结论载脂蛋白A1促进巨噬细胞向抗炎性M2型巨噬细胞极化,此效应可能与高密度脂蛋白的抗炎作用有关。

补阳还五汤加二陈汤化裁方联合针刺对肘关节骨关节炎继发轻中度尺神经卡压患者IL-1、IL-6、MMP-13及电生理的影响

目的:分析补阳还五汤加二陈汤化裁方联合针刺对肘关节骨关节炎继发轻中度尺神经卡压综合征(cubital tunnel syndrome,CuTS)患者白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)及电生理的影响。方法:选取104例肘关节骨性关节炎患者作为研究对象,按照不同治疗方法分为观察组和对照组,每组52例。两组均给予抗炎、营养神经等药物治疗,对照组同时给予补阳还五汤加二陈汤化裁方,观察组在对照组治疗基础上增加针刺疗法,两组共治疗4周。对比两组临床疗效、治疗前后视觉疼痛评定量表(visual analogue scale,VAS)和上肢功能评定量表(disabilities of arm,shoulder and hand,DASH)评分、IL-1、IL-6、MMP-13水平、尺神经肘段运动传导速度(motor conduction velocity,MCV)、尺神经肘段感觉传导速度(sensory conduction velocity,SCV)、尺神经干肘段动作电位(nerve action potentia,NAP)改变及不良事件发生情况。结果:观察组优良率[76.92%(42/52)]高于对照组[73.08%(38/52)](P<0.05)。治疗后,两组VAS、DASH评分及IL-1、IL-6、MMP-13水平均低于治疗前,且观察组上述指标均低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组MCV、SCV和NAP水平均高于治疗前,且观察组MCV、SCV和NAP水平均高于对照组(P<0.05)。两组不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补阳还五汤加二陈汤化裁方联合针刺治疗肘关节骨关节炎继发轻中度CuTS患者疗效确切,可降低患者IL-1、IL-6、MMP-13水平,缓解疼痛,促进上肢功能恢复,并改善神经电生理,安全性高。

芪参通络化瘀方联合针刺治疗早期糖尿病肾病的临床观察

【目的】观察芪参通络化瘀方联合针刺治疗早期糖尿病肾病(DKD)的临床疗效。【方法】将92例早期DKD患者随机分为研究组和对照组,每组各46例,两组均给予常规西医控制血压、血脂、血糖治疗,对照组给予芪参通络化瘀方治疗,研究组在对照组治疗的基础上,给予针刺治疗,共治疗8周。治疗8周后,评价2组临床疗效,观察2组患者治疗前后中医证候评分包括口渴喜饮、腰膝酸冷、尿浊、肢体浮肿、神疲乏力、手足心热等的变化情况,以及空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白排泄率(UAER)的情况。比较2组患者治疗前后血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、细胞因子信息传导抑制因子3(SOCS3)水平的变化情况。【结果】(1)治疗后,2组患者的中医证候评分明显改善(P<0.05),且研究组在改善中医证候评分方面明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者FPG、2hPG、Scr、BUN、UAER水平均显著降低(P<0.05),且研究组在改善FPG、2hPG、Scr、BUN、UAER水平方面明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者血清CHI3L1、SOCS3水平均明显改善(P<0.05),且研究组在改善血清CHI3L1、SOCS3水平方面明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)研究组总有效率为95.65%(44/46),对照组为78.26%(36/46),研究组疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】芪参通络化瘀方联合针刺治疗早期糖尿病肾病,能明显改善患者的临床症状,有效调节患者血糖,改善患者的肾功能,调节血清CHI3L1、SOCS3水平,疗效显著。

辨证取穴针刺法对膝关节骨性关节炎患者血清MMP、IL-1β表达的影响

目的:探讨辨证取穴针刺法对膝关节骨性关节炎(KOA)患者血清基质金属蛋白酶(MMP)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达的影响。方法:将2016年3月—2017年8月收治的78例KOA患者随机分为对照组与观察组,各39例。对照组给予硫酸氨基葡萄糖胶囊0. 628 g/次,3次/d,7 d为1个疗程;观察组给予辨证取穴针刺法,1次/d,6次为1个疗程,疗程间休息1 d,两组均持续治疗4个疗程。检测血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化,采用国际膝关节骨性关节炎自评量表(WOMAC)评估症状,比较临床疗效。结果:与治疗前比较,两组血清MMP-3、MMP-9水平降低(P <0. 01),血清IL-1β、TNF-α水平降低(P <0. 01),疼痛、僵硬、日常活动度WOMAC量表评分降低(P <0. 01);与对照组比较,观察组血清MMP-3、MMP-9水平较低(P <0. 01),血清IL-1β、TNF-α水平较低(P <0. 01),疼痛、僵硬、日常活动度WOMAC量表评分较低(P <0. 01),总有效率较高(P <0. 05)。结论:辨证取穴针刺法治疗KOA疗效确切,可能与下调血清MMP、IL-1β表达有关。

加强扬刺百会对中风后抑郁病人MIP-1α和NF-κB/iNOS/NO信号通路的影响

目的观察加强扬刺百会联合口服氟西汀治疗中风后抑郁的疗效及对外周巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)和核因子κB p65(NF-κB p65)/诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)/一氧化氮(NO)信号通路的影响。方法选取我院收治的中风后抑郁病人60例,按随机数字表法分为针刺+氟西汀组与氟西汀对照组,每组30例。两组均给予急性缺血性脑卒中常规治疗,氟西汀对照组在常规治疗基础上给予盐酸氟西汀胶囊口服,每次20 mg,每日1次;针刺+氟西汀组在氟西汀对照组治疗基础上给予加强扬刺百会穴治疗,每日行针1次。两组均连续治疗30 d后评价疗效和不良反应,比较两组治疗前后汉密顿抑郁量表(HAMD)评分和Barthel指数,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)神经递质水平及MIP-1α、NF-κB p65、iNOS、NO水平。结果治疗后,针刺+氟西汀组总显效率(76.7%)高于氟西汀对照组(50.0%,χ^(2)=4.593,P=0.032);针刺+氟西汀组的总有效率为90.0%,氟西汀对照组为73.3%,组间比较差异无统计学意义(χ^(2)=2.783,P=0.095)。治疗后,两组HAMD评分和MIP-1α、NF-κB p65、iNOS、NO水平均较治疗前降低(P<0.01),且针刺+氟西汀组低于氟西汀对照组(P<0.05);两组Barthel指数较治疗前升高(P<0.01),且针刺+氟西汀组高于氟西汀对照组(P<0.05)。两组治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论加强扬刺百会治疗中风后抑郁疗效显著,能够改善病人抑郁程度和日常生活活动能力,且安全性较高,其抗抑郁机制可能与降低趋化因子MIP-1α水平及调控NF-κB/iNOS/NO信号通路、阻断炎症反应有关。

针刺联合养阴解毒法治疗放射性肺炎疗效及对血清IL-6、TGF-β1、CRP的影响

目的观察针刺联合养阴解毒法治疗放射性肺炎的临床疗效及对血清白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))及C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法收集2016年5月—2019年8月河北省沧州中西医结合医院放射治疗科收治的因胸部恶性肿瘤放疗所致Ⅱ~Ⅳ度放射性肺炎患者126例,采用完全随机分组法分为对照组与观察组各63例。2组患者均给予放疗后常规治疗,观察组在此基础上给予针刺联合自拟养阴清肺汤治疗,疗程均为4周。观察2组患者治疗后血清IL-6、TGF-β_(1)、CRP水平及肺功能变化,比较2组治疗结束后随访4周时疗效。结果2组患者治疗4周后血清IL-6、TGF-β_(1)及CRP水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),且同期组间比较观察组均明显低于对照组(P均<0.05);2组患者治疗4周后用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))及一氧化碳弥散量(DLCO)均较治疗前明显升高(P均<0.05),且同期组间比较观察组均明显高于对照组(P均<0.05);结束后随访4周时观察组总有效率为93.7%(59/63),明显高于对照组的66.6%(42/63),差异有统计学意义(χ^(2)=13.206,P<0.05)。结论针刺联合养阴解毒法治疗放射性肺炎可有效抑制机体炎性反应,改善肺功能,有助于提高治疗效果。

刺芒柄花素通过COX-2/cyclin D1轴调控肝癌的发生和发展

目的:分析环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达与肝癌患者临床病理特征及预后的关系,探讨刺芒柄花素(formononetin,FOR)在肝癌发生和发展中的作用及其机制。方法:收集2021年1~5月河北医科大学第四医院20例手术治疗肝癌患者的癌和相应的癌旁组织、60例手术治疗肝癌患者的临床资料,以及人肝癌细胞系HepG2和Bel-7402。用qPCR法和免疫组织化学染色法检测肝癌组织中COX-2的表达,分析其表达与患者临床病理特征和预后的关系。构建小鼠二乙基亚硝胺诱导肝癌模型,验证FOR对肝癌发病的影响。用0.003、0.006μmol/ml的FOR分别处理肝癌细胞HepG2和Bel-740248 h后,用CCK-8法和流式细胞术检测FOR对肝癌细胞增殖和周期的影响,qPCR和WB法检测细胞中COX-2、CDK4、CDK6和cyclin D1表达的变化。结果:肝癌组织中COX-2 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),COX-2蛋白表达阳性率为68.3%(41/60);COX-2表达阳性与患者TNM分期晚、肿瘤大、生存期短有关(均P<0.05)。诱导小鼠肝癌模型中,FOR处理组小鼠肝癌的发生率显著降低、肝癌组织中COX-2表达显著降低(均P<0.05)。FOR处理可显著抑制HepG2和Bel-7402细胞的增殖能力,增加G0/G1期细胞比例、降低S和G2期细胞比例(均P<0.05),抑制细胞中COX-2和cyclin D1的表达(均P<0.01)。结论:COX-2表达阳性肝癌患者临床分期较晚且预后较差,FOR可通过抑制COX-2和cyclin D1表达来降低肝癌的发生和发展。

循经针刺联合非手术脊柱减压对腰椎间盘突出症腰椎功能及血清TFAR19、Apaf-1的影响

目的探讨循经针刺联合非手术脊柱减压对腰椎间盘突出症腰椎功能及血清TF-1细胞凋亡相关基因19(TFAR19)、凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)的影响。方法选取2018年6月—2020年7月该院收治的94例腰椎间盘突出症患者,随机分为对照组与观察组,各47例。对照组给予非手术脊柱减压治疗,观察组在对照组基础上另给予循经针刺治疗。对比治疗前、治疗3个月后腰椎功能[日本骨科协会腰椎功能(JOA)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分]及治疗前、治疗1个月、治疗3个月的腰腿疼痛评分[视觉模拟评分法(VAS)],并比较临床疗效及治疗前、治疗1个月、治疗3个月的椎旁肌肉肌电变化情况,另比较治疗前、治疗3个月后血清TFAR19、Apaf-1水平变化情况及治疗期间不良事件发生情况。结果两组治疗3个月后JOA评分均高于治疗前(P<0.05),观察组治疗3个月后高于对照组(P<0.05);两组治疗3个月后ODI评分均低于治疗前(P<0.05),观察组治疗3个月后低于对照组(P<0.05);两组治疗1个月、3个月的VAS评分均低于治疗前(P<0.05),治疗3个月的VAS评分均低于治疗1个月(P<0.05);观察组治疗1个月、3个月的VAS评分均低于对照组(P<0.05);观察组总有效率高于对照组(P<0.05);两组治疗1个月、3个月的竖脊肌及多裂肌积分肌电值(IEMG)、平均振幅、平均频率斜率均高于治疗前(P<0.05),治疗3个月均高于治疗1个月(P<0.05);观察组治疗1个月、3个月的竖脊肌及多裂肌IEMG、平均振幅、平均频率斜率均高于对照组(P<0.05);两组治疗3个月后血清TFAR19、Apaf-1水平均低于治疗前(P<0.05),观察组治疗3个月后血清TFAR19、Apaf-1水平均低于对照组(P<0.05);两组治疗期间不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论循经针刺联合非手术脊柱减压治疗腰椎间盘突出症患者,可明显减轻患者腰腿疼痛感,改善腰椎功能及椎旁肌肉肌力,提升椎旁肌群稳定性,降低血清TFAR19、Apaf-1水平,提高临床疗效,且安全性良好。

齐刺配合短波治疗膝关节骨性关节炎疗效及对关节液IL-1β、TNF-α及MMP-3的影响

目的:观察齐刺配合短波治疗膝关节骨性关节炎(KOA)的临床疗效及对关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法:136例KOA患者被随机分为综合治疗组和对照组,每组各68例,对照组采用美洛昔康片和盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗,综合治疗组采用齐刺配合短波治疗。采用视觉模拟量表(VAS)和骨性关节炎指数可视化量表(WOMAC)从疼痛和关节功能两个方面评价KOA患者症状改善情况,观察两组患者的临床疗效,并比较两组患者治疗前后关节液中IL-1β、TNF-α和MMP-3的变化。结果:两组患者治疗后VAS评分和WOMAC评分均较治疗前明显降低(P<0.01),且综合治疗组低于对照组(P<0.01)。综合治疗组总有效率为92.65%,明显高于对照组的83.82%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-3含量均较治疗前明显下降(P<0.01),且综合治疗组较对照组下降更显著(P<0.01)。结论:齐刺配合短波可减轻KOA患者疼痛,改善膝关节功能,临床疗效显著,其作用机制可能与降低关节液中炎症因子IL-1β、TNF-α和MMP-3水平有关。

针刺联合米非司酮对子宫肌瘤患者血清MCP-1及ER、PR影响

目的观察针刺联合米非司酮对子宫肌瘤患者血清单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平的影响。方法将84例子宫肌瘤患者,随机分为对照组和联合组,每组42例。对照组采用米非司酮治疗,联合组在对照组治疗的基础上联合针刺治疗。观察两组治疗前后子宫肌瘤体积、月经量及子宫体积,血清MCP-1、ER、PR水平,血浆黏度和红细胞聚集指数变化,并比较两组临床疗效及不良反应发生率。结果联合组总有效率为90.5%,高于对照组的73.8%(P<0.05)。两组治疗后子宫肌瘤体积、月经量及子宫体积,血清MCP-1、ER、PR水平,血浆黏度和红细胞聚集指数均改善(P<0.05);且联合组低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论针刺联合米非司酮有利于减少子宫肌瘤病灶体积,减少血清中MCP-1、ER、PR表达,改善血液流变。