UPLC测定不同牛大力样品中刺桐碱的含量

目的:优化牛大力中刺桐碱的提取方法,并建立测定牛大力中刺桐碱含量的超高效液相色谱(UPLC)方法,从而比较不同牛大力中刺桐碱的含量。方法:采用单因素和正交实验优化牛大力中刺桐碱的提取,含量测定采用Agilent XDB-C_(18)(1.8μm,2.1×100 mm)色谱柱,乙腈水溶液梯度洗脱,检测波长278 nm,流速0.3 mL/min,柱温30℃。结果:确定牛大力中刺桐碱80℃水浴回流提取的最佳条件为料液比为1∶15 g/mL,提取时间为1.5 h,乙醇浓度为70%;建立的刺桐碱含量测定方法快速、准确、稳定、可靠。结论:22个不同的牛大力样品中刺桐碱含量差别较大,与品种、生长环境和生长年限等因素有关。

中药王不留行中刺桐碱和异肥皂草苷分离鉴定和测定

用制备液相色谱从中药王不留行中分离出刺桐碱、异肥皂草苷等成分，进行了结构鉴定，并采用高效液相色谱法测定了不同产地王不留行药材中两种成分的含量。

微波辅助提取-高效液相色谱分析制备鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱的研究

建立了鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱的微波辅助提取-高效液相色谱(MAE-HPLC)分析方法。优化得到的最佳微波辅助提取条件为:以25%甲醇为溶剂、固液比1:10(m/V)、提取温度50℃、提取时间10min。分析了广东、广西等7个不同产地鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱含量,其中相思子碱含量范围0.03～0.84mg/g,回收率89.6%～92.9%,相对标准偏差(RSD)0.4%～3.9%;下箴刺桐碱含量范围0.06～0.62mg/g,回收率88.8%～95.5%,RSD 1.1%～3.4%。利用半制备高效液相色谱分离得到了相思子碱和下箴刺桐碱对照品,并采用电喷雾质谱(ESI-MS)和核磁共振(1H NMR)对其结构进行了表征。

王不留行刺桐碱提取工艺的比较研究

本实验采用高效液相色谱(HPLC)法检测王不留行刺桐碱含量为评价指标,分别采用单因素试验法和正交试验法对水浴回流提取和超声提取对王不留行刺桐碱的提取工艺进行比较。结果表明:超声提取王不留行刺桐碱的最佳工艺参数为液固比10∶1 mL/g,60%乙醇在350 W功率、80℃下提取40 min,在该工艺条件下王不留行刺桐碱含量为0.395 mg/g;水浴回流提取王不留行刺桐碱的最佳工艺参数为乙醇浓度75%,提取温度95℃,提取时间2 h,液固比12∶1 mL/g时,王不留行刺桐碱含量为0.345 mg/g。超声提取王不留行刺桐碱的提取效率、稳定性和重复性都优于水浴回流提取法。

毛鸡骨草中相思子碱和下箴刺桐碱含量测定

目的测定不同产地和部位的毛鸡骨草药材中相思子碱和下箴刺桐碱含量。方法高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为水-甲醇-乙腈-冰醋酸-三乙胺(82:13:5:0.2:0.3),流速为:1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温为室温。结果测定样品14个,相思子碱和下箴刺桐碱两种成分均达到基线分离。结论方法简捷、快速,结果准确,可为毛鸡骨草药材的质量评价提供依据。

海帕刺桐碱药理作用的研究

目的:探讨海帕刺桐碱的药理作用。方法:采用小鼠耳廓肿胀法、免疫器官重量和溶血素生成方法,四氯化碳(CCl4)和异硫氰酸萘酯制备肝损伤模型;观察海帕刺桐碱抗炎、免疫增强和抗肝损伤作用。结果:海帕刺桐碱大、小剂量组均明显减少小鼠耳廓重量;增加小鼠胸腺、脾脏重量,提高小鼠血清溶血素水平;明显降低CCl4和异硫氰酸萘酯所致肝损伤小鼠血清中转氨酶活性及胆红素含量。结论:海帕刺桐碱具有抗炎、免疫增强和抗肝损伤作用。

RP-HPLC测定鸡骨草中的下箴刺桐碱

目的建立测定鸡骨草药材中下箴刺桐碱的方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Lichrospher C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为水-甲醇-乙腈-冰醋酸-三乙胺(82:13:5:0.2:0.3),流速为1.0 ml.min-1,检测波长为220 nm,柱温为室温。结果线性范围2.9-17.4 mg.L-1(r=0.9999,n=6);平均回收率为102.9%,RSD=1.9%(n=6)。结论所建方法简便、快速,结果准确,可为鸡骨草药材的质量评价提供参考。

快速荧光测定初筛高刺桐碱积累量菌株

下箴刺桐碱是一种吲哚类生物碱,被认为是多种中草药的有效成分之一。彩色豆马勃Pisolithus tinctorius是一种硬皮马勃目的大型真菌,能在菌丝体内积累下箴刺桐碱。下箴刺桐碱具有比较强的天然荧光,但其荧光光谱与色氨酸几乎完全重叠,在用荧光方法筛选下箴刺桐碱高产菌株的过程中,共存的色氨酸会严重干扰下箴刺桐碱的定量。本研究构建一种色氨酸的快速荧光检测方法,运用此方法筛选出的一株彩色豆马勃菌株下箴刺桐碱含量(鲜质量含量)达到3.39nmol·mg^(-1)。

超高效液相色谱-串联质谱法测定药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素

采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立了同时测定中药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的分析方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;质谱采用电喷雾电离,负离子源,以多反应监测模式检测,外标法定量。这3种分析物在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.9985,刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的检出限分别为2μg/g、0.02μg/g和30μg/g。在3个添加水平下,考察了该方法的准确度和重复性(n=6),且3种分析物的加标回收率在86.0%~104%之间,相对标准偏差为2.12%~5.57%。采用该方法分别对生长周期为3年、7年、10年和15年的牛大力中3种指标成分进行了检测,比较了3种指标成分含量的差异,并据此确定了7年是最佳栽培年限。该方法具有简单、快速、分离效果好的优点,可用于不同生长周期中药材牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的同时分析检测。

王不留行中刺桐碱的分离鉴定及抗炎活性研究

利用有机溶剂萃取、制备型薄层层析、半制备高效液相色谱三步分离法从王不留行中分离出生物碱物质,鉴定并探讨其抗炎活性。王不留行种子经石油醚脱脂、乙醇回流提取,二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇依次萃取,获得水饱和正丁醇相(组分A3)。组分A3经制备型薄层层析分离,展开剂为正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5,上层),于紫外灯254 nm、365 nm下检视,分为7个组分(组分B1~B7)。含量高且峰形简单的组分B2经半制备高效液相色谱分离,甲醇-水作为流动相,获得1个单体化合物(样品I)。经HPLC分析,样品I纯度高于98%。通过化学反应、UV、IR、LC-MS、1H NMR、13C NMR多种波谱分析方法对该化合物进行结构解析,确定其分子式为C14H18N2O2,化学名称为N,N,N-三甲基色氨酸,中文名为刺桐碱(hypaphorine),属于吲哚类生物碱。再采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀的炎症模型,观察刺桐碱的抗炎效果。连续给药6 d后,刺桐碱剂量为25 mg·kg-1时,可显著抑制小鼠耳廓肿胀,肿胀抑制率为52.02%。与阿司匹林(200 mg·kg-1)的肿胀抑制率(67.48%)相比,无显著性差异。本研究首次采用一条新工艺路线获得王不留行刺桐碱,并发现其在整体水平上具有抗炎活性,有望成为化学一类新药的候选分子。

工业化提取中药王不留行中黄酮苷和刺桐碱的工艺探究

探究工业化提取王不留行中黄酮苷和刺桐碱的最佳生产工艺。先通过索式抽提法考察生王不留行和炒王不留行含油量,然后采用单因素和正交实验设计考察不同料液比、时间和乙醇浓度对乙醇浸渍提取生王不留行中黄酮苷和刺桐碱的含量影响。最佳提取工艺为料液比1:14,提取时间4 d,乙醇浓度75%,黄酮苷和刺桐碱的提取率分别为5.37 mg/g和1.22 mg/g。该提取工艺简单合理,结果稳定,节省能源,为工业化提供参考。

王不留行炮制前后的UPLC指纹图谱比较及刺桐碱和王不留行黄酮苷的含量测定

目的:比较王不留行炮制(清炒)前后的指纹图谱差异,并测定其炒制前后刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量。方法:采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为YMC Trait C_(18),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.35 mL/min,检测波长为219 nm,柱温为35℃,进样量为1μL。以王不留行黄酮苷为参照,绘制王不留行生品及其炮制品(各17批,编号分别为S1~S17、CS18~CS34)的指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价及共有峰指认;采用SPSS 20.0软件进行聚类分析、主成分分析和因子分析。采用上述UPLC法测定王不留行生品及其炮制品中刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量。结果:17批王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱中均有共有峰5个,相似度均大于0.99;共指认了刺桐碱和王不留行黄酮苷等2个共有峰。聚类分析结果显示,S1~S17聚为一类,CS18~CS34聚为一类;主成分分析及因子分析结果显示,第1主成分的方差贡献率为76.418%,刺桐碱、王不留行黄酮苷在第1主成分上有较高载荷(特征值分别为0.976、0.966)。刺桐碱、王不留行黄酮苷检测质量浓度的线性范围分别为6.437~321.832、7.729~386.437μg/mL(r均大于0.999);检测限、定量限分别为0.085、0.284 ng(生品)和0.739、2.465 ng(炮制品);精密度、重复性、稳定性(12 h)、耐用性试验的RSD均小于3%(n=6或n=5);平均加样回收率分别为96.42%(RSD=0.85%,n=6)、99.13%(RSD=1.74%,n=6)。两种成分的含量分别为0.11%~0.20%、0.42%~0.63%(生品)和0.08%~0.11%、0.34%~0.50%(炮制品)。结论:成功建立了王不留行生品及其炮制品的UPLC指纹图谱。王不留行炒制前后的化学成分虽一致性较好,但炒制后刺桐碱、王不留行黄酮苷的含量均有所降低。

HPLC同时测定牛大力中刺桐碱和高丽槐素的含量

目的:建立牛大力中刺桐碱和高丽槐素含量的测定方法。方法:采用超声法提取药材,通过对提取工艺及色谱条件进行优化建立测定方法,同时测定牛大力中刺桐碱、高丽槐素的含量。HPLC色谱条件为色谱柱C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%冰醋酸水溶液梯度洗脱,检测波长为280 nm和310 nm,流速为1.0 m L·min^(-1),柱温为30℃。结果:刺桐碱进样量在0.284 4~1.422 0μg与峰面积值呈现良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.6%,RSD为1.57%(n=6);高丽槐素进样量在0.087 0~0.435 2μg与峰面积值呈现良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.9%,RSD=2.18%(n=6)。结论:该方法准确、简便、重复性好,可用于牛大力药材中刺桐碱和高丽槐素的含量测定。

岭南排石口服液研制与刺桐碱含量测定的研究

目的:采用现代科学工艺研制岭南排石口服液,建立测定岭南排石口服液中刺桐碱含量的方法。方法:以经验方“岭南排石汤”为原方,研制岭南排石口服液。采用超高效液相色谱(UPLC)法测定岭南排石口服液中刺桐碱的含量,色谱条件是:色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速、进样量、检测波长、柱温分别为0.300mL/min、1μL、278 nm、30℃。结果:刺桐碱检测质量浓度的线性范围为0.10~62.5μg/mL(r=0.9999)。采用UPLC法测定岭南排石口服液中刺桐碱含量精密度、稳定性、重复性的相对标准偏差(RSD)分别为0.07%、0.39%、1.30%,加样回收率为1.86%。结论:岭南排石口服液的制备工艺简便可行,成品质量稳定。采用UPLC法测定岭南排石口服液中刺桐碱的含量操作简便,且精密度、稳定性均较高,重复性较好。

牛大力中刺桐碱的分离鉴定和含量测定

目的：首次从牛大力药材中分离制备刺桐碱对照品并应用高效液相色谱方法建立牛大力药材中刺桐碱含量的测定方法。方法：Agilent（SB-C18）（5μm,4.6 mm×150 mm）色谱柱,乙腈-水（1∶9）为流动相,流速为0.8 mL.min-1,检测波长为280 nm,柱温30℃。结果：刺桐碱在0.0113~2.825 mg.mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9996,n=5）,平均回收率（n=9）为99.6%。结论：本方法准确,简便,重复性好,可用于牛大力药材中刺桐碱的含量测定。

炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量及溶出率的影响

目的：研究炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量的影响,探索炮制对王不留行主要化学成分及其溶出率的影响。方法：采用HPLC测定炮制前后王不留行中刺桐碱、王不留行黄酮苷、肥皂草苷、异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷和王不留行黄酮苷H的含量及水煎溶出率,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~12 min,13%A;12~18 min,17%A;18~30 min,20%A）,检测波长280 nm。结果：炮制前,这5个成分的质量分数分别为0.13%,0.70%,0.018%,0.051%,0.11%,炮制后则分别为0.12%,0.52%,0.016%,0.098%,0.091%;5个成分的水煎溶出率分别升高了7.7%,10.2%,10.8%,11.4%,17.8%。结论：炮制后异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷含量有较大幅度上升,而王不留行黄酮苷含量有较大下降,其余成分含量有少量下降。炮制对王不留行中刺桐碱及黄酮苷类成分含量的影响存在一定差异,但炮制后这些成分的水煎溶出率均上升。

RP-HPLC法同时测定鸡骨草药材中的相思子碱和下箴刺桐碱

目的:建立测定鸡骨草药材中相思子碱和下箴刺桐碱含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为KromasilC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为水-甲醇-乙腈-冰醋酸-三乙胺(82∶13∶5∶0.2∶0.3),流速为1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温为室温。结果:相思子碱和下箴刺桐碱线性范围均为1.1～55mg·mL-1(r=0.9999);平均回收率(n=6)分别为104.6%和103.5%。结论:所建方法简便、快速,结果准确,为鸡骨草药材的质量评价提供了可靠的方法。

HPLC测定不同品种牛大力中刺桐碱、芒柄花素和高丽槐素的含量

【目的】比较不同品种牛大力中刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量差异,为选育牛大力优良品种提供参考依据。【方法】采用HPLC法测定牛大力不同药用部位中刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量,并根据各药用部位的占比,还原牛大力的整体含量。【结果】不同品种牛大力的刺桐碱含量由高到低依次为大叶牛大力(3.889 mg·g^(-1))>中叶牛大力(3.579 mg·g^(-1))>小叶牛大力(1.357 mg·g^(-1)),高丽槐素量的大小依次为大叶牛大力(0.295 mg·g^(-1))>小叶牛大力(0.213 mg·g^(-1))>中叶牛大力(0.181 mg·g^(-1)),而芒柄花素的含量基本一致,且均低于0.02 mg·g^(-1)。【结论】不同品种牛大力刺桐碱、芒柄花素及高丽槐素的含量存在较大差异,大叶牛大力的品质最优,其次为中叶牛大力。

二氢-β-刺桐啶碱对交感神经元烟碱诱发电流的抑制作用

目的 :观察二氢 -β-刺桐啶碱对培养的新生大鼠颈上神经节细胞烟碱诱发电流的抑制作用。方法 :用气压给药和膜片钳全细胞记录技术比较烟碱诱发电流幅度。结果 :二氢 -β-刺桐啶碱竞争性拮抗烟碱作用 ,其平衡解离常数约为0 015mmol/L。结论 :二氢

鸡骨草中生物碱的提取与测定

目的优化鸡骨草中生物碱的提取工艺,建立相思子碱、下箴刺桐碱的超高效液相色谱（UHPLC）测定方法。方法 以相思子碱、下箴刺桐碱的提取量为指标,采用正交试验设计考察乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数对提取工艺的影响;色谱条件：Shim-pack XR-ODSⅡ色谱柱（2.0 mm×75 mm,2.2μm）;流动相：甲醇-乙腈-水-乙酸-三乙胺（6∶2∶92∶0.2∶0.3）;检测波长280 nm;流速0.4 mL/min;进样量2μL;柱温30℃。结果 最佳提取条件为加10倍量45%乙醇,提取时间40 min,超声提取2次;相思子碱和下箴刺桐碱分别在1.49-148.80μg/mL（r=0.9998）,0.84-84.20μg/mL（r=0.9998）范围内有良好的线性关系,加样回收率为98.9%、98.2%,RSD均〈2%。结论 本提取方法简单、快速、效率高;测定方法准确、高效;不同产地鸡骨草中相思子碱、下箴刺桐碱含量差异明显,以根部含量最多,其次为茎部,最少的部位是叶子。为鸡骨草药材的有效开发利用和质量控制提供了参考依据。