刺松藻水溶性多糖的提取分离及理化性质研究

本文以刺松藻(Codium fragile)为原料,依次经冷水、热水提取,得到2种粗多糖CFC和CFH,经Q-SepharoseFF强阴离子交换色谱分离,分别从CFC和CFH中得到组分CFCP1～P6和CFHP1～P5,并对其理化性质进行了分析。分别运用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、高效离子色谱法(HPIC)、傅里叶变换红外光谱法(FTIR)对其分子量、单糖组成和结构特征进行了分析。结果表明,刺松藻中多种结构复杂的多糖,CFCP1和CFCP6属于硫酸阿拉伯半乳聚糖,CFCP4和CFHP5属于丙酮酸化的硫酸半乳聚糖,CFHP1和CFHP2分别属于葡聚糖和甘露聚糖。多糖CFCP2、CFHP2和CF-HP3中除了含有半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖和甘露糖外,还含有木糖、鼠李糖和岩藻糖。这些结构特殊的多糖为海洋药物研究与开发提供了良好基础。

刺松藻化学成分测定及其营养评价

对刺松藻的常规营养成分、不溶性膳食纤维、氨基酸、脂肪酸及矿质元素进行了分析测定。结果显示:刺松藻的主要成分是碳水化合物,占66.86%,其中不溶性膳食纤维占43.04%;蛋白质含量较高,占21.67%,必需氨基酸占总氨基酸百分比为42.2%,限制氨基酸为蛋氨酸和胱氨酸,氨基酸评分86;脂肪含量低,占3.47%,其中不饱和脂肪酸占47.46%;矿物元素含量丰富,尤其是微量元素Cu,Fe,Zn含量高。结论:长刺松藻是一种高膳食纤维、高蛋白、低脂肪、低热量,且富含铁、锌等微量矿质元素的天然理想保健食品原料。

刺松藻多糖抗凝血及抗血栓作用的研究

目的研究刺松藻多糖抗凝血作用及对血小板聚集的影响。方法采用热水浸提乙醇沉淀法制备刺松藻多糖。家兔心脏采血,取血浆检测活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT);采用红外比浊法测定刺松藻多糖对血小板聚集的影响。采用胶原蛋白-肾上腺素诱导小鼠血栓模型实验,检测刺松藻多糖抗血栓作用。结果刺松藻多糖能显著延长家兔血浆APTT、PT和TT;显著抑制由二磷酸腺苷(ADP)引起的家兔血小板聚集,对胶原蛋白-肾上腺素诱导的小鼠血栓性偏瘫及死亡率均有明显降低。结论刺松藻多糖具有抗凝血、抑制血小板聚集和抗血栓作用。

刺松藻抑藻活性物质分离的初步研究

采用甲醇浸泡刺松藻干粉末,适当处理后,制备到此海藻的甲醇提取物(过滤和减压蒸干)。抑藻活性检测表明,当浓度为4.0 mg/mL时,此甲醇提取物明显抑制了米氏凯伦藻的生长。进一步采用2种液液萃取方法,对此提取物进行分离,共获得8个液液萃取分离组分。这些组分对米氏凯伦藻均表现出抑藻活性。在此基础上,采用化学成分系统预试验方法,初步分析了这些抑藻活性组分的化学成分。结果表明,刺松藻甲醇提取物的液液萃取分离组分中主要含有鞣质、有机酸和黄酮。最后,对抑藻活性组分进行了硅胶GF_(254)薄层层析检测,得到了较为适宜的展开剂,为后续采用硅胶柱层析进行分离纯化奠定了良好的实验基础。目前,国内外尚未见刺松藻抑藻活性物质的相关研究。

刺松藻多糖免疫调节与抗肿瘤增效研究

目的研究刺松藻多糖(CFPS)对荷瘤小鼠化疗的免疫调节与抗肿瘤增效。方法以Hca-F肝癌小鼠为模型,采用重量分析法和TUNEL检测分析CFPS抗肿瘤作用;采用中性红比色法、MTT法检测CFPS对小鼠脾脏巨噬细胞吞噬活性、淋巴细胞杀瘤活性;ELISA法检测CFPS对血清中细胞因子分泌水平影响。结果与对照组相比,CFPS组、5-Fu组和CFPS与5-Fu联合用药组抑瘤率分别为59.77%、60.05%,72.84%,抑瘤作用显著增强(P<0.05);CFPS组、5-Fu组、CFPS与5-Fu联合用药组肿瘤细胞出现明显凋亡迹象。CFPS调节细胞因子IL-10、IL-12、TNF-α分泌均有显著性作用(P<0.05),IL-10、TNF-α在5-Fu组、CFPS与5-Fu联合用药组间差异显著(P<0.05)。结论 CFPS对荷瘤小鼠有免疫调节活性,在肿瘤的免疫治疗中发挥作用,能直接起到抑瘤作用。并可明显增强抗肿瘤药物5-fluorouracil(5-Fu)的抗肿瘤作用,可明显改善预后。

海洋管藻目绿藻——刺松藻和假根羽藻PSI荧光特异性的研究

采用分离、原位扫描和光谱分析方法 ,将管藻目绿藻刺松藻和假根羽藻的叶绿体、类囊体膜、PSI复合物及其亚复合物的结构及光谱性质与软丝藻和菠菜做了比较。结果表明 ,管藻目绿藻缺少作为高等植物PSI表征的 730nm长波荧光 ,这一特异现象主要与LHCI结构的差异有关。采用PAGE法分离出的 4种PSI复合物的荧光主发射峰分别在 698、690、685和677nm ,在 71 0— 71 5nm处有一个随分子量减小而逐渐明显的肩峰。不同去污剂处理只影响PSI复合物荧光峰的高低 ,而不影响其峰位。PAGE再分离得到的假根羽藻LHCI由 2 4—2 7.5kDa的 4种多肽构成 ,Chl -a Chl-b =1 .2 ,77K荧光发射峰在 682nm ;CCI只含有 67和5 6kDa多肽 ,是叶绿体 71 5nm荧光的发射部位。当有LHCI存在时 。

刺松藻和粗枝软骨藻脂溶性化学成分GC-MS分析

目的分析刺松藻和粗枝软骨藻脂溶性化学成分,为其开发利用提供理论依据。方法采用乙醚提取刺松藻和粗枝软骨藻脂溶性成分并用气相色谱-质谱-计算机联用技术对其进行分析。结果从刺松藻中分离鉴定出10个化合物,它们占总脂的92.15%,其主要成分为十四烷酸(4.43%)、正十六烷酸(33.01%)、植醇(8.18%)、油酸(7.07%)、十八碳二烯酸(3.69%)、十六碳三烯酸(3.12%)和豆甾醇(28.83%)等。从粗枝软骨藻中鉴定出16个化合物,占总脂的75.21%,其主要成分为荜澄茄油烯(5.77%)、十四烷酸(1.65%)、正十六烷酸(26.03%)、油酸(5.73%)、十八碳二烯酸(2.24%)、十八碳三烯酸(6.60%)、胆甾醇(7.22%)、胆甾-7,24-二烯-3-醇(11.89%)和豆甾-5,24(28)-二烯-3-醇(3.05%)等。结论饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、甾醇类成分是两种藻的主要成分,刺松藻和粗枝软骨藻脂溶性成分具有很好的药用前景。

海洋管藻目绿藻刺松藻光系统Ⅰ复合物的分离

采用TritonX 10 0蔗糖密度梯度离心法 ,从管藻目绿藻刺松藻中分离到三种不同形式的光系统Ⅰ (PSⅠ )复合物 .区带Ⅲ富含PSⅠ核心复合物 (CCⅠ ) ,叶绿素 (Chl)a/b >2 0 ,在温和的聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)中只显示一条PSⅠ中心复合物CPⅠ条带 .区带Ⅳ和Ⅴ在 436和 6 74nm、 46 7和 6 5 0nm以及 5 40nm的吸收表明 ,含有Chla、b及管藻黄素和管藻素 ,Chla/b比值分别为 3 2 3和 2 4.经PAGE检测 ,有CPⅠ和CPⅠa两种PSⅠ色素蛋白复合物带 ,因此区带Ⅳ和Ⅴ是由CCⅠ和含量不等的捕光复合物LHCⅠ构成的PSⅠ颗粒 .区带Ⅲ只有 6 6和 5 6ku两种核心多肽 ;区带Ⅳ和Ⅴ除了 6 6、 5 6ku多肽以外 ,还有 4种分子质量为 2 5 ,2 6 ,2 6 2和2 7 5ku的LHCⅠ多肽 .室温荧光光谱显示 ,分离物中的各种光合色素之间保持着良好的能量传递关系 ,由Chlb及管藻黄素和管藻素吸收的能量都可以传递给Chla.

管藻目绿藻刺松藻LHCII复合物的分离

采用TritonX 10 0增溶刺松藻类囊体膜 ,经初离心、蔗糖密度梯度离心和Mg2 + 聚集作用后再离心 ,纯化到一种只含有分子质量为 2 80 0 0u脱辅基蛋白的LHCII复合物。证实此种多肽为同时结合有Chla、Chlb和管藻黄素及管藻素的色素蛋白复合物 ,Chla/b =0 .91。吸收和荧光光谱显示分离物中各种色素之间保持着良好的能量传递关系 ,其中管藻黄素及管藻素吸收的光能可直接传递给Chla 。

温度和光照强度对刺松藻生长效果影响研究

为探明刺松藻海区养殖期间生长与光照强度、温度之间的关系,开展了刺松藻海区养殖效果研究。结果表明,刺松藻能在较宽的温度范围内生存和生长,水温在25℃以下时,生长速度随温度的升高而加快;水温在25-30℃之间时刺松藻仍能生长,但生长速度随温度的升高而减慢,水温30℃以上时藻体顶端开始变白,停止生长。同时刺松藻不同生长阶段对光照强度要求有明显的差异,养殖前期(第1d到40d左右),在水深0.5m处的生长速度最快(0.067±0.008 cm.d-1);养殖中期(第60d到90d),在水深1.5m处生长速度最快(0.144±0.010 cm.d-1);整个养殖过程中,以1.0m的水深处平均生长速度最快(0.256±0.027 cm.d-1)、产量最高。

刺松藻抑菌活性成分初步研究

以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门氏菌、藤黄微球菌为供试菌,对刺松藻全藻甲醇/氯仿(1∶1)提取物各组分进行了初步的抑菌活性测试,结果表明石油醚组分C3具有一定的抗菌活性。对组分C3进行进一步的分离,从中获得一个纯化合物Ⅰ,通过波谱手段鉴定其结构为植醇乙酸酯。

管藻目绿藻刺松藻(Codium fragile)PSI色素蛋白复合物结构及多肽组成

采用温和的聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)法 ,从管藻目绿藻刺松藻中分离到不同解离程度的光系统I(PSI)复合物 ,以及核心复合物CCI、捕光复合物LHCI和LHCI的亚组分 ,并就其多肽组成及相互关系做了研究。纯化的CCI复合物只含有66和56kDa多肽 ,荧光发射主峰在714～715nm ;LHCI的77K荧光峰在683～684nm ,没有高等植物730nm特征荧光 ,含有PSI复合物中的全部4种24.7～27.5kDa多肽。将中心复合物CPI再电泳 ,得到了只含有24.5和27.2kDa多肽的LHCI亚组分。从而证实刺松藻LHCI也可分裂为含有光合色素的两个部分 ,它们与CCI结合的紧密程度不同。

管藻目绿藻刺松藻(Codium fragile)PSII捕光复合物的结构研究

采用ＰＡＧＥ法对管藻目绿藻刺松藻的色素蛋白复合物进行了分离，并研究了４ 种主要的捕光复合物ＬＨＣＰ１ ，ＬＨＣＰ２ ，ＬＨＣＰ３ 和ＬＨＣＰ３′的色素和光谱特性等；通过对最大的捕光复合物ＬＨＣＰ１ 的再分离，进一步得到了与其他３ 种小分子量捕光复合物相对应的条带，证明ＬＨＣＰ２ ，ＬＨＣＰ３ 和ＬＨＣＰ３′都是ＬＨＣＰ１ 的组成成分，并提出管藻目绿藻的４ 种主要的捕光复合物之间并不象高等植物那样是单体和寡聚体的关系。

管藻目绿藻刺松藻PSⅡ捕光复合物多肽结构分析(英文)

对管藻目绿藻刺松藻 (Codiumfragile (Sur.)Hariot.)的 4种主要的捕光复合物LHCP1-3 和LHCP3′的多肽组成和相互关系进行了研究。LHCP1在SDS_PAGE中主要呈现 34 .4、31.5、2 9.5、2 8.2和 2 6 .5kD 5种多肽 ,其中 34 .4和31.5kD多肽是高等植物所没有的 ;LHCP3 含有LHCP1中除了 34 .4kD多肽以外的其他 4种多肽 ,而LHCP3′只含有2 8.2和 2 6 .5kD两种多肽。若LHCP1不经处理直接进行SDS_PAGE ,发现较易从LHCP1上脱落的是 34 .4、2 8.2和2 6 .5kD多肽 ,这表明它们可能位于较外侧 ,而 31.5和 2 9.5kD多肽则靠近核心 ;2 8和 2 6kD两种多肽常出现在刺松藻的中心复合物CPa中 ,可能是与CCⅡ结合最为紧密的LHCⅡ多肽。根据上述结果提出了

一种刺松藻来源的硫酸阿拉伯聚糖的制备及特征结构表征

刺松藻(Codium fragile)经水提-醇沉获得粗多糖,进一步将刺松藻粗多糖(CFP)通过Q-Sepharose Fast Flow(QFF)阴离子交换柱纯化得到6个多糖组分CFP1～CFP6,其中,在CFP6中发现纯度较高的阿拉伯聚糖.采用高效凝胶渗透色谱与十八角激光散射仪联用法和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱法对CFP6的分子量及单糖组成进行了分析.结果表明,CFP6是一种分子量为79290的多糖,由阿拉伯糖(Ara)和半乳糖(Gal)组成,二者摩尔比为14. 8∶1. 0.通过多维核磁共振波谱、液相色谱-质谱联用及二级质谱等方法对CFP6的糖苷键连接方式及其寡糖序列结构进行表征,进一步阐明了该复杂多糖的特征结构.经判断,CFP6主链由Ara组成,通过β-(1→3)糖苷键连接,在Ara的C2位存在分支结构,硫酸基位于Ara的C4或C2位.

刺松藻对皱纹盘鲍的饵料效果

皱纹盘鲍摄食刺松藻的日摄食率达１１．７１％，高于海带；日增重率为２６．４％，为海带的７３．３％。用刺松藻做皱纹盘鲍度夏期间的天然饵料有其优越性。

刺松藻内生真菌长枝木霉的化学成分研究

对烟台近岸的绿藻刺松藻来源的一株内生真菌长枝木霉的次生代谢产物进行了探索.通过硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析、制备薄层层析和高效液相色谱等色谱分离手段,以及超导核磁共振等波谱鉴定技术,从该菌的马铃薯-葡萄糖和菊芋-葡萄糖液体培养基发酵产物中继续分离并鉴定了5个化合物,包括5α,8α-环氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（1）;麦角-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇（2）;β-谷甾醇（3）;5-羟基-3-甲基戊-2-烯酸（4）和角鲨烯（5）.化合物4和5均为首次从木霉中分离得到.抑菌活性测试结果表明化合物1～5对细菌和真菌无明显抑制作用.

刺松藻(Codium fragile)喂养鲍试验

本研究首次利用大型底栖绿藻刺松藻在夏、秋季高水温期进行了鲍的喂养试验。结果表明,刺松藻的饵料效果优于海带和裙带菜,是鲍的一种优质天然饵料。该发现在一定程度上解决了夏、秋季高水温期鲍缺优质饵料的困难,对加速鲍养殖业的发展有重要意义。

正交优化提取刺松藻多酚及抗氧化活性研究

采用L9(34)正交实验法,优化了微波辅助提取刺松藻中多酚的工艺条件,并对其抗氧化活性、结构等进行了探究,得出最佳提取条件为液固比为1:25,微波辐射时间为55 s,微波辐射功率500 W,多酚含量为2.76 mg·g-1。由光谱分析推测提取物中可能含有黄烷醇类、黄烷酮类等物质,结构中可能含有νO-H、νC-H、νC-O、γ=C-H等振动;以Vc为阳性对照,探究多芬提取物的抗氧化活性。结果表明,刺松藻多酚DPPH自由基、羟自由基半抑制质量浓度IC50分别为20.12μg·mL-1、12.56μg·mL-1,浓度为10μg·mL-1时,对Fe2+诱导卵黄脂蛋白脂质过氧化抑制率为6.74%,为其进一步开发利用奠定了基础。

温度与盐度对刺松藻生长和营养盐吸收的影响

随着养殖业迅猛发展,海洋富营养化问题日益加剧。利用大型海藻所具有的超吸收氮磷营养盐的能力,可有效治理和修复富营养化海域。从福建省连江县罗源湾海域养殖筏架采取经济价值较高的刺松藻,为分析其在海水养殖区的生长条件,在实验室条件下,研究温度(18、25、32℃)和盐度(10、20、30)对刺松藻生长和营养盐吸收的影响。研究结果表明,刺松藻生长受温度影响极显著(P<0.01),受盐度及二者相互作用影响显著(P<0.05);在25℃和盐度20的条件下,刺松藻特定生长率(specific growth rate,SGR)最高,达89.45%;在32℃和盐度30的条件下,刺松藻对营养盐的吸收效果最好,其中对NH+4-N的吸收效果最佳。研究结果为生物修复种群的选择和刺松藻的人工养殖提供了一定的参考。